简介

  • 产品名称

    抗波形蛋白抗体[EPR3676] - Cytoskeleton Marker
    见波形蛋白一级抗体
  • 描述

    兔单克隆抗体[EPR37 76]波形蛋白-细胞骨架标记
  • 寄主种

    兔子
  • 测试应用

    适用于:ICC/IF世界银行流式细胞术IHC-P免疫复合物受体更多细节
  • 物种反应性

    与之反应:小鼠,大鼠,人,Rhesus monkey
  • 免疫原

    在人波形蛋白AA 400中合成肽到C-末端(C末端)(乙酰基)。确切的序列是专有的。
    数据库链接:P08670

  • 阳性对照

    • Jurkat、A549、NIH3T3、PC12、HUVEC、DAODI、Caco-2和COS-1细胞裂解物;小鼠和大鼠脑组织裂解物。②IHC-P:人肾、结肠、乳腺癌、宫颈癌和卵巢癌组织、小鼠脑和肾、E17大鼠颊和大鼠皮肤组织切片;Rhesus猴视网膜组织。WB: Hela,HEK293
  • 一般注释

    我们的拉伯®技术是一种专利的杂交瘤技术,用于制备兔单克隆抗体。有关我们专利的详情,请参阅拉巴卜®专利.

    我们一直在努力确保我们为客户提供一流的抗体。作为这项工作的结果,我们很高兴现在提供这种抗体的纯化格式。我们正在更新我们的数据表。提纯的格式在产品标签上标有“PUR”字样。如果您有任何关于这个更新的问题,请联系我们的科学支持小组。

    这个产品是重组兔单克隆抗体.

性能

应用

我们的保证担保覆盖使用AB92547在以下测试应用中。

应用注意事项包括推荐的起始稀释液;最佳稀释/浓度应由最终用户确定。

应用 退让 笔记
ICC/IF 1/250—1/1000。
世界银行 1/1000—1/5000。预测分子量:54 kDa。
流式细胞术 1/50—1/500。

AB17230-兔单克隆IgG,适合用作该抗体的同种型对照。

IHC-P 1/200—1/500。用柠檬酸盐缓冲液pH 6进行热介导的抗原检索,然后用IHC染色方案开始。
免疫复合物受体 1/100—1/500。

目标

  • 功能

    波形蛋白是在各种非上皮细胞,特别是间充质细胞中发现的III类中间丝。Vimentin附着于细胞核、内质网和线粒体,横向或终端机。
    涉及LARP6在I型胶原mRNA的稳定CO1A1和CO1A2。
  • 组织特异性

    在Burkitt淋巴瘤细胞系中,在成纤维细胞中高表达,在T淋巴细胞和B淋巴细胞中有一些表达,很少或没有表达。在许多激素依赖性乳腺癌细胞系中表达。
  • 疾病参与

    白内障30
  • 序列相似性

    属于中间丝家族。
  • 中心α螺旋盘绕棒区介导了原均聚二聚反应。
    [IL] -X-C-X-X-DE基序是由IOS-S100A8/A9转亚硝基化酶复合物介导的半胱氨酸-S-亚硝基化的一个拟定的目标基序。
  • 翻译后的
    修改

    有丝分裂过程中的丝状体分解通过Ser-55和nestin(通过相似性)的磷酸化促进。在不同来源的间充质细胞中最突出的磷蛋白之一。磷酸化在细胞分裂过程中增强,此时波形蛋白丝被显著重组。pKN1的磷酸化抑制丝状体的形成。在细胞质中性粒细胞分泌过程中,CDK5在Ser-56处磷酸化。磷酸化STK33。
    在相同或接近磷酸化位点的细胞分裂过程中O-糖基化,这干扰磷酸化状态。
    S-亚硝基化是由干扰素γ和氧化修饰的低密度脂蛋白(LDL(Ox))诱导的,可能暗示了IOS-S100A8/9转亚硝基复合酶。
  • 细胞定位

    细胞质。
  • UniProt信息
  • 数据库链接

  • 形式

    波形蛋白存在于结缔组织和细胞骨架中。
  • 替代名称

    • CTRCT30抗体
    • 附睾腔蛋白113抗体
    • FLJ36605抗体
    • HEL113抗体
    • VIM抗体
    • Vime1人抗体
    • 波形蛋白抗体
    查看全部

图像

  • 用纯化的AB92547对石蜡包埋小鼠肾脏进行免疫组化染色,工作稀释度为1/250。所用的二次抗体是山羊抗兔IgG H& L(HRP)(AB97051)二级抗体1/500点。样品用苏木精反染。用TIS EDTA缓冲液,pH 9进行抗原回收。用PBS代替第一抗体作为阴性对照,并在插图中显示。

  • 所有车道:抗波形蛋白抗体[EPR376] - Cytoskeleton Marker(AB92547)1/1000稀释(未纯化)

    第1巷:人宫颈上皮癌细胞系Hela全细胞裂解液
    第2巷:HEK293(人胚肾上皮细胞系)全细胞裂解物
    第3巷:Jurkat(人T细胞淋巴母细胞样细胞)全细胞裂解物
    第4巷:A549(人肺癌细胞)全细胞裂解物
    第5巷:NIH 3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)全细胞裂解物
    第6巷:PC12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系)全细胞裂解液
    第7巷:人脐静脉内皮细胞全细胞裂解液
    第8巷:A431(人表皮样癌细胞系)全细胞裂解物
    第9巷:Daudi(人Burkitt淋巴瘤细胞系)全细胞裂解物
    第10巷:CACO 2(人结肠腺癌细胞系)全细胞裂解物

    裂解物/蛋白质,每车道20盎司。

    次要的
    所有车道:Ird®800 CW山羊抗兔1/10000稀释液

    在还原条件下进行。

    预测波段大小:54 kDa
    观察波段大小:53 kDa
    为什么实际频带大小与预测不同?



    使用4-12%双TIS凝胶在MOPS缓冲系统下产生该印迹。凝胶在200 V下运行50分钟,然后在30V转移到硝酸纤维素膜上70分钟。然后用Li-Cor®阻断缓冲液隔膜一小时,然后在4°C与AB92547一起孵育。使用Ir染料®800 CW山羊抗兔次级抗体在室温下1:1稀释1h检测抗体结合,然后使用OdysSe®CX成像系统成像。

  • 人主动脉瓣:免疫荧光标记显示终末期细胞。

    将冰冻切片切成6μm的厚度,然后用4%的多聚甲醛溶解在0.1 M磷酸盐缓冲液(pH=7.4)中至少15分钟后,用磷酸盐缓冲液洗涤三次后,将切片浸泡在10%山羊血清中1小时。然后,在4℃下用大鼠单克隆抗-CD34孵育切片。AB8158ABCAM,剑桥,英国)和兔Vimentin单克隆抗体(AB92547;ABCAM),兔单克隆抗PDGF受体β(AB325701:100;ABCAM或兔多克隆抗-C试剂盒AB55061:100,在磷酸盐缓冲液中稀释1∶100,同时用0.25% Triton X 100进行渗透。在第二天,将切片用罗丹明二级抗体标记的山羊抗兔和在磷酸缓冲液中以1:200稀释的FITC标记的山羊抗大鼠孵育1小时。切片用4’,6二脒基2苯基吲哚(DAPI)染色。

  • 杰伊LACZ/lacZ小鼠表现出放射状胶质细胞向室管膜细胞分化的延迟。

    P10侧脑室冠状位的免疫组化分析杰伊+/+(a,e)和杰伊LACZ/lacZ(I,M)小鼠表达波形蛋白(粉红色,AB92547),Glast(Green)和ACα-浴盆(橙色)在背侧(A- D,i-L)和腹侧(E-H,M- P)脑区。右下面板(D,L,H,P)表示合并图像的较高放大倍数视图。进入杰伊+/+内壁背侧和腹侧细胞表达分化室管膜标记Vimentin(A,B,E,F)和ACα-TUB(A,D,E,H),但对放射状胶质细胞标记Glast(A,C,E,G)是阴性的。进入杰伊LACZ/lacZ大脑中,一些背侧细胞对未分化标记物Glast(I,K)保持阳性,同时也表达分化标记物波形蛋白和ACα-TUB(I,J,L)。杰伊LACZ/lacZ腹侧细胞仅表达波形蛋白和ACα-TUB(M P)。虚线表示室壁室管膜细胞(C,G,K,O)。(Q-R)图示GLAST(-)波形蛋白(+)ACα-TUB(+)(黑条)和Glast(+)Vimentin(+)ACα-Tub(+)(灰棒)细胞在背侧(Q)和腹侧(R)室管膜细胞中的百分比。MW,内侧壁;LW,侧壁;LV,侧脑室;*表示P=0.05。刻度杆:50μm(A P)。

  • 纯化的AB92547石蜡包埋人宫颈癌的免疫组化染色:工作稀释度为1/250。所用的第二种抗体是HRP山羊抗兔IgG H&L(AB97051单片机)1/500点。样品用苏木精反染。用TIS EDTA缓冲液,pH 9进行抗原回收。用PBS代替第一抗体作为阴性对照,并在插图中显示。
  •  

    用AB92547(绿色)石蜡包埋的多聚甲醛固定恒河猴视网膜组织的免疫组化染色,工作稀释度为1/200。样品在2.5%小时血清中以20小时孵育,在4°C孵育。所用的第二抗体是山羊抗兔AlxAlFuor 488在1/400。使用柠檬酸盐pH 6对热介导的抗原检索进行了验证。在25°C,用5%的血清封闭组织1小时30分钟。

  • 未纯化的AB92547在人乳腺癌福尔马林固定石蜡包埋组织切片中VimTin染色的IHC图像,在徕卡键上进行。使用热介导的抗原检索,用柠檬酸钠缓冲液(PH6,表位检索溶液1)对该切片进行20分钟的预处理。然后将切片与AB92547,1/200稀释液孵育,室温下15分钟,并用HRP偶联的紧凑聚合物体系检测。使用DAB作为显色剂。然后切片用苏木精复染,并安装DPX。阴性对照中没有使用第一抗体(在插图上显示)。

    对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原检索条件,一级抗体浓度和抗体孵育时间。

    *由人类研究组织库获得的组织,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持

  • AB92547在野生型HAP1细胞(顶板)和VIM敲除HAP1细胞(底面板)中染色波形蛋白。用100%甲醇(5min)固定细胞,用0.1%的Triton X-100渗透5分钟,然后用1% BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1% pB-TWEN中阻断1h,然后将细胞与AB92547孵育在0.5μg/ml。AB19589在1/250稀释液(以假彩色红色显示)在4℃下过夜,然后在室温下进一步孵育1h。山羊抗兔IgG H&L(Alexa Furor®488)预吸附(AB1500)第二抗体在2μg/ml(绿色显示)。用DAPI标记蓝色核DNA。

    采用共焦显微镜(徕卡MyStices,TCS SP8)拍摄图像。

  • 福尔马林固定石蜡包埋的人微组织经MTX、TAA和TGF-β1的免疫染色

    用MTX、TAA和TGF-β1治疗14天后,用苏木精-伊红(H&E)和波形蛋白对肝素/THP-1巨噬细胞/hTERT HSC微组织福尔马林固定石蜡包埋切片进行染色。将微组织固定在4% PFA中,并在石蜡切片前植入2%琼脂糖中。MTX、TAA和TGF-β1暴露后,Vimein阳性细胞的微组织增加。波形蛋白染色显示星形细胞和THP-1巨噬细胞在微组织中的增殖,提示炎症过程的开始。

    完整图像见PMED 28665955。

  • 叠加直方图显示HAP1野生型(绿线)和HAP1-VIM敲除细胞(红线)用AB92547染色。用80%甲醇(5分钟)固定细胞,然后用0.1% PBS Triton X-100渗透15分钟,然后在1X PBS/10%正常山羊血清中孵育,以阻断非特异性蛋白-蛋白相互作用,随后抗体(AB92547,0.5μg/ml)在22℃下30分钟。山羊抗兔IgG H&L(Alexa Furor®488)预吸附(AB1500)第二抗体在1/2000℃稀释22 min,稀释30 min。
    兔IgG同种型对照抗体AB17230在与原抗体相同的浓度和条件下使用(HAP1野生型黑线,HAP1-VIM敲除灰线)。未标记的样品也被用作对照(这条线没有为了简化的目的而显示)。
    用50 MW蓝光激光器(48 8nm)和530/30带通滤波器采集5000个事件。
  • 所有车道:抗波形蛋白抗体[EPR376] - Cytoskeleton Marker(AB92547)在1/5000稀释(纯化)

    第1巷:人宫颈上皮癌细胞系Hela细胞裂解物
    第2巷:HEK293(人胚肾上皮细胞系)细胞裂解物

    裂解物/蛋白质,每车道20盎司。

    次要的
    所有车道:1/1000稀释度HRP山羊抗兔IgG(H+L)

    预测波段大小:54 kDa
    观察波段大小:54 kDa



    阻塞缓冲器:5% nFDM/TBST
    稀释缓冲液:5% NFDM/TBST

  • 所有车道:抗波形蛋白抗体[EPR376] - Cytoskeleton Marker(AB92547)在1/5000稀释(纯化)

    第1巷:小鼠脑裂解液
    第2巷:大鼠脑裂解液

    次要的
    所有车道:1/1000稀释度HRP山羊抗兔IgG(H+L)

    预测波段大小:54 kDa
    观察波段大小:54 kDa



    阻塞缓冲器:5% nFDM/TBST
    稀释缓冲液:5% NFDM/TBST

  • 抗波形蛋白抗体[EPR376] - Cytoskeleton Marker(AB92547)在1/20000稀释(纯化)+COS-1(非洲绿猴肾成纤维细胞样细胞系)细胞裂解物,在20μg

    次要的
    1/1000稀释度HRP山羊抗兔IgG(H+L)

    预测波段大小:54 kDa
    观察波段大小:54 kDa



    阻塞缓冲器:5% nFDM/TBST
    稀释缓冲液:5% NFDM/TBST

  • 用纯化的AB92547对HeLa(人宫颈上皮腺癌细胞)细胞进行免疫荧光染色,在工作稀释度为1/250的情况下,用DAPI反染。第二抗体是山羊抗兔IgG H&L(Alexa Furor®488)(AB1500 77)二级抗体在稀释1/1000的情况下使用。AB791用小鼠抗微管蛋白抗体(1/1000)染色微管蛋白。山羊抗小鼠IgG H&L(Alexa Furor®594)预吸附(AB150 120)1/1000,显示在右上面板。将细胞固定在4% PFA中,并用0.1%个Triton X 100进行渗透。阴性对照显示在底部中间和右侧面板-阴性对照1,纯化后的AB92547稀释1/500以下。山羊抗小鼠IgG H&L(Alexa Furor®594)预吸附(AB150 120)稀释1/500。对于阴性对照2,AB791(小鼠抗微管蛋白)稀释1/500后使用。山羊抗兔IgG H&L(Alexa Furor®488)(AB1500 77)二级抗体稀释1/400。

  • Ab92547在HeLa(宫颈腺癌上皮细胞系)细胞中染色波形蛋白。用100%甲醇(5min)固定细胞,然后在1% BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中,在0.1% pB-TWEN中阻断1h,然后将细胞与AB92547孵育5μg/ml。AB791在1μg/ml过夜+4°C,然后在室温下进一步孵育1h。山羊抗兔IgG H&L(Alexa Furor®488)预吸附(AB1500)第二抗体在2μg/ml(绿色显示)和山羊抗小鼠IgG H&L(Alexa Furor®594)预吸附(AB150 120)在2μg/ml(以伪彩色红色表示)。用DAPI标记蓝色核DNA。

    阴性对照:1 -兔原代抗体和抗鼠二级抗体;2 -小鼠原代抗体和抗兔二级抗体。对照1和2表明在使用的原发抗体和二次抗体之间没有非特异性反应。

  • 未纯化的Ab92547染色波形蛋白在HeLa细胞中染色。将细胞用100%甲醇(5分钟)固定,在0.1% Triton X-100中通透5分钟,然后将其在1% BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中在0.1% pBS吐温中阻断1h,然后将细胞与AB92547在5μg/ml的工作浓度下孵育。AB19589小鼠单克隆抗体[D1A]到Alpha Tubulin(Alexa Furor®594,用红色显示),在1/250×4°C过夜,然后在室温下进一步孵育1h。山羊抗兔IgG H&L(Alexa Furor®488)预吸附(AB1500)第二抗体在2μg/ml(绿色显示)。用DAPI标记蓝色核DNA。

    采用共焦显微镜(徕卡MyStices,TCS SP8)拍摄图像。

  • 覆盖直方图显示HeLa细胞固定在2% PFA中,并在50(红线)稀释1的情况下用纯化的AB92547染色。第二抗体为FITC山羊抗兔,稀释率为1,为500。使用兔单克隆IgG作为同种型对照(黑线),并在没有初级和次级抗体的情况下孵育的细胞用作阴性对照(蓝线)。
  • 用免疫组织化学法(甲醛固定,石蜡包埋切片)对E17大鼠颊部进行抗波形蛋白(AB92547)染色。使用柠檬酸进行热介导的抗原检索。样品在室温下用一次抗体(1/2000)孵育两小时。生物素结合山羊抗兔IgG多克隆作为第二抗体。

    图片由伦敦国王学院Carl Hobbs先生提供。

  • 用免疫组织化学法(甲醛固定,石蜡切片)对成年小鼠脑(海马齿状回区)进行抗波形蛋白(AB92547)染色。使用柠檬酸进行热介导的抗原检索。样品在室温下用一次抗体(1/2000)孵育两小时。生物素结合山羊抗兔IgG多克隆作为第二抗体。

    图片由伦敦国王学院Carl Hobbs先生提供。

  • 应用免疫组织化学法(甲醛固定、石蜡包埋切片)对人卵巢癌组织中的抗波形蛋白(AB92547)进行染色。使用柠檬酸进行热介导的抗原检索。样品在室温下用一次抗体(1/2000)孵育两小时。生物素结合山羊抗兔IgG多克隆作为第二抗体。

    图片由伦敦国王学院Carl Hobbs先生提供。

  • 福尔马林/PFA固定石蜡包埋人宫颈癌组织切片用波形蛋白标记AB92547的免疫组化分析

  • 福尔马林/PFA固定石蜡包埋人肾组织切片用AB92547标记波形蛋白的免疫组化分析

  • 冻存小鼠睾丸组织切片,用稀释度为1/500的AB92547标记波形蛋白。切片用多聚甲醛固定,用0.1% Triton X-100在PBS中渗透。以1/500的AB1500 62作为第二抗体。用DAPI对组织进行染色。

    见复审

  • 未经纯化的AB92547在人施莱姆斯管内皮细胞中通过Ic/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)染色波形蛋白。用甲醛固定细胞,用Triton X-100 0.2%渗透,在20°C下用10%的血清封闭30分钟。样品在20℃下与原代抗体(1/200在DPBS中)孵育3小时,未稀释的Alexa For。®488羊抗兔IgG多克隆作为第二抗体。

  • 未纯化的AB92547石蜡包埋人正常肾组织的荧光免疫组化分析绿色-波形蛋白红PI。

  • 未纯化的AB92547石蜡包埋人正常结肠组织的荧光免疫组化分析绿色波形蛋白

  • AB92547免疫组织化学染色法(IHC-P -多聚甲醛固定,石蜡包埋切片)染色大鼠皮肤组织切片。用10%缓冲的正常福尔马林固定组织,在21°C用5%的血清封闭60分钟,通过热处理在10mM柠檬酸钠缓冲液中进行抗原修复。样品在4°C下用一级抗体(1/200在阻断缓冲液中)孵育12小时。®以驴抗兔IgG多克隆(1/200)作为第二抗体。

    见复审

  • 在1/500稀释液中用AB92547对多聚甲醛固定的小鼠脑(Dentate Gyrus)进行免疫组织化学染色。

    见复审

  • 平衡歧化常数(K)D
    了解更多关于KD

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推荐信

该产品已被引用:

  • 江西等。 糖尿病小鼠视网膜光凝后视网膜色素上皮的反应 激光医学 三十四:179—190(2019)。阅读更多(PubMed:30499004)
  • 金毅等。 Trim21介导了SnAIL的泛素化,并调节了乳腺癌细胞的上皮间质转化。 苯基大分子醇 一百二十四:846-853(2019)。阅读更多(PubMed:30502437)
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客户评论与问答

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应用
流式细胞术
样品
人细胞(MDA-MB-231)
规格
MDA-MB-231
准备
细胞收获/组织制备方法:细胞解离缓冲液
样品缓冲液:无酶
注视
多聚甲醛
透化作用
是- 70%甲醇
门控策略
直播

用户社区

核实客户

2013 2月18日提交

应用
免疫细胞化学/免疫荧光
阻塞步骤
BSA作为30分钟(S)·浓度的阻断剂:3%℃:RT°C
样品
小鼠细胞(NIH/3T3)
规格
NIH/3T3
透化作用
是- 0.2% TrITON-X-100
固定剂
甲醛

用户社区

核实客户

2013 8月12日提交

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
恒河猴组织切片(脑)
规格
固定剂
甲醛
抗原检索步骤
热传导缓冲液/酶:柠檬酸缓冲液PH6.0
透化作用
阻塞步骤
血清阻断剂为1小时(s)和0分钟(s)·浓度:20%℃:温度37℃

Peter Sullivan先生

核实客户

2012 11月16日提交

应用
免疫细胞化学/免疫荧光
样品
人细胞(施莱姆斯管内皮)
规格
施莱姆斯管内皮
固定剂
甲醛
透化作用
是- 0.2% Triton X-100
阻塞步骤
血清阻断剂为30分钟(S)·浓度:10%℃:20℃

托马斯博士阅读

核实客户

2011 10月31日提交

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
大鼠组织切片(皮肤)
规格
护肤
固定剂
甲醛
抗原检索步骤
热传导缓冲液/酶:柠檬酸缓冲液,pH6.0
透化作用
阻塞步骤
BSA作为25分钟(s)·浓度的阻断剂:1%℃:25℃

用户社区

核实客户

2011 7月22日提交

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
小鼠组织切片(肝-胆管结扎术后)
规格
肝(胆管结扎术后)
固定剂
多聚甲醛
抗原检索步骤
热传导缓冲液/酶:柠檬酸缓冲液PH6.0
透化作用
阻塞步骤
血清阻断剂为20分钟(S)·浓度:20%℃:21℃

用户社区

核实客户

2011 6月20日提交

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
大鼠组织切片(肝组织)
规格
肝组织
固定剂
多聚甲醛
抗原检索步骤
热传导缓冲液/酶:柠檬酸缓冲液PH6.0
透化作用
阻塞步骤
血清阻断剂为20分钟(S)·浓度:20%℃:21℃

Philip Probert博士

核实客户

2011 6月20日提交

应用
蛋白质印迹法
样品
人细胞裂解液-全细胞(HCT116)
凝胶运行条件
变性变性
装载量
30μg
规格
HCT116
阻塞步骤
牛奶为1小时(S)和0分钟(S)·浓度的封闭剂:5%℃:温度23℃

用户社区

核实客户

2019 8月31日提交

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
狗组织切片(胸腺)
抗原检索步骤
热传导-缓冲/酶:TrIS/EDTA
透化作用
是- H2O2
规格
胸腺
固定剂
甲醛

用户社区

核实客户

2019 8月14日提交

应用
免疫组化(冰冻切片)
样品
人体组织切片(舌)
规格
舌头
阻塞步骤
DAKO封闭溶液为1小时(S)和0分钟(S)·浓度的封闭剂:0.25%℃:温度24℃
固定剂
丙酮

韩宝玉

核实客户

2019 5月30日提交

-属于47评论或问答

请注意:所有产品仅用于研究用途。不用于诊断程序
有关许可证查询,请联系PosisSts@ ABCAMC.

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