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淘汰验证如何支持实验的再现性?
概述
Abcam新产品开发副总裁Alejandra Solache博士最近讨论了我们如何使用敲除(KO)技术验证抗体。通过观看下面的视频,了解基因敲除技术在大规模抗体筛查中的价值。
您可以看到Alejandra Solache博士在本次网络研讨会从21:03开始,这是由抗体学会。有关该领域专家关于抗体验证的更多网络研讨会,您也可以查看抗体学会的学习中心。
几项研究已经证明了生命科学试剂的不可再生性,对于抗体而言,这通常是由于对其感兴趣的目标缺乏特异性。这种缺乏特异性的现象,与交叉反应性和靶外蛋白结合等问题有关,导致了所谓的“再现性危机”1,2.
KO验证是抗体特异性最受认可和信任的验证过程之一三,4这种稳健的技术可以通过在KO细胞系、细胞裂解物或不表达目标蛋白的组织中测试抗体来确认抗体的特异性。因此,一种特异性抗体在KO细胞系中不会产生信号,但在野生型样本中会产生特定信号。这样,KO验证就成为了真正的阴性对照5.
了解有关淘汰赛验证的更多信息
为了确保我们的抗体具有特异性并提供可重复的结果,我们大规模应用KO验证。我们在多个应用中验证了我们的抗体,包括流式细胞术、western blot和免疫细胞化学,每个靶点使用多个抗体。显示特异性的抗体被赋予特殊的“KO验证”名称,而那些表现出非靶向结合的抗体则从我们的目录中删除。我们现在已经证实了超过4000个抗体经KO验证针对2000多个蛋白质目标。
Alejandra Solache博士于2013年12月加入Abcam,并管理Abcam在英国剑桥、中国杭州以及美国康涅狄格州尤金和布兰福德的全球新产品开发和验证团队。Alejandro还帮助开发了Abcam的创新战略和产品线。