新闻稿
(研究成果)采用再现角膜结构的培养模型的眼睛刺激性试验法在OECD测试指南中收录

-用于不使用实验动物的化妆品等的安全性试验-

信息公开日:2019年7月5日(星期五)

重点

为了评价化妆品原料等的安全性,新的眼刺激性试验法被经济合作开发机构(OECD)制定的统一的试验法所收录。这个试验方法是,将化学物质滴到模拟角膜结构的培养模型上后,只需测定3分钟电阻值的变化,就能判定化学物质的刺激性。今后,作为不使用实验动物的简便且迅速的试验法,期待被用于安全性高的化妆品等的开发。

概要

农研机构(理事长:久间和生)与国立医药品食品卫生研究所(所长:奥田晴宏,以下简称“国立卫研”)、关东化学株式会社(社长:野泽学)共同开发的,判定不使用动物而对化学物质眼睛刺激性的试验法Vitrigel-Eye Irritancy Test(Vitrigel-EIT)法1)》是由作为国际公认法的经济合作开发机构(OECD)制定的统一试验法(OECD测试指南2))。
在开发化妆品和医药品等的时候,需要确认作为这些成分包含的化学物质对人的安全性。像这样的“安全性试验”大多是使用动物进行的,但是近年来,利用不使用动物的人细胞的动物实验代替法的开发在世界范围内得到了推进。
在生物体内细胞周围的骨胶原纤维,作为细胞的立足点,发挥着构成组织的骨架的作用。农研机构在再生由多细胞构成的组织时,关注在生体内组织中保持细胞的脚手架,是与这个脚手架相匹敌的高密度骨胶原纤维网的新素材。骨胶原塑料3)”的产品等的开发。2013年,利用利用这种素材构筑的人角膜上皮的培养模型,开发了对眼睛敏感的化学物质的安全性试验法(Vitrigel-EIT法)。特点是不使用实验动物,能迅速且高灵敏度地得到再现性高的测试结果。
关于开发的Vitrigel-EIT法,在国内3个设施(一般财团法人食品药品安全中心秦野研究所、株式会社博佐里搜索中心、株式会社Dacel)中研究成果4)并验证了其妥当性。之后,经过专家对第三方机构的审查,于2019年6月,本试验法被收录在OECD测试指南上。今后,作为不使用实验动物,简便且迅速地判断安全性的试验法,期待在国内外的安全性高的化妆品等的开发中被活用。

相关信息

预算:农林水产省“阿古力健康实用化研究促进项目(医药品作物、医疗用材料等的开发)”(No.6320)专利:专利第5892611号、专利第5933223号

咨询处等
研究推进负责人:
农研机构生物功能利用研究部门部长吉永优
关东化学株式会社董事上席执行董事技术·开发本部长加藤胜
研究负责人者:
农研机构生物功能利用研究部门新产业开拓研究领域竹泽俊明
国立卫研安全性生物试验研究中心安全性预测评价部小岛肇
关东化学株式会社技术开发本部伊势原研究所山口宏之
宣传负责人者:
农研机构生物功能利用研究部门宣传策划人高木英典
关东化学株式会社技术·开发本部技术·开发部高木信幸


详细信息

用语解说

Vitrigel-Eye Irritancy Test(Vitrigel-EIT)法

化学物质附着在眼睛上时,对眼睛有无伤害及其严重性进行评价的试验法。具体来说,首先,将骨胶原Bitrichil膜作为人的角膜上皮细胞的脚手架进行6天的培养,制作出与人的角膜上皮组织相似的约6层细胞层和上皮屏障功能的培养模型。接下来,通过测定在该培养模型中添加化学物质后电阻值的变化3分钟,来判断对眼睛是否有刺激性。以往的试验法中,通过观察兔子眼睛滴下化学物质后的角膜浑浊和肿胀等,或者测定培养细胞和培养模型上滴下化学物质后的细胞生存率,来判定化学物质的眼睛刺激性。因此,从化学物质的添加到判定,需要几个小时到几个星期。另一方面,Vitrigel-EIT法只需在添加化学物质后测定电阻值变化3分钟,就能迅速、高灵敏度、再现性高的测试结果。

OECD测试指南
为了获得有关化学物质及其混合物的物理化学性质、对生态系统的影响、生物分解及生物浓缩、以及人类健康影响等方面的知识,是经经济合作开发机构(OECD)国际同意的试验方法。日本的化学物质审查限制法和欧洲的化学物质的登记、评价、认可及限制(REACH)等管理各国化学物质的法令,原则上是根据OECD测试指导方针的试验法来规定的。
骨胶原塑料
是由与体内的结合组织相匹敌的高密度骨胶原纤维网构成的新素材。骨胶原Bitori凝胶是由低密度骨胶原纤维网构成的传统骨胶原凝胶在低温下充分干燥,变成玻璃状的坚硬透明的干燥体后,再加水后制成的。骨胶原微粒胶原膜不仅透明度好,强度和高分子蛋白质的透过性也很好。因此,可以用于细胞的培养或者药物的徐放等。在这样的背景下,期待在再生医疗、创药或动物实验代替法领域的实用化。此外,Bitori凝胶是指在将以前的水凝胶玻璃化后,再加水后得到的稳定状态的凝胶。农研机构注册了术语“BitoryGel”(第5602094号)。
研究成果
关于开发的试验法,是验证技术转移的难易度、设施内再现性、设施间再现性以及关联性(预测性能)的研究。

参考信息

参考图

照片Vitrigel-EIT法的测定装置