主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 SP1-ChIP级兔单克隆抗体[EPR22648-50] 适用于:ChIP-sequencing、Flow Cyt(Intra)、ChIC/CUT&RUN-seq、WB、IHC-P、ICC/IF、IP、ChIP 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 SP1-ChIP级兔单克隆抗体[EPR22648-50] -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 人类 -
免疫原 重组片段。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HAP1、HeLa、K-562和HEK-293T全细胞裂解物。 IHC-P:人类乳腺癌和胃癌组织。 ICC/IF:HeLa细胞。 流式细胞术:HeLa细胞。 IP:HeLa细胞裂解物。 ChIP:由HeLa细胞制备的染色质。 ChIP-seq:由HeLa细胞制备的染色质。 ChIC/CUT&RUN-Seq:野生型HeLa细胞。
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一般注意事项
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油(甘油,甘油),0.05%BSA,PBS -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆性 单克隆的 -
克隆编号 EPR22648-50 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同种型对照 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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目标
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功能 能够激活或抑制转录以响应生理和病理刺激的转录因子。 与富含GC的基序具有高亲和力,并调节参与细胞生长、凋亡、分化和免疫反应等多种过程的大量基因的表达。 高度受翻译后修饰(磷酸化、琥珀酰化、蛋白水解裂解、糖基化和乙酰化)调控。 还结合PDGFR-αG-box启动子。 可能在调节细胞对DNA损伤的反应中起作用。 与染色质重塑有关。 在c-FOS启动子上SMARCA4/BRG1的招募中发挥作用。 在FE65基因表达的调节中发挥重要作用。 在与ATF7IP的复合物中,通过诱导TERT和TERC基因表达来维持癌细胞中的端粒酶活性。 -
组织特异性 胃腺癌中上调(蛋白质水平)。 -
序列相似性 属于Sp1 C2H2型锌指蛋白家族。 包含3个C2H2型锌指。 -
翻译后 修改 在多个丝氨酸和苏氨酸残基上磷酸化。 磷酸化与泛素化、酰化和蛋白水解过程耦合。 Ser-59上的磷酸化增强了蛋白水解裂解。 Ser-7上的磷酸化增强泛素化和蛋白质降解。 Ser-101对DNA损伤的过度磷酸化对转录活性没有影响。 MAPK1/MAPK3介导的Thr-453和Thr-739磷酸化增强了VEGF转录,但抑制了FGF2触发的PDGFR-α转录。 也与ERBB2对RECK的抑制有关。 丝裂原活化蛋白激酶8在有丝分裂期间对Thr-278和Thr-739过度磷酸化,保护SP1免受泛素依赖途径的降解。 钙调蛋白激活的PKCzeta在锌指结构域磷酸化。 PKCzeta对Ser-641的磷酸化通过释放其阻遏物p107对TSA激活的LHR基因表达至关重要。 血管紧张素II通过AT1受体刺激Thr-668、Ser-670和Thr-681的磷酸化,从而增加与PDGF-D启动子的结合。 这种磷酸化在受伤的动脉壁中增加。 Ser-59和Thr-681都可以在细胞周期间期被PP2A去磷酸化。 Ser-59上的去磷酸化导致间期染色质结合增加,并增加转录活性。 在胰岛素刺激下,在几个C末端丝氨酸和苏氨酸残基上依次进行糖基化和磷酸化。 乙酰化。 乙酰化/脱乙酰化事件影响转录活性。 去乙酰化通过向启动子募集p300导致12(s)-脂氧合酶基因的表达增加。 无所不在。 泛素化发生在C末端蛋白水解的多肽上,由磷酸化触发。 SUMO1进行酰化。 氨酰化调节N-末端阻遏物结构域的蛋白水解裂解。 Sumoylation水平在肿瘤发生过程中减弱。 磷酸化介导SP1去甲酰化。 N-末端阻遏物结构域中的蛋白质裂解被sumoylation阻止。 C端裂解产物容易降解。 O-糖基化; 含有至少8个N-乙酰氨基葡萄糖侧链。 水平由胰岛素和SP1磷酸化状态控制。 胰岛素介导的O-糖基化将SP1定位于细胞核,在细胞核中依次进行脱糖和磷酸化。 O-糖基化通过干扰与许多转录因子(包括ELF1和NFYA)的相互作用影响转录活性。 还抑制与HIV1启动子的相互作用。 受过氧化物酶体增殖物受体γ(PPARgamma)抑制。 -
手机定位 核心。 细胞质。 核位置由糖基化/磷酸化状态控制。 胰岛素促进细胞核定位,而胰高血糖素促进细胞质定位。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 SP 1抗体 SP1抗体 Sp1转录因子抗体
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图像
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所有车道: 抗SP1抗体[EPR22648-50]-ChIP等级(ab231778),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: SP1敲除HAP1全细胞裂解物 3号车道: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞),全细胞裂解物 车道4: 293T(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 81千Da 观察到的频带大小: 98千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 8秒 在野生型HAP1细胞中,当信号在SP1敲除细胞中丢失时,ab231778表现出与SP1特异性反应。 对野生型和SP1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab231778和 约181602 (兔抗GAPDH负荷对照)分别在室温下以1/1000稀释度和1/200000稀释度孵育1小时。 用山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶偶联物开发印迹( ab97051型 )二级抗体在成像前在室温下以1/100000稀释1小时。 使用ECL技术在BIO-RAD®ChemiDoc™MP仪器上进行印迹。 文献中描述了SP1的降解片段(29-97kDa)(PMID:10329728)。 -
所有车道: 抗SP1抗体[EPR22648-50]-ChIP等级(ab231778),稀释度为1/10000 1-2车道: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 3-4车道: 293T(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 每车道15µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 81千Da 观察到的频带大小: 98千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 40秒 通道1和3:样品由冻融循环裂解液制成。 通道2和通道4:新鲜制备样品,并立即使用,以尽量减少蛋白质降解。 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
所有车道: 抗SP1抗体[EPR22648-50]-ChIP等级(ab231778),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: SP1敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 81千Da 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在100 kDa下观察到ab231778。 红色-加载控制 约8245 在37 kDa时观察到。 ab231778抗SP1抗体[EPR22648-50]在野生型HeLa细胞中与SP1特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约265519 (敲除细胞裂解物 约257698 )已使用。 对野生型和SP1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab231778和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别以1000分之一和20000分之一的稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
染色质是根据Abcam X-ChIP协议从HeLa细胞制备的。 用甲醛固定细胞10分钟。 用25µg染色质、5µg ab231778(红色)和20µl蛋白A/g琼脂糖凝胶珠进行ChIP。 将5μg兔正常IgG添加到珠子对照(灰色)中。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(sybr green方法)定量。 引物和探针位于转录区的第一kb。 -
从HeLa细胞制备染色质。 细胞用1%甲醛固定10分钟。 使用30µg染色质和4µg抗SP1抗体[EPR22648-50]-ChIP等级(ab231778)进行ChIP。 ChIP DNA在Illumina NextSeq 500上测序,深度为3000万读。 ChIP-Seq验证由加利福尼亚州卡尔斯巴德的Active Motif执行。 可以下载映射读取的其他屏幕截图 在这里 .
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
合格证书
工具书类 (13)
吴X 等。 LPS诱导胆管上皮MUC5AC上调中miR-130b-Sp1转录调控的分子机制。 分子医学代表 23:不适用(2021年)。 公共医学:33300069 王D 等。 转录因子SP1诱导的microRNA-146b-3p通过调节FAM107A促进结直肠癌的进展和转移。 生命科学 277:119398 (2021). 公共医学:33831429 Pu FF公司 等。 SP1诱导的长非编码RNA SNHG6通过招募EZH2抑制KLF6,从而促进软骨肉瘤的癌变。 细胞死亡病 12:59 (2021). 公共医学:33431838 刘C 等。 胶质瘤中甲基化和SP1对MAGE-D4转录的协同调节。 美国J Transl Res 13:2241-2255 (2021). 公共医学:34017386 李F 等。 基于全基因组功能筛查数据确定ARGLU1作为胃癌潜在治疗靶点。 EBioMedicine公司 69:103436 (2021). 公共医学:34157484