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电泳银染色试剂盒Silver Stain KANTOⅢ

银stein KANTOⅢ,是聚丙烯酰胺凝胶电泳后的蛋白质和核酸能染色的银染色配套元件。

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产品编号 产品名称 保存温度 标准 包装 价格
37937-96 银甾烷KANTOIII(电泳用银染色试剂盒)
Silver stain KANTO III
冷藏 电泳用 1kit ¥14,000
37940-96 银着色剂KANTO凝胶清洗液质谱用
Silver stain KANTO gel washing solution for MS
冷藏 电泳用 1kit ¥6,500

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・购买和使用试剂时

银stein KANTOⅢ

特性

●简便、短时间
CBB染色的凝胶也可以在背景脱色后,用本试剂再染色。
从游泳结束后到显影大约一个小时就能检测到。
切出后,质谱用的试料也可以在约20分钟内制备。

●高灵敏度
蛋白质、核酸(仅PAGE)都可以检测到数ng。
●低危险性
因为没有使用氢氧化钠和氨水,所以没有生成爆炸性的银酰胺的危险性。
●支持染色后的质谱分析
因为不使用戊二醛,所以从染色后切出的凝胶中,可以用清洗液(另售)简单地脱银,可以用于质谱分析。

套件配置

 品名主要成分容量
A 敏化原液 二硫代亚磷酸酯 200 mL × 1
B 染色原液I 硝酸银 200 mL × 1
C 染色原液II 硅钨酸 200 mL × 1
D 显影原液I 甲醛 200 mL × 1
E 显影原液II 碳酸钾钠 200 mL × 1
F 显影停止液 柠檬酸 200 mL × 1

试剂调整

试剂液名称制备方法
固定液 混合甲醇:50mL、醋酸:10mL、去离子水:40mL
敏化液 混合试剂A:5mL、去离子水:95mL
染色液 混合试剂B:5mL、试剂C:5mL、去离子水90mL
显影液 混合试剂D:5mL、试剂E:5mL、去离子水90mL
显影停止液 直接使用试剂F

操作步骤

步骤使用试剂小时数
固定 固定液 20 min
敏化 敏化液 10 min
清洗 去离子水 10 min
染色 染色液 10 min
清洗 去离子水 1 min × 2 times
显影 显影液 5 - 10 min
停止 显影停止液 10 min

染色示例

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用凝胶摄影装置(黑白)摄影

 

银着色剂KANTO凝胶清洗液质谱用

是用于质谱分析用银stein KANTOⅢ染色了的蛋白质的清洗液。

套件配置

试剂名称容量
试剂A 100 mL × 1
试剂B 100 mL × 1

操作步骤

操作使用试剂步骤
凝胶切割 目的将含有蛋白质谱带的凝胶按照常规方法切出。
脱银 本产品混合液 将凝胶完全浸入试剂A和试剂B等量混合的清洗液中,静置15分钟。
清洗 去离子水 扔掉清洗液,代替等量的纯化水轻轻搅拌后扔掉。
重复该清洗操作直到凝胶变透明。
样品制备 按照常规方法制备质谱样品。

使用示例

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将洗涤后的凝胶进行还原烷基化、凝胶内胰蛋白酶消化、肽提取、脱盐处理,进行约250ng BSA的质谱分析。
矩阵:α-cyano-4-hydroxycinnamic acid
装置:MALDI micro MX(Waters)

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