突变体FBW7型不能与NICD结合，并以主导-消极的方式防止MYC降解。（A） FBW7精氨酸点突变体可与MYC有效共沉淀，但不与NOTCH共沉淀。将所示质粒转染293a细胞。用抗FLAG对全细胞裂解物进行免疫沉淀，并通过MT-NOTCH或HA-MYC的免疫印迹分析结果样品。还通过SDS-PAGE和免疫印迹法直接分析全细胞裂解物中的FLAG-FBW7、HA-MYC或MT-NOTCH，以验证转染构建物的表达。所有转染中都包含dnCul1，以阻止FBW7介导的蛋白酶体降解。（B） T-ALL相关FBW7突变体无法介导MYC降解。如图所示转染293a细胞。如图所示，对整个细胞裂解物进行SDS-PAGE和HA-MYC或FLAG-FBW7免疫印迹。（C） 肿瘤衍生FBW7突变体主要通过WT-FBW7抑制MYC周转。用恒定量的HA-MYC转染293a细胞，增加FLAG-FBW7-γ或恒定量（500 ng）的FLAG-FBW-γ和增加量的FLAG-FBW7--γ-R465H（1–5μg）的组合。突变体与WT FBW7表达的比率显示在7–9号通道上方。HA-cdk2不影响FBW7对MYC的转换，被纳入转染对照。如图所示，对全细胞裂解物进行SDS-PAGE和HA-MYC、HA-cdk2或FLAG-FBW7免疫印迹。
