跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2018年8月2日；13（8）：e0201744。
doi:10.1371/journal.pone.0201744。 2018年电子采集。

胆道结扎诱导肝纤维化小鼠模型中瓜氨酸化胶质纤维酸性蛋白的积累

宋恩金 1, 纪元公园 1, 金正恩（Mo-Jong Kim） 2 三, 张炳基 三, Yong-Chul Jeon公司 三, Hee-Jun Kim先生 三, 石谷明仁 4, Hyoung Su Kim先生 5, 基泰硕 6, 董俊金（Dong Joon Kim） 6, 重庆公园 1, Eun-Kyoung Choi先生 2 三, Myoung-Kuk Jang先生 5
附属公司

胆道结扎诱导肝纤维化小鼠模型中瓜氨酸化胶质纤维酸性蛋白的积累

宋恩金等。 公共科学图书馆一号. .

摘要

肝星状细胞（HSC）在肝纤维化中起着关键作用，因为它们合成胶质纤维酸性蛋白（GFAP），该蛋白在活化的HSC中增加。GFAP表达的HSC和肌成纤维细胞在肝纤维化病灶内和周围积聚。肽基精氨酸脱氨酶2（PAD2）负责GFAP的瓜氨酸化（cit-GFAP）。然而，PAD2和cit-GFAP在肝纤维化中的作用尚不清楚。为了检测PAD2和cit-GFAP在肝纤维化中的表达，C57BL/6小鼠接受了胆管结扎（BDL）或假手术。与对照组相比，BDL肝脏中PAD2的表达及其酶活性显著增加。此外，PAD2阳性细胞仅在假手术肝的门静脉和小胆管中很少观察到，而在BDL肝的胆管和Glisson鞘中检测到PAD2的阳性细胞数量增加。有趣的是，PAD2与BDL肝脏中的α-SMA阳性细胞和CK19阳性细胞共定位，表明BDL小鼠肝脏的活化HSC和门脉成纤维细胞中PAD2上调。我们还发现，与对照组相比，瓜氨酸蛋白在BDL小鼠的肝脏中高度积累。此外，BDL肝脏中GFAP的表达水平和cit-GFAP的数量高于对照肝脏。与PAD2定位相关，在BDL小鼠肝脏的α-SMA阳性细胞和CK19-阳性细胞中观察到cit-GFAP。这些结果表明，PAD2的表达和激活增加以及瓜氨酸化蛋白（特别是cit-GFAP）的增加可能在肝纤维化的发病机制中发挥重要作用。

PubMed免责声明

利益冲突声明

提交人声明，不存在相互竞争的利益。

数字

图1
图1。第3周BDL后肝纤维化的发展。
（A） 苏木精和伊红染色显示，假手术对照组的肝组织未显示任何肝脏炎症或胆管损伤。（B） 在BDL小鼠的肝脏中发现了肝脏炎症和门管腔扩张，伴有胆管增生和门周纤维化。（C） 天狼星红染色法显示，假手术对照组的肝组织中未观察到胶原沉积。（D） 在BDL小鼠的肝脏中，观察到胆管和纤维间隔周围有胶原沉积。（E） qPCR分析α-SMA和Col1a1 mRNA水平。（n=9）***P（P）<0.001.
图2
图2。非手术对照组和BDL小鼠肝脏中PAD2表达水平的比较。
（A） 用单克隆抗PAD2抗体western blot分析PAD2蛋白在对照组和BDL小鼠肝组织中的表达水平。（B） PAD2活性的密度分析表明，BDL小鼠（n=9）的肝组织与对照组（n=8）相比，PAD2的活性增加*P（P）<0.05. （C） 对照组和BDL小鼠肝组织中PAD2的免疫组织化学染色。在BDL肝脏中，胆管和Glisson鞘中PAD2阳性细胞数量增加。
图3
图3。假手术对照小鼠和BDL小鼠肝脏中PAD2和α-SMA或CK19的双重免疫荧光。
冷冻切片在共聚焦显微镜下进行检查。（A） 在BDL小鼠的肝脏中，PAD2免疫反应比混乱对照组的肝脏更强烈。BDL小鼠肝脏中的Alpha-SMA免疫反应也比对照组更强烈。PAD2主要与胆管区及其周围的α-SMA阳性细胞共定位。（B）CK19免疫反应在BDL小鼠肝脏中比在对照组肝脏中更为强烈。PAD2也与胆管区及其周围的CK19-阳性细胞共定位。
图4
图4。检测错误操作对照组和BDL小鼠肝脏中的瓜氨酸蛋白。
（A） 用F95抗体进行western blot分析对照组和BDL小鼠肝组织中瓜氨酸蛋白的表达水平。注意，与对照组相比，BDL小鼠肝组织中的瓜氨酸蛋白增加。（B） 对照组和BDL小鼠肝组织中瓜氨酸蛋白的免疫组织化学染色。瓜氨酸蛋白在BDL小鼠的肝脏中更为显著。
图5
图5。检测假手术对照组和BDL小鼠肝脏中的GFAP和cit-GFAP。
使用兔多克隆抗GFAP（Abcam，Cambridge UK）和瓜氨酸化GFAP（CTGF-122R和CTGF-1221）抗体，通过western blot分析对照和BDL小鼠肝组织中GFAP和cit-GFAP的表达水平。注意，与对照组相比，BDL小鼠肝组织中的GFAP和cit-GFAP增加。
图6
图6
假手术对照组和BDL小鼠肝脏中cit-GFAP（CTGF-122R）与GFAP（A）、α-SMA（B）、F4/80（C）、CK19（D）或SE-1（E）的双重免疫荧光。在共焦显微镜下检查石蜡包埋的肝脏切片。比例尺，20μm。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

参考文献

    1. Bataller R，Brenner DA。肝纤维化。临床投资杂志2005；115(2):209–18. 10.1172/JCI24282-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Iredale JP。肝纤维化模型：探索实体器官炎症和修复的动态本质。临床投资杂志2007；117(3):539–548. 10.1172/JCI30542-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Suk KT、Baik SK、Yoon JH、Cheong JY、Paik YH、Lee CH等。肝硬化临床实践指南的修订和更新。韩国肝病杂志2012；18(1):1–21. 10.3350/kjhep.2012.18.1.1-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Bonis PA，Friedman SL，Kaplan MM。肝纤维化是可逆的吗？N Eng J Med 2001年；344（6）：452-4。-公共医学
    1. Higashi T，Friedman SL，Hoshida Y。肝星状细胞是肝纤维化的关键靶点。2017年高级药物交付修订版；121:27–42. 10.1016/j.地址2017.05.007-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型

MeSH术语

物质

赠款和资金

Sung Eun Kim通过韩国国家研究基金会（NRF）获得了基础科学研究项目的资助，该基金会由韩国科学和信息技术部资助（资助编号：2017R1C1B1005996），Myoung Kuk Jang和Sung Eun-Kim获得了哈利姆大学研究基金会的资助（HURF-2015-56）。