STEM增强矩阵
Abwiz Bio应用抗体基因工程技术,开发了新一代抗体亲和性提高技术STage Enhanced Maturation(STEM)系统。该技术是一种由三级抗体亲和成熟平台组成的工程技术,增强了客户获得的现有抗体的抗原结合能力。STEM系统是CDR※步行(从1个文库中选择最好的CDR克隆后,进行下一个CDR的工程)这样的,超过了以往的亲和性提高技术的系统,以制药企业为中心至今为止提供了很多服务。
※CDR:Complementarity Determining Region,互补性决定区域
抗体的CDR区域形成了对抗原的大部分结合部位。该区域构成了重链CDR H1~H3、轻链CDR L1~L3共计6个循环区域,通过对这些区域导入变异,可以改变抗体亲和性。Abwiz Bio确立了最大化可取样抗体变化的方法,同时避免了会损害抗体整体稳定性的突变。Abwiz Bio的STEM系统由以下3个阶段组成。
Abwiz Bio独有的三级亲和力提升平台
舞台1
构建独立靶向互补决定区(CDR)H1、H2、H3、L1、L2、L3部分的基因文库
舞台2
结合选自Stage1的H1+H2+H3和L1+L2+L3构建基因文库
舞台3
从Stege2中选择的H链和L链组合构建基因文库
通过经过这3个阶段,用人、小鼠、兔抗体进行平衡解离常数KD已成功将值提高10倍以上。另外,还可以实施交叉反应性的赋予、抗体亲和性的减少、特异性的赋予和消失等抗体工程。
Abwiz Bio开发的RabWizTM通过活用系统,可以以高吞吐量筛选STEM系统产生的庞大抗体库。根据ELISA、流式细胞测量、SPR、功能性测试等几种方法,进行符合客户要求的性能验证。
由于抗体的原始亲和性、氨基酸序列、抗原性质各不相同,因此STEM系统以Stage1~Stage2的实施为基础,根据其结果与客户进行开放讨论,决定是否需要实施Stage3。
订单流程(标准作业内容)
在和客人的细致协商下开始工作。
请准备:抗体基因序列或抗体的氨基酸序列。如果可能的话,请提供原来的抗体和抗原。
【标准交货期】
*Stage1~2:约3.5个月
*Stage3(可选):约1.5个月
实施例
①只选择缓慢解离速度的抗体克隆的Off-rate ELISA
即使是比野生型更高的亲和性抗体,在第1阶段的筛选中,也残留有解离速度快的克隆。
在第三阶段的筛选中,成功地选择了解离速度非常慢的克隆。
②通过抗体工程,在保持对抗原B的亲和性的同时,飞跃性地提高对抗原A的亲和性
与抗原B同源性非常高的抗原A的抗体取得困难的案件。通过STEM系统的工程,成功地赋予了新的抗体A的特异性。
③取得具有高热稳定性和抗原反应性的克隆
在Stage2中,通过热处理筛选成功获得了具有高热稳定性和高抗原性的克隆。这与Developability密切相关,该Developability分析了作为治疗药物开发中的引物抗体候选物的开发适合性。
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