主要功能和细节
分析类型:定量 检测方法:荧光 平台:流式细胞仪、荧光显微镜 分析时间:3小时 样品类型:粘附细胞、悬浮细胞、组织
概述
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产品名称 -
检测方法 荧光 -
样品类型 组织,粘附细胞,悬浮细胞 -
分析类型 定量 -
检测时间 3小时 00米 -
物种反应性 与以下物质反应: 哺乳动物,其他物种 -
产品概述 TUNEL分析试剂盒-BrdU-Red ab66110使用一种方便且敏感的方法,通过流式细胞术和荧光显微镜检测活细胞中的DNA片段。
TUNEL分析用于检测DNA片段,如凋亡。 它使用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)来催化脱氧核苷酸在片段DNA的自由3'-羟基端的结合。 然后用多种方法标记脱氧核苷酸,以检测DNA断裂的程度。
该TUNEL分析方案基于Br-dUTP(溴化脱氧尿苷三磷酸核苷酸),与其他dUTP标签(如FITC、生物素或二氧杂蛋白)相比,TdT酶更容易将其并入DNA链断裂。 当用直接标记红色荧光色素的抗BrdU单克隆抗体检测到Br-dUTP位点时,更大的掺入率产生更亮的信号。
BrdU-Red信号可以在Ex/Em 488/576 nm处进行分析,在Ex/Em488/655nm处使用可选的7-AAD复染。
该TUNEL分析试剂盒包括阴性和阳性对照细胞。 它被设计用于研究GFP转染细胞中的DNA片段。
Tunel分析方案总结: -用甲醛固定细胞/组织,如果是石蜡切片,则脱蜡并重新水化,然后清洗 -在4ºC的70%乙醇中培养细胞30分钟,或者如果组织在室温下用蛋白酶K溶液培养5分钟并用甲醛重新固定 -清洗 -在37ºC的DNA标记溶液中培养60分钟 -冲洗 -室温下在抗体溶液中孵育30分钟 -添加7-AAD/RNase A溶液并在室温下培养30分钟 -流式细胞术或荧光显微镜分析 -
笔记 该产品由Abcam公司BioVision制造,之前称为K404 ApoBrdU红色DNA片段试剂盒。 K404-60与ab66110的60测试尺寸相同。 该试剂盒标有BrdU-Red(Ex/Em=488/576 nm)。 它以前被称为TUNEL分析试剂盒-原位BrdU-Red DNA片段。 要使用FITC(Ex/Em=495/519 nm)作为标签,我们建议 TUNEL分析试剂盒-FITC(ab66108) . 对于发色TUNEL染色,我们建议 TUNEL分析试剂盒-HRP-DAB ab206386 . 有关TUNEL方法的更多信息,请参阅 TUNEL染色/TUNEL分析指南 . Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 -
站台 流式细胞仪、荧光显微镜
属性
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储存说明 请参阅协议。 -
组件 60次测试 60次测试 7-AAD/RNase染色缓冲液 1 x 30毫升 1 x 30毫升 抗-BrdU-红抗体 1 x 300微升 1 x 300微升 脱氧尿苷三磷酸 1 x 480微升 1 x 480微升 阴性对照细胞 1 x 5毫升 1 x 5毫升 阳性对照细胞 1 x 5毫升 1 x 5毫升 反应缓冲液 1 x 600微升 1 x 600微升 冲洗缓冲液 1 x 120毫升 1 x 120毫升 TdT酶 1 x 45微升 1 x 45微升 清洗缓冲液 1 x 120毫升 1 x 120毫升 -
研究领域 -
关联 核小体间DNA片段化是哺乳动物细胞凋亡的标志。
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检测试剂盒 -
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图像
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使用阴性和阳性对照细胞(未经处理和喜树碱处理的HL-60)检测DNA片段(TUNEL染色)。 按照分析方案对细胞进行染色。 使用BD-FACScan系统(Becton Dickinson)检测并分析荧光信号。 -
使用原位BrdU-Red DNA片段(TUNEL)分析试剂盒(ab66110)对整个山棘球水螅进行TUNEL染色。 将动物固定在PBS中的4%PFA中1小时,并按方案处理,不进行蛋白酶K处理。 用3%Triton在PBS中渗透15分钟来代替蛋白酶K。 用DAPI对动物进行反训练。 -
8周龄5微米厚睾丸石蜡包埋组织的免疫组织化学分析 第3阶段 +/− 和 第3阶段 −/− (基质抗原) 老鼠。 使用原位BrdU-Red DNA片段(TUNEL)检测试剂盒(ab66110)检测凋亡细胞。 DAPI用作副染色。
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (123)
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