主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EP784Y]到Smad2 适用于:IHC-P、IP、ICC/IF、Flow Cyt(Intra)、ChIC/CUT&RUN-seq、WB 敲除已验证 反应对象:大鼠、人
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆[EP784Y]到Smad2 -
寄主物种 兔子 -
特异性 该抗体对Smad2的MH 1结构域具有特异性。 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠,人类 -
免疫原 人Smad2 aa 50-150内的合成肽。 确切的顺序是专有的。 -
阳性对照 WB:A549、Jurkat、HeLa、A-673、HUVEC和C6细胞裂解物。 IP:希拉 IHC-P:人类膀胱和前列腺癌组织。 ICC/IF:HeLa细胞。 流式细胞周期(内部):HeLa和PC3细胞。 ChIC/CUT&RUN序列:HaCaT细胞
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一般注意事项
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 交付后,将等分样品储存在-20°C下。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油、0.05%BSA、59%PBS -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 EP784Y型 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
重组蛋白
应用程序
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目标
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功能 受体调节型SMAD(R-SMAD)是一种由TGF-β(转化生长因子)和激活素1型受体激酶激活的细胞内信号转导和转录调节剂。 结合TGF-β调节的许多基因启动子区域中的TRE元件,并在形成SMAD2/SMAD4复合物时激活转录。 可能在结直肠癌中起到抑癌作用。 -
组织特异性 在骨骼肌、心脏和胎盘中高水平表达。 -
序列相似性 属于矮人/SMAD家族。 包含1个MH1(MAD同源1)域。 包含1个MH2(MAD同源2)域。 -
翻译后 修改 对一个或多个Thr-220、Ser-245、Ser-250和Ser-255进行磷酸化。 作为对TGF-β的反应,TGF-贝塔和激活素1型受体激酶在Ser-465/467上磷酸化。 当Ser-465/467磷酸化时,能够与SMURF2相互作用,招募其他蛋白质,如SNON进行降解。 作为对核心蛋白的反应,核心蛋白是TGF-β信号的天然抑制剂,在Ser-240上被CaMK2磷酸化。 MAPK3对EGF刺激的磷酸化作用; 增加转录活性和稳定性,并被钙调蛋白阻断。 对TGF-β的反应,NEDD4L泛素化; 促进其降解。 辅活化子在Lys-19上乙酰化以响应TGF-β信号传导,从而增加转录活性。 短异构体:乙酰化增加体外DNA结合活性并增强其与体内靶启动子的关联。 TGF-β增强了EP300在细胞核中的乙酰化作用。 -
手机定位 细胞质。 核心。 缺乏转化生长因子β的细胞质和细胞核。 在TGF-β刺激下,与SMAD4复合后迁移至细胞核。 通过磷酸酶PPM1A进行去磷酸化,从SMAD2/SMAD4复合物中释放,并通过与RANBP1的相互作用从细胞核中输出。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 果蝇,MADR2抗体的同源物 hMAD-2抗体 HsMAD2抗体
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图像
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所有车道: 1/2000稀释度的抗S-mad2抗体[EP784Y](ab40855) 车道1: A549细胞裂解物 车道2: Jurkat细胞裂解物 3号车道: 野生型HeLa细胞裂解物 车道4: SMAD2敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 58千Da 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在58kDa下观察到ab40855。 红色-装载控制, 约8245 在37 kDa时观察到。 ab40855在野生型HeLa中与Smad2反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255430型 (敲除细胞裂解物 约263833 )已使用。 野生型和Smad2基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab40855和抗-GAPDH抗体[6C5]-负载控制( 约8245 )分别以2000倍和20000倍的比例在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗S-mad2抗体[EP784Y](ab40855) 车道1: 野生型HeLa全细胞裂解物 车道2: Smad2敲除HeLa全细胞裂解物 3号车道: A549全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 58千Da 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在58 kDa下观察到ab40855。 红色-装载控制, 约9484 ,在37 kDa下观察到。 ab40855在野生型HeLa细胞中与Smad2特异性反应,因为Smad2敲除细胞中信号丢失。 对野生型和SMAD2基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab40855和 约9484 (小鼠抗GAPDH负载对照)分别在1/10000稀释度和1/20000稀释度的4°C下孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
所有车道: 1/2000稀释度的抗S-mad2抗体[EP784Y](ab40855) 车道1: A-673(人肌肉尤因肉瘤细胞系)全细胞裂解物 车道2: HUVEC(人脐静脉内皮细胞系)全细胞裂解物 3号车道: C6(大鼠胶质瘤细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )1/20000稀释(山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合) 预测的带宽大小: 58千Da 稀释和封闭缓冲液:5%NFDM/TBST -
所有车道: 抗S-mad2抗体[EP784Y](ab40855),稀释度为1/10000 车道1: Jurkat(外周血T细胞白血病细胞系)全细胞裂解物 2-3车道: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )20000µg(山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合) 预测的带宽大小: 58千Da 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
ab40855通过免疫组织化学(IHC-P-副甲醛固定,石蜡包埋切片)在人膀胱癌组织切片中染色Smad2。 用多聚甲醛固定组织,在EDTA缓冲液中通过热介导回收抗原。 样品与一级抗体以1/50的稀释度孵育。 免疫组织探针一步法HRP聚合物用作二级抗体,随时可用。 阴性对照1: PBS代替一级抗体。 -
用细胞内流式细胞术对人细胞系HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)中的Smad2进行ab40855染色。 用4%多聚甲醛固定细胞,并将样品与一级抗体以1/20的稀释度孵育。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)以1/2000的稀释度作为次级抗体。 同型对照:兔单克隆IgG(黑色) 未标记对照:未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞(蓝色) -
在1/500的工作稀释度下,用纯化的ab40855对HeLa细胞进行免疫荧光染色,并用DAPI进行反染色。 二级抗体是Alexa Fluor ® 488共轭山羊抗兔( 约150077 ),稀释度为1/1000。 细胞固定在4%PFA中,并使用0.1%Triton X 100进行渗透。 阴性对照显示在右下角面板中——对于阴性对照,使用PBS代替一级抗体。 -
重叠直方图显示用ab40855染色的PC3细胞(红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab40855,1/100稀释)孵育30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H&L)( 约150077 )在22°C下以1/2000稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 -
1/500000稀释的抗S-mad2抗体[EP784Y](ab40855)+Jurkat细胞裂解物 预测的带宽大小: 58千Da 观察到的频带大小: 58千Da -
人前列腺癌组织中1:100稀释染色Smad2的ab40855。
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (89)
郑毅 等。 抗PAI-1单克隆抗体抑制食管鳞癌的转移和生长。 J癌症 14:114-128 (2023). 公共医学:36605486 王C 等。 lncRNA XIST敲除通过miR‑34a/SMAD2轴抑制糖尿病性白内障的细胞增殖并促进凋亡。 摩尔医学代表 25:不适用(2022年)。 公共医学:34751414 魏伟 等。 肺痹汤指示血清抑制RAW264.7细胞和BMDM中脂多糖诱导的炎症。 实验治疗学 23:110 (2022). 公共医学:34976152 吴F 等。 TGF-βRII通过促进PKM2核移位调节口腔癌相关成纤维细胞的葡萄糖代谢。 细胞死亡发现 8:3 (2022). 公共医学:35013150 张Z 等。 Circ_0002623通过调节miR-1276/SMAD2轴促进膀胱癌进展。 癌症科学 113:1250-1263 (2022). 公共医学:35048477