简介

  • 产品名称

    抗波形蛋白抗体[RV202]
    见波形蛋白一级抗体
  • 描述

    Vimentin单克隆抗体[RV202]
  • 寄主种

    鼠标
  • 特异性

    这种抗体只与波形蛋白反应。
  • 测试应用

    适用于:流式细胞术国际商会免疫复合物受体世界银行冰冻切片知识产权IHC-PICC/IFIHC(PFA固定)更多细节
  • 物种反应性

    与之反应:老鼠,老鼠,山羊,鸡,仓鼠,牛,狗,人,Xenopus laevis,猴子,Zebrafish
  • 免疫原

    与牛波形蛋白相对应的融合蛋白。RV202是一种小鼠单克隆IgG1抗体,通过将SP2/0AG14小鼠骨髓瘤细胞与来自牛晶状体波形蛋白免疫的BALB/c小鼠的脾细胞融合而获得。

  • 阳性对照

性能

应用

我们的保证担保覆盖使用AB8978在以下测试应用中。

应用注意事项包括推荐的起始稀释液;最佳稀释/浓度应由最终用户确定。

应用 退让 笔记
流式细胞术 1/100—1/200。

AB170190-小鼠单克隆IgG1,适合用作该抗体的同种型对照。

国际商会 1/20。
免疫复合物受体 使用依赖于测定的浓度。免疫组织化学法检测生物素化辣根过氧化物酶复合物(ABC)的检测范围为1/100~1/200。PFA固定组织使用率为1/1000。
世界银行 1/100—1/1000。检测大约57 kDa的频带。
冰冻切片 1/500。
知识产权 使用依赖于测定的浓度。
IHC-P 使用依赖于测定的浓度。
ICC/IF 使用浓度为1μg/ml。
IHC(PFA固定) 1/1000。

目标

  • 功能

    波形蛋白是在各种非上皮细胞,特别是间充质细胞中发现的III类中间丝。Vimentin附着于细胞核、内质网和线粒体,横向或终端机。
    涉及LARP6在I型胶原mRNA的稳定CO1A1和CO1A2。
  • 组织特异性

    在Burkitt淋巴瘤细胞系中,在成纤维细胞中高表达,在T淋巴细胞和B淋巴细胞中有一些表达,很少或没有表达。在许多激素依赖性乳腺癌细胞系中表达。
  • 疾病参与

    白内障30
  • 序列相似性

    属于中间丝家族。
  • 中心α螺旋盘绕棒区介导了原均聚二聚反应。
    [IL] -X-C-X-X-DE基序是由IOS-S100A8/A9转亚硝基化酶复合物介导的半胱氨酸-S-亚硝基化的一个拟定的目标基序。
  • 翻译后的
    修改

    有丝分裂过程中的丝状体分解通过Ser-55和nestin(通过相似性)的磷酸化促进。在不同来源的间充质细胞中最突出的磷蛋白之一。磷酸化在细胞分裂过程中增强,此时波形蛋白丝被显著重组。pKN1的磷酸化抑制丝状体的形成。在细胞质中性粒细胞分泌过程中,CDK5在Ser-56处磷酸化。磷酸化STK33。
    在相同或接近磷酸化位点的细胞分裂过程中O-糖基化,这干扰磷酸化状态。
    S-亚硝基化是由干扰素γ和氧化修饰的低密度脂蛋白(LDL(Ox))诱导的,可能暗示了IOS-S100A8/9转亚硝基复合酶。
  • 细胞定位

    细胞质。
  • UniProt信息
  • 数据库链接

  • 形式

    波形蛋白存在于结缔组织和细胞骨架中。
  • 替代名称

    • CTRCT30抗体
    • 附睾腔蛋白113抗体
    • FLJ36605抗体
    • HEL113抗体
    • VIM抗体
    • Vime1人抗体
    • 波形蛋白抗体
    查看全部

图像

  • Lamin A/C在未甲基化神经母细胞瘤细胞中的沉默诱导不同细胞骨架成分的变化

    免疫荧光染色显示SK-N-SH-LAM-A/C-SRNA与(A)β-肌动蛋白丝、(B)F-肌动蛋白丝中的SK-N-SH-RAPH-SNRNA的变化相比较。(c)波形蛋白长丝和(D)α-微管蛋白。Lamin A/C呈绿色,β-肌动蛋白、F-肌动蛋白、波形蛋白和α-微管蛋白呈红色,DNA呈蓝色(DAPI)染色。刻度杆,10μm。

    在1/100稀释液中使用AB8978检测波形蛋白。用4%聚甲醛固定神经母细胞瘤细胞,0.5% Triton X-100透皮。

    (来自RaScCt等的图5C)

  • Ab8978在野生型HAP1细胞(顶板)和VIM敲除HAP1细胞(底面板)中染色波形蛋白。用100%甲醇(5min)固定细胞,用0.1%的Triton X-100渗透5分钟,然后用1% BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1% pB-TWEN中阻断1h,然后将细胞与AB8978一起孵育1μg/ml。AB202172(兔单克隆抗体[EP133Y]到Alpha Tubulin(Alexa Furor®594)),在1/250±4℃过夜稀释,然后在室温下进一步孵育1h。AB15117(山羊抗鼠IgG二级抗体(Alexa Furor®488))2μg/ml(绿色显示)。用DAPI标记蓝色核DNA。

    采用共焦显微镜(徕卡MyStices,TCS SP8)拍摄图像。

  • 石蜡包埋的人结肠组织在1/100稀释液中用AB8978免疫组化染色波形蛋白。

  • AB8978免疫组织化学染色法(IHC-P-多聚甲醛固定,石蜡包埋切片)对人胎肾组织切片波形蛋白染色。用甲醛固定组织,在25℃下用CAS块封闭1小时;用OmiNePip(pH 9)热调解抗原修复。样品与原抗体(1/500)在25°C孵育1小时,用Alexa Furor®555缀合驴多克隆(1/200)作为第二抗体。

    见复审

  • 重叠直方图显示HeLa细胞染色AB8978(红线)。用甲醇(5分钟)固定细胞,然后用0.1% PBS Triton通透20分钟,然后在1X PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育以阻断非特异性蛋白-蛋白相互作用,随后抗体(AB8978,1/100稀释)在22℃下30分钟。第二抗体使用DyLAME®488山羊抗小鼠IgG(H+L)。AB968 79在22℃下稀释1/500分钟,30分钟,同种型对照抗体(黑线)为小鼠IgG1[ICIgG1]。AB91353,2μg/1x10细胞)在相同条件下使用。术后随访5000例。这种抗波形蛋白抗体在4%个多聚甲醛(10分钟)固定的HeLa细胞中得到阳性信号,在相同条件下使用的0.1%个PBS Triton中进行了渗透。

  • 9日龄斑马鱼胚胎的免疫荧光染色
    AB8978与结缔组织细胞和血管反应。冷冻样品用丙酮处理:甲醇1:1,稀释1/100抗体,室温下孵育45分钟。

  • AB8978用多聚甲醛固定,经PBS和0.5% Triton×100渗透,用0.1%的BSA+10%山羊血清阻断25。C进行30分钟。样品与原代抗体(1/250∶PBS、0.1%牛血清白蛋白和10%山羊血清)在4℃下孵育12小时,Aexa For。®将594个与山羊IgG多克隆的山羊作为第二抗体。

    见复审

  •   AB8978用免疫细胞化学/免疫荧光法对人结肠成纤维细胞中波形蛋白-神经干细胞标记物进行染色。将细胞固定在甲醇中,在0.1% Triton中通透,在28°C下用0.25%的无血清蛋白阻断剂封闭20分钟。将样品与原抗体(1/100抗体稀释液)在28℃下2小时孵育。AB67 85山羊多克隆抗小鼠IgG -H和L(FITC)(1/800)作为第二抗体。用碘化丙啶对细胞核进行复染。

    见复审

  • Ab8978免疫组织化学染色法(IHC-P-多聚甲醛固定,石蜡切片)染色波形蛋白在犬软组织肉瘤组织切片中的表达用甲醛固定组织,在20℃下用15%的血清封闭1小时,在TrIS/EDTA pH9缓冲液中通过热中介进行抗原修复。样品与原抗体(TBS中的1/100)在20°C孵育18小时。用Alexa Furor®647结合山羊抗小鼠IgG多克隆(1/400)作为第二抗体。

    见复审

  • 用AB8978染色的ED18大鼠IH-FR图像。新鲜冰冻切片在10%只正常驴血清中用0.1%个PBS和0.3%个Triton X100孵育1h,使组织渗透,阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。然后用AB8978(1μg/ml)和铁蛋白在4±4℃孵育,第二抗体(绿色)为Alexa For or®488驴抗兔IgG(H+L),在1/1000稀释1h下使用。Alexa Flor®568(红色)驴抗小鼠在1/1000稀释1h。DAPI用于染色在肠肌中表达的1.43μl M. Vimentin浓度的细胞核(蓝色)。

    见复审

  • 用AB8978(1:500)对大鼠损伤皮质切片进行IVH-FFR图像的波形蛋白染色。脑灌注用4% PFA固定,切片用0.1% TrTUNX在0.1% PBS中通透。在24°C下,用10%头驴血清阻断1小时,将AB8978稀释至1:500,用4℃孵育24小时,第二抗体为兔IgG与Alexa Falor 488结合的多克隆抗体。

  • 扁桃体淋巴瘤的Ab8978波形蛋白染色请注意,上皮(左侧)是阴性的。

  •  AB8978用免疫细胞化学/免疫荧光法对牛色球中的波形蛋白进行染色。细胞在0.3% Triton X-100中固定并通透PFA。一次抗体(1/500)与样品在4°C孵育16小时,Aexa For。®568共轭山羊抗小鼠IgG多克隆(1/500)AB1754被用作次要的。

    见复审

  • 牛晶状体上皮细胞Ab8978波形蛋白免疫荧光染色

  • 免疫细胞化学/免疫荧光法检测人胰腺癌细胞中波形蛋白Ab8978的表达在24℃下,在3%的BSA中阻断细胞,在0.2% Triton X上进行PFA固定和通透,将一次抗体稀释1/200,并在21°C. Alexa For or®488小鼠与小鼠Ig多克隆的情况下与样品一起孵育16小时,稀释1/300作为第二抗体。

    见复审

  • AB8978免疫组化(冷冻切片)对人肺组织切片波形蛋白染色。用甲醛固定组织标本,在37处用5%的市售阻断剂封闭。C 15分钟。样品与37的一级抗体(1/250)一起孵育。C 1小时。在1/1000稀释液中,使用与小鼠IgG多克隆的HRP缀合山羊作为二级抗体。

    见复审

推荐信

该产品已被引用:

  • 王新红等。 FGF通过控制LIT-7的表达抑制MYCN和TGF-β1诱导的LMO1神经母细胞瘤的转移。 脑力 一千七百零四:219-228(2019)。阅读更多(PubMed:30321496)
  • 戴杰等。 基质刚度通过骨肉瘤细胞骨架重塑和MRTF-α易位调控上皮间充质转化。 J MeCH生物标记物 九十:226-23(2019)。阅读更多(PubMed:30384218)
参见本产品的所有232个出版物

客户评论与问答

-属于46评论或问答

问题
答案

然而,抗波形蛋白抗体(克隆RV202)识别的抗原表位的确切位置尚不确定,抗体必须识别进化高度保守的表位,因为它表现出广谱的物种交叉反应性(从人到斑马鱼)。
关于波形蛋白中进化保守区的更多信息,我想将Helman等人(1996)的《细胞科学杂志》109,569—57 8引用给您的读者。

此外,抗体似乎不能识别氨基(N-)或carboxy(C)末端,因为它与典型的波形蛋白分解产物反应,其具有比完整蛋白更酸性的PI,因此已知在其N-末端缺少约10 kDa。此外,缺乏其C-末端(氨基酸408~463)的波形蛋白构建体仍然被抗体识别。此信息可在Krimun堡等人(1988)EMBO期刊7,941-947中找到。

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答案

谢谢您联系我们。

事实上,小鼠对小鼠的染色可能相当棘手,然而,这不是不可能的。背景将取决于固定方法(灌注固定组织与正常固定组织),对组织本身(如肾脏与骨骼)和实验设置。


一种确保降低或完全消除背景的方法是在与目标抗体孵育之前用非结合的二级抗体阻断内源小鼠IgG。在这种情况下,我建议使用Fab或F(ab)2片段抗体,因为它们将结合比整个IgG抗体更高的密度。

你可以在这里找到上面提到的抗体:


HTTPS://www. abcAM.COM/NETX.HTML?数据表=98754(或使用以下内容:HTTPS://www. abcAM.COM/NETX.HTML)?数据表=98754)。

HTTPS://www. abcAM.COM/NETX.HTML?数据表=6668(或使用以下内容:HTTPS://www. abcAM.COM/NETX.HTML)?数据表=6668)。



另一种方法是使用我们的无扰鼠标在小鼠(M.O.M)聚合物IHC试剂盒,其中包含一种特殊的啮齿动物阻断溶液:

HTTPS://www. abcAM.COM/NETX.HTML?数据表=127055(或使用以下内容:HTTPS://www. abcAM.COM/NETX.HTML)?数据表=127055)。


此外,我们还收到了来自我们的客户谁在IHC中高度评价这种抗体的审查(2009年7月17日)。如果你愿意,你可以通过我们的网站联系作者。

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应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
猪组织切片(滑膜组织)
抗原检索步骤
酶缓冲液/酶:PBS/蛋白酶
透化作用
规格
滑膜组织
阻塞步骤
血清阻断剂为30分钟(S)·浓度:20%℃:20℃
固定剂
甲醛

用户社区

核实客户

提交09八月2018

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
猫组织切片(肾脏)
抗原检索步骤
热传导缓冲液/酶:TrIS/EDTA pH 9
透化作用
规格
阻塞步骤
血清阻断剂为1小时(s)和0分钟(s)·浓度:15%℃:RT°C
固定剂
10% NBF

用户社区

核实客户

2018 6月29日提交

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
大鼠组织切片(肝脏)
抗原检索步骤
热传导缓冲液/酶:TE PH9
透化作用
规格
肝脏
阻塞步骤
血清阻断剂为1小时(s)和0分钟(s)·浓度:5%℃:温度22℃
固定剂
10%正常缓冲福尔马林

用户社区

核实客户

2018 2月26日提交

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
猪组织切片(肺)
抗原检索步骤
热传导缓冲液/酶:TE PH9
透化作用
规格
阻塞步骤
血清阻断剂为1小时(s)和0分钟(s)·浓度:5%℃:温度22℃
固定剂
10%正常缓冲福尔马林

用户社区

核实客户

2018 2月19日提交

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
人体组织切片(胃肿瘤)
抗原检索步骤
热传导缓冲液/酶:TE PH9
透化作用
规格
胃肿瘤
阻塞步骤
血清阻断剂为1小时(s)和0分钟(s)·浓度:5%℃:温度22℃
固定剂
10%正常缓冲福尔马林

用户社区

核实客户

2018 2月19日提交

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
小鼠组织切片(异种移植瘤)
抗原检索步骤
热传导缓冲液/酶:TE PH9
透化作用
规格
异种移植瘤
阻塞步骤
血清阻断剂为1小时(s)和0分钟(s)·浓度:5%℃:温度22℃
固定剂
10%正常缓冲福尔马林

用户社区

核实客户

2018 2月19日提交

应用
免疫组化(PFA灌注固定冰冻切片)
样品
毛囊组织切片(脑)
抗原检索步骤
热传导缓冲液/酶:柠檬酸盐缓冲液
规格
阻塞步骤
血清阻断剂为1小时(s)和0分钟(s)·浓度:20℃:温度22℃
固定剂
甲醛

乔利恩范霍克

核实客户

2017 4月11日提交

应用
免疫细胞化学/免疫荧光
样品
人细胞(成纤维细胞)
透化作用
规格
成纤维细胞
阻塞步骤
血清阻断剂为2小时(s)和0分钟(s)·浓度:5%℃:温度25℃
固定剂
多聚甲醛

用户社区

核实客户

2016 8月19日提交

-属于46评论或问答

请注意:所有产品仅用于研究用途。不用于诊断程序
有关许可证查询,请联系PosisSts@ ABCAMC.

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