主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR18351]至SQSTM1/p62 适用于:Flow Cyt(Intra)、IHC-P、WB、ICC/IF、IP 敲除已验证 反应对象:人类
相关偶联物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆[EPR18351]至SQSTM1/p62 -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 人类 -
免疫原 重组全长蛋白。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:人肝和肾裂解物; U-2 OS、HCT116、HepG2和HeLa全细胞裂解物。 IHC-P:人肝癌和肺癌组织。 ICC/IF:HeLa细胞(未经处理和用氯喹处理)、HAP1细胞(不经处理和使用氯喹治疗)、U-2 OS细胞。 流式细胞仪(内部):PC-3细胞。 IP:HeLa和HepG2全细胞裂解物。
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一般注意事项
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%牛血清白蛋白 -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 EPR18351(电子顺磁共振18351) -
同位素 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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目标
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功能 结合泛素并可能通过TNF-α、神经生长因子(NGF)和白细胞介素-1调节NFKB1活化的适配器蛋白。 可能在肌肉细胞的TIN/TTN下游信号传导中发挥作用。 可能通过泛素化调节信号级联。 调节TRAF6和CYLD之间相互作用的适配器(通过相似性)。 可能参与细胞分化、凋亡、免疫反应和K(+)通道的调节。 -
组织特异性 普遍表达。 -
参与疾病 SQSTM1的缺陷是骨Paget病(PDB)的原因[MIM:602080]。 PDB是一种影响轴向骨骼的代谢性骨病,其特征是由于破骨细胞激活而导致局部骨转换增加和紊乱。 该疾病的表现包括骨痛、畸形、病理性骨折、耳聋、神经系统并发症和骨肉瘤风险增加。 PDB是一种慢性病,影响2-3%的40岁以上人口。 -
序列相似性 包含1个OPR域。 包含1个UBA域。 包含1个ZZ型锌指。 -
域 UBA结构域特异性结合多泛素化底物的“Lys-63”连接的多泛素链。 调解与TRIM55的互动。 OPR结构域介导同齐聚反应以及与PRKCZ、PRKCI、MAP2K5和NBR1的相互作用。 ZZ型锌指介导与RIPK1的相互作用。 -
翻译后 修改 磷酸化。 可能被PRKCZ磷酸化(根据相似性)。 通过TTN体外磷酸化。 -
手机定位 细胞质。 晚期内体。 核心。 沙科姆(根据相似性)。 在心肌中,位于肌节带(根据相似性)。 定位于晚期内体。 也可能局限于细胞核。 分别在阿尔茨海默病和帕金森病患者的神经纤维缠结和神经元路易体中积聚。 富含毛细胞星形细胞瘤的罗森塔尔纤维。 在肝细胞中,积聚在与酒精性肝炎、威尔逊病、印度儿童肝硬化相关的马洛里体和与肝细胞癌相关的透明体中。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 A170抗体 DMRV抗体 60kDa抗体EBI 3相关蛋白
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图像
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车道1 :野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 2号车道 :SQSTM1/p62敲除HAP1细胞裂解液(20µg) 3号车道 :HeLa细胞裂解物(20µg) 4号车道 :HepG2细胞裂解物(20µg) 1-4车道 :合并信号(红色和绿色)。 绿色-在55 kDa时观察到的目标。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 这张western blot图像是ab207305和竞争对手停用的山羊多克隆抗体之间的比较。 -
免疫细胞化学显示ab207305与野生型U-2 OS细胞中的SQSTM1反应,在SQSTM2敲除细胞系中观察到信号丢失。 将野生型细胞和敲除细胞混合,并以1:1的比例在盖玻片上造粒。 细胞用4%多聚甲醛固定(15分钟),然后用0.1%Triton X-100透化(10分钟),然后用1/5000封闭。 然后用ab207305以1/200的稀释度在4°C下孵育细胞过夜,然后在室温下用山羊抗兔二级抗体(Alexa Fluor)进一步孵育1小时 ® 555),0.5μg/ml。采集绿色(野生型)、红色(抗体染色)和远红外(敲除)通道。 显示了红色通道的典型灰度图像。 野生型和敲除型细胞分别用黄色和洋红色虚线勾勒。 所使用的马赛克策略的示意图如右下角面板所示。 图像是用蔡司(LSM-880)拍摄的。 这些数据由YCharOS Inc.提供,该公司是一家开放科学公司,其任务是对所有人类蛋白质的商用抗体试剂进行表征。 Abcam和YCharOS正在合作,通过使生命科学界能够更好地评估商用抗体,帮助解决再现性危机。 -
所有车道: 抗-SQSTM1/p62抗体[EPR18351](ab207305) 车道1: 野生型HCT116细胞裂解物 车道2: SQSTM1 CRISPR/Cas9编辑的HCT116细胞裂解物 3号车道: HepG2细胞裂解物 车道4: HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附( ab216773号 )稀释度为1/10000 预测的带宽大小: 47千Da 观察到的频带大小: 55千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在55 kDa下观察到ab207305。 红色-加载控制 约8245 在36 kDa时观察到。 ab207305抗SQSTM1/p62抗体[EPR18351]在野生型HCT116细胞中与SQSTM1/p62特异性反应。 CRISPR/Cas9编辑细胞系中观察到的条带 约266871 (CRISPR/Cas9编辑的细胞裂解物 ab257052号 )低于55kDa的车道可能代表截断形式和劈开碎片。 尚未对此进行进一步调查。 对野生型和SQSTM1/p62 CRISPR/Cas9编辑过的样品进行SDS-PAGE分析。 ab207305和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
ab207305染色野生型HAP1细胞和敲除细胞、未经处理和氯喹处理的SQSTM1( 约142116 ,50μM,24小时)。 细胞用4%甲醛固定(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab207305以1μg/ml和 约195889年 以1/250稀释度(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-SQSTM1/p62抗体[EPR18351](ab207305) 车道1: 野生型U-2 OS细胞裂解物 车道2: SQSTM1敲除U-2 OS细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 47千Da Western blot显示ab207305与野生型U-2 OS细胞中的SQSTM1反应,在SQSTM2敲除细胞系中观察到信号丢失。 对野生型U-2OS和SQSTM1敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 将膜在TBST中的5%牛奶中封闭1小时,然后与ab207305在4°C下以1/1000的稀释度孵育过夜。 在成像前,将斑点与山羊抗兔HRP二级抗体以0.2 ug/mL孵育。 这些数据由YCharOS Inc.提供,该公司是一家开放科学公司,其任务是对所有人类蛋白质的商用抗体试剂进行表征。 Abcam和YCharOS正在合作,通过使生命科学界能够更好地评估商用抗体,帮助解决再现性危机。 -
车道1 :野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 2号车道 :SQSTM1/p62敲除HAP1细胞裂解液(20µg) 3号车道 :HeLa细胞裂解物(20µg) 4号车道 :HepG2细胞裂解物(20µg) 车道1-4 :合并信号(红色和绿色)。 绿色-在55 kDa下观察到ab207305。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 ab207305在野生型HAP1细胞中与SQSTM1/p62特异性反应。 使用SQSTM1/p62敲除样品时未观察到条带。 野生型和SQSTM1/p62敲除样品接受SDS-PAGE,ab207305和 约8245 (GAPDH的负荷控制)分别稀释1/1000和1/10000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
ab207305染色HeLa细胞中的SQSTM1/p62+/-氯喹(50μM,24小时)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后在+4°C下用1μg/ml的ab207305和 约195889年 ,小鼠抗α-管蛋白单克隆抗体(Alexa Fluor®594),1/250稀释(以伪红色显示),然后在室温下与山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluoro®488)进一步孵育1小时( 约150081 )浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-SQSTM1/p62抗体[EPR18351](ab207305) 车道1: 人肝裂解物 车道2: 人肾裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG过氧化物酶结合物,在1/10000稀释度下特异于非还原型IgG 预测的带宽大小: 47千Da 观察到的频带大小: 62千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 30秒 封闭/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 观察到的MW与文献中描述的一致(PMID:PMC4344198)。 -
所有车道: 1/5000稀释的抗-SQSTM1/p62抗体[EPR18351](ab207305) 车道1: HepG2(人肝癌)全细胞裂解物 车道2: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 47千Da 观察到的频带大小: 62千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 30秒 封闭/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 观察到的MW与文献中描述的一致(PMID:PMC4344198)。 -
用ab207305在1/100稀释度(红色)下标记SQSTM1/p62的4%副甲醛固定PC-3(人前列腺癌细胞系)细胞与兔单克隆IgG同型对照的细胞内流式细胞术分析( 约172730 ; 黑色)和未标记的对照(未与第一抗体和第二抗体孵育的细胞;蓝色)。 用1/500稀释度的山羊抗狂犬病IgG(FITC)作为二级抗体。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
合格证书
工具书类 (39)
高田T 等。 1.4E7细胞系中的细胞内毒性晚期糖基化终产物通过减少微管相关蛋白1轻链3和p62诱导死亡。 营养素 14:不适用(2022年)。 公共医学:35057513 太阳Z 等。 Sec23a通过抑制ER吞噬抑制黑色素瘤干细胞的自我更新。 小区通信信号 20:22(2022)。 公共医学:35236368 朱M 等。 AMPK激活剂O304通过促进能量代谢和自噬来防止肾脏衰老。 前沿药理学 13:836496 (2022). 公共医学:35308246 甘Y 等。 雌二醇抑制结核分枝杆菌感染的16HBE细胞的自噬,并控制胞内结核分枝杆菌的增殖。 分子医学代表 25:不适用(2022年)。 公共医学:35425995 希克曼RA 等。 亨廷顿病新皮质中亨廷顿内含物的分布和密度:与亨廷顿重复扩张的区域相关性,与病理分级无关。 神经病理活动 10:55(2022)。 公共医学:35440014