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.2012年9月;58(1):28-33.
doi:10.1016/j.meth.2012.07.007。 Epub 2012年7月20日。

微乳液技术在抗体定向进化中的应用

附属公司

微乳液技术在抗体定向进化中的应用

黛安娜·L·布尔等。 方法. 2012年9月.

摘要

研究复杂混合物和组织中的蛋白质表达模式、亚细胞定位和翻译后修饰需要亲和试剂,如抗体。噬菌体乳剂、分泌和捕获(ESCape)是一种新型的微乳液技术,它利用油包水(W/O)乳剂来识别和分离分泌噬菌体颗粒的细胞,这些噬菌体粒子显示出所需的抗体。使用这种方法,一个大型的抗体展示噬菌体文库将与单个隔室中的珠结合。噬菌体微乳液技术使我们能够针对抗原单独查询扩增噬菌体的克隆群体,而不是对大量混合群体进行生物扫描。使用乳剂生成微滴有望通过精细区分与靶点结合的动力学参数来加速噬菌体选择实验。在本研究中,我们证明了噬菌体微乳液技术能够区分两种结合亲和力相差300倍的单链抗体(分别为100nM和300pM)。此外,我们描述了噬菌体微乳液技术在筛选耐高温单链抗体中的应用。

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