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.2019年4月;15(1):106-111.
doi:10.5152/iao.2019.6573。

层粘连蛋白B1在发育中大鼠耳蜗中的差异表达

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层粘连蛋白B1在发育中大鼠耳蜗中的差异表达

杜志辉等。 国际先进耳鼻喉科杂志. 2019年4月.

摘要

目标:探讨LaminB1在出生后大鼠耳蜗中的时间表达模式,以及LaminB1是否与耳蜗发育相关。

材料和方法:使用出生后第0天(p0)到第21天(p21)的Sprague-Dawley大鼠。分别解剖了包括螺旋韧带、螺旋神经节细胞(SGC)和基底膜(BM)在内的血管纹(STV)组织,包括Corti器官。应用免疫荧光、定量实时聚合酶链反应和western blot检测单个耳蜗组织中LaminB1在mRNA和蛋白水平的表达。

结果:免疫荧光显示,LaminB1定位于外毛细胞、内毛细胞、Kolliker器官、Reissner膜、SGC、STV和螺旋韧带。在耳蜗发育过程中,中阶周围的染色强度降低。STV、SGC和BM中LaminB1 mRNA和蛋白的表达在p0时达到最高水平,但在p21时逐渐下降到最低水平。

结论:我们的研究提供了直接证据,证明LaminB1在发育中的耳蜗中表达,并在耳蜗组织中受发育调控,这表明LaminB1可能在耳蜗的发育中发挥作用。我们的结果为进一步研究层粘连蛋白B1在外周听觉系统中的生理功能提供了理论依据。

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利益冲突:作者没有利益冲突需要声明。

数字

图1。a–p
图1。a–p
层粘连蛋白B1在发育中耳蜗的定位和发育变化。(a,e,i,m)p0组,(b,f,j,n)p7组,(c,g,k,o),p14组,(d,h,l,p)p21组。LaminB1蛋白用异硫氰酸荧光素(绿色荧光)标记,细胞核用DAPI(蓝色荧光)染色。层粘连蛋白B1主要在SGC(a–h)、BM(a–d,i–l)、STV(a–d,m–p)、Reissner膜(a–d)和螺旋状角膜缘(a–d)中表达。OHC,红色箭头;IHC,粉色箭头;SGC,黄色箭头;STV,白色箭头。比例尺:a–d,100μm;e–h,m–p,50μm;i–l,25μm。
图2。a–c
图2。a–c
在发育中耳蜗中,层粘连蛋白B1在mRNA水平的表达。在出生后发育期间,耳蜗分离组织中的LaminB1表达下调。GAPDH是参考基因。a) STV中LaminB1的相对mRNA表达。b) SGC中LaminB1的相对mRNA表达。c) 骨髓中LaminB1的相对mRNA表达。**p<0.001。
图3。a–f
图3。a–f
LaminB1在发育中耳蜗蛋白水平的表达。分别在STV、SGC和BM(a–c)中检测到与LaminB1和β-actin相对应的70kDa和43kDa条带。显示了大鼠耳蜗不同组织中LaminB1发育表达的相对定量(d–f)*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001。p0组为0STV、STV;0SGC,p0组SGC;0BM,p0组BM。

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