图6

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Krit1通过其N端和C端的两个位点与体外微管直接相互作用,Rap1和ICAP-1抑制这种相互作用

在每个实验中,在不存在或存在紫杉醇稳定的MT的情况下培养40 pmoles的Krit1,该MT由150 pmoles纯化微管蛋白体外聚合而成,并在蔗糖梯度上离心。用SDS-PAGE分析上清液(S)和颗粒(P),用荧光法定量Krit1与MT结合的百分比。在没有MT的情况下,Krit1沉淀已经被减少。

(A) 使用不同的Krit1突变体鉴定Krit1上的MT结合位点。箭头表示Krit1 WT或突变体,T:Tubulin。每个实验重复两到四次。

(B) Rap1和ICAP-1抑制Krit1与MT的结合。将200摩尔的Rap1或ICAP-1添加到40摩尔的Krit1和聚合的MT中。每个实验重复三次。