主要功能和细节
小鼠单克隆抗体[19A7AB4]至SIRT1 适用人群:WB、Flow Cyt、ICC/IF、IHC-P 反应对象:小鼠、大鼠、人类 同位素:IgG1
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 小鼠单克隆抗体[19A7AB4]至SIRT1 -
寄主物种 鼠标 -
特异性 目标蛋白的表达水平因样本类型而异,可能需要进行一些优化。 对于蛋白质印迹,使用组织样品时可能需要更高浓度的裂解物。 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 重组人SIRT1 -
阳性对照 WB:HEK293、HeLa、MDA-MB-231、HepG2、H9C2和MEF细胞裂解物。 ICC:HDFn细胞。 流式细胞仪:HL60细胞。 IHC-P:人正常结肠FFPE组织。
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一般注意事项 Western blot方案建议: 为了获得使用该抗体进行Western blot的最佳结果,我们建议: 1) 使用梯度凝胶(例如10-20%三甘氨酸凝胶)。 2) 含10%异丙醇的CAPS转移缓冲液。 3) PVDF膜。 4) 封闭溶液:PBS+5%牛奶在4°C下孵育过夜。 5) 抗体溶液:PBS+1%牛奶+0.05%吐温+抗体孵育2小时。 6) 洗涤液:PBS+0.05%吐温培养5分钟(重复3次)。 PBS仅用于最终清洗。 7) HRP检测方法(如ECL Prime)。 我们的技术团队( technical@abcam.com )我们很乐意提供更多信息和建议。 该抗体克隆由Abcam制造。 如果您需要为您的实验定制缓冲配方或共轭物,请联系 orders@abcam.com . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
属性
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表格 液体 -
存储说明 在4°C下装运。 储存于+4°C。 请勿冻结。 -
存储缓冲区 pH值:7.4 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:HEPES缓冲盐水 -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 亲和力已净化 -
净化注意事项 利用无血清培养基中生长的杂交瘤体外制备ab110304。 纯度:SDS-PAGE分析>95%。 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 19A7AB4型 -
同位素 IgG1 -
轻链型 卡帕 -
研究领域
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替代版本 -
检测试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
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应用
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目标
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功能 NAD依赖性蛋白脱乙酰酶,将转录调控直接与细胞内能量学联系起来,并参与多种分离细胞功能的协调,如细胞周期、对DNA损伤的反应、代谢、凋亡和自噬。 可以通过组蛋白的去乙酰化调节染色质功能,并可以促进组蛋白和DNA甲基化的改变,导致转录抑制。 脱乙酰化广泛的转录因子和协同调节因子,从而对目标基因的表达进行正调控和负调控。 作为NAD(+)/NADH细胞溶质比率的传感器,该比率因葡萄糖缺乏和与热量限制相关的代谢变化而改变。 对骨骼肌细胞分化至关重要,对低营养素的反应介导对骨骼肌成肌细胞分化的抑制作用,这也涉及5'-AMP活化蛋白激酶(AMPK)和烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)。 eNoSC(能量依赖性核仁沉默)复合物的成分,该复合物可调节rDNA沉默以响应细胞内能量状态,并通过招募组蛋白修饰酶发挥作用。 eNoSC复合物能够感知细胞的能量状态:当葡萄糖饥饿时,NAD(+)/NADP(+)比率升高会激活SIRT1,导致组蛋白H3脱乙酰化,然后由SUV39H1在“Lys-9”(H3K9me2)将H3二甲基化,并在rDNA位点形成沉默染色质。 将SUV39H1的“Lys-266”去乙酰化,导致其活化。 通过脱乙酰PCAF和MYOD1抑制骨骼肌分化。 HIST1H1E的去乙酰化H2A和'Lys-26'。 组蛋白H4的去乙酰化酶“Lys-16”(体外)。 通过染色质重塑参与NR0B2/SHP共表达功能:通过NR0B2/SHP招募到LRH1靶基因启动子,从而刺激组蛋白H3和H4脱乙酰化,导致转录抑制。 建议通过积极调节端粒长度来促进基因组完整性; 然而,关于着丝粒周围异染色质定位的报道相互矛盾。 建议通过调节核SUV39H1的可用池,在组成异染色质(CH)的形成和/或维护中发挥作用。 氧化/代谢应激通过MDM2抑制SUV39H1多泛素化来减少SUV39H2降解。 SUV39H1水平的增加增加了CH中SUV39H2的周转,这反过来似乎加快了异染色质的更新,异染色素在应激反应期间与更大的基因组完整性相关。 去乙酰化p53/TP53的“Lys-382”并损害其诱导转录依赖性促凋亡程序和调节细胞衰老的能力。 脱乙酰化TAF1B,从而通过RNA聚合酶I抑制rDNA转录。脱乙酰化MYC,促进MYC与MAX的结合,降低MYC的稳定性,导致转化能力受损。 去乙酰化FOXO3以应对氧化应激,从而提高其诱导细胞周期阻滞和抗氧化应激抵抗的能力,但抑制FOXO3-介导的凋亡转录活性诱导; 也导致FOXO3泛素化和蛋白质体降解。 在调节转录活性和凋亡方面,似乎对MLLT7/FOXO4有类似的影响。 去乙酰化物DNMT1; 从而损害DNMT1甲基转移酶诱导的依赖性转录抑制因子活性,调节DNMT1细胞周期调节功能和DNMT1介导的基因沉默。 脱乙酰化酶RELA/NF-kappa-B p65从而抑制其反式激活潜能并增强对TNF-α的反应中的凋亡。 脱乙酰HIF1A、KAT5/TIP60、RB1和HIC1。 去乙酰化FOXO1导致其核保留并增强其转录活性,从而增加肝脏中的糖异生。 抑制E2F1转录活性和凋亡功能,可能通过去乙酰化。 参与HES1和HEY2介导的转录抑制。 与MYCN合作似乎参与了DUSP6/MAPK3的转录抑制,从而通过“Ser-62”磷酸化使MYCNs稳定。 脱乙酰MEF2D。 需要拮抗剂介导的AR依赖性基因的转录抑制,该基因可能与组蛋白H3的局部去乙酰化有关。 抑制HNF1A介导的转录。 CREBZF用于抑制ESRRG。 调节AP-1转录因子活性。 脱乙酰化物NR1H3和NR1H2以及‘Lys-434’处NR1H3脱乙酰化正调控NR1H3:RXR靶基因的转录,促进NR1H4蛋白体降解,导致胆固醇外流; 提出了转录到达轮后启动子清除机制。 参与脂质代谢。 通过抑制PPARG(可能与NCOR1和SMRT/NCOR2相关)调节白色脂肪细胞的脂肪生成和脂肪动员。 去乙酰化ACSS2导致其活化,以及HMGCS1。 参与肝脏和肌肉代谢。 通过去乙酰化和激活PPARGC1A,在低血糖条件下激活骨骼肌中的脂肪酸氧化,并参与葡萄糖稳态。 参与肝脏PPARA和脂肪酸β氧化的调节。 参与葡萄糖对胰岛β细胞胰岛素分泌的正向调节; 该功能似乎意味着UCP2的转录抑制。 建议去乙酰化IRS2,从而促进其胰岛素诱导的酪氨酸磷酸化。 去乙酰化SREBF1亚型SREBP-1C,从而降低其在脂肪生成基因表达中的稳定性和反式激活。 通过抑制参与DNA修复的基因(如XPC和TP73)参与DNA损伤反应,脱乙酰化XRCC6/Ku70,促进补充额外因子到受损DNA位点,如SIRT1-脱乙酰化NBN可以招募ATM来启动DNA修复,SIRT1-去乙酰化XPA与RPA2相互作用。 还通过同源重组和特异性单链退火(独立于XRCC6/Ku70和NBN)参与DNA双链断裂的DNA修复。XPC的转录抑制可能涉及E2F4:RBL2抑制复合物和蛋白激酶B(AKT)信号。 TP73的转录抑制可能涉及E2F4和PCAF。 脱乙酰化WRN,从而调节其解旋酶和核酸外切酶活性,并调节WRN核转位以应对DNA损伤。 在“Lys-6”和“Lys-7”处脱乙酰APEX1,并通过促进APEX1与XRCC1的结合刺激细胞AP内切酶活性。 通过阻断细胞质p53/TP53的核转位并可能将其重定向至线粒体,增加p53/TP33介导的转录依赖性凋亡。在“Lys-539”和“Lys-542”处脱乙酰化XRCC6/Ku70,使其将BAX与线粒体隔离,从而抑制应激诱导的凋亡。 可能通过去乙酰化ATG5、ATG7和MAP1LC3B/ATG8参与自噬。 去乙酰化AKT1,导致AKT1和PDK1与PIP3的结合增强,并促进其活化。 建议在调节与细胞衰老相关的STK11/LBK1依赖性AMPK信号通路中发挥作用,这似乎涉及调节STK11/LBK1的乙酰化状态。 能去乙酰化STK11/LBK1,从而增加其活性、细胞质定位和与STRAD的结合; 然而,这种活性在正常细胞中的相关性尚不清楚。 内皮细胞中显示出抑制STK11/LBK1活性并促进其降解。 在“Lys-64”和“Lys-70”处脱乙酰SMAD7,从而促进其降解。 去乙酰化CIITA并增强其MHC II类转录激活,并有助于其稳定性。 终止MECOM/EVI1。 在“Lys-487”处脱乙酰化PML,这种脱乙酰化促进PML对PER2核定位的控制。 在神经原性转换期间,通过抑制选择性NOTCH1靶基因 异构体2:异构体2显示为p53/TP53的去乙酰化'Lys-382',但活性低于异构体1。 结合起来,这两种亚型发挥相加作用。 异构体2调节p53/TP53的表达和细胞应激反应,并反过来被呈现SIRT1异构体依赖性自身调节环的p53/TP53抑制。 (微生物感染)如果HIV-1感染,与病毒Tat蛋白相互作用并使其脱乙酰。 病毒Tat蛋白抑制SIRT1对RELA/NF-kappa-B p65的去乙酰化活性,从而增强其转录活性,SIRT1被认为有助于感染期间T细胞的过度激活。 SirtT1 75kDa片段:具有催化活性的75SirT1可能参与细胞凋亡的调节。 可能通过与细胞色素C结合和干扰凋亡小体组装,参与保护软骨细胞免受凋亡死亡。 -
组织特异性 广泛表达。 -
序列相似性 属于sirtuin家族。 I类亚科。 包含1个脱乙酰酶sirtuin型结构域。 -
翻译后 修改 多个赖氨酸残基甲基化; DNA损伤后甲基化增强,对p53/TP53的脱乙酰酶活性来说是必不可少的。 磷酸化。 STK4/MST1磷酸化,导致SIRT1介导的p53/TP53脱乙酰化受到抑制。 丝氨酸-27、丝氨酸-47和丝氨酸-530的MAPK8/JNK1磷酸化导致核定位和酶活性增加。 DYRK1A和DYRK3在Thr-530处的磷酸化激活脱乙酰酶活性并促进细胞存活。 雷帕霉素复合物1(mTORC1)在Ser-47的哺乳动物靶点磷酸化抑制脱乙酰活性。 被CaMK2磷酸化,导致p53/TP53和NF-kappa-B p65/RELA脱乙酰活性增加(通过相似性)。 涉及MAPK9的Ser-27磷酸化与蛋白质稳定性有关。 一些磷酸化位点存在一些模糊性:Ser-159/Ser-162和Thr-544/Ser-545。 经TNF-α处理后,组织蛋白酶B进行蛋白质水解,生成催化活性但稳定的SirtT1 75kDa片段(75SirT1)。 GAPDH对S-亚硝基化,导致抑制NAD依赖性蛋白脱乙酰酶活性。 -
手机定位 细胞质。 线粒体和细胞核,PML体。 细胞质。 核心。 通过与PML的互动招募到核机构(PubMed:12006491)。 在细胞核中用APEX1染色(PubMed:19934257)。 可在核仁、核常染色质、异染色质和内膜中发现(PubMed:15469825)。 细胞核和细胞质之间的穿梭(根据相似性)。 利用XBP1亚型2在细胞核中进行结肠酸化(PubMed:20955178)。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 75SirT1抗体 hSIR2抗体 hSIRT1抗体
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图像
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所有车道: 1µg/ml时的抗SIRT1抗体[19A7AB4](ab110304) 车道1: 野生型HEK-293细胞裂解物 车道2: SIRT1 CRISPR/Cas9编辑的HEK-293细胞裂解物 3号车道: MDA-MB-231细胞裂解物 车道4: HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 81千Da 观察到的频带大小: 110千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在110 kDa下观察到ab110304。 红色-装载控制, 约181602 (兔抗GAPDH抗体[EPR16891])。 western blot显示ab110304与SIRT1反应。 在110kDa以下的CRISPR/Cas9编辑的裂解物通道中观察到的条带可能代表截断形式和裂解碎片。 尚未对此进行进一步调查。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在与ab110304和 约181602 (兔抗GAPDH抗体[EPR16891])分别在4°C、1µg/ml和1:20000稀释液中过夜。 印迹与山羊抗鼠IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( 约216772 )和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
Leica BOND上福尔马林固定石蜡包埋正常人类睾丸切片SIRT1染色的IHC图像 TM(TM) 系统使用标准方案F。使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)热介导抗原检索对切片进行20分钟的预处理。 然后将切片与1ug/ml的ab110304在室温下孵育15分钟,并使用HRP缀合的紧密聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 插入的二级对照图像取自无一级抗体的相同分析。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 * 组织取自人类研究组织库,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持 -
Leica BOND上福尔马林固定石蜡包埋正常人结肠切片SIRT1染色的IHC图像 TM(TM) 系统使用标准方案F。使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)热介导抗原检索对切片进行20分钟的预处理。 然后在室温下将切片与ab110304(5ug/ml)孵育15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 插入的二级对照图像取自无一级抗体的相同分析。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 * 组织取自人类研究组织库,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持 -
在HDFn细胞(多聚甲醛固定和Triton X-100渗透)中使用0.5µg/ml染色SIRT1的ab110304进行免疫细胞化学/免疫荧光分析。 第二抗体是(红色)Alexa Fluor®594山羊抗小鼠IgG(H+L),以1/1000的稀释度使用1h。 所有阻断步骤均使用10%山羊血清作为阻断剂。 -
用1µg/mL SIRT1抗体ab110304(蓝色)或等量的同种对照抗体(红色)对HL-60细胞进行染色,并用流式细胞术进行分析。 -
所有车道: 1µg/ml时的抗SIRT1抗体[19A7AB4](ab110304) 车道1: HeLa全细胞裂解物 车道2: HepG2全细胞裂解物 3号车道: F9全细胞裂解物 车道4: MEF1全细胞裂解物 车道5: PC-12全细胞裂解物 车道6: RBL-1全细胞裂解物 7号车道: 人睾丸组织裂解物 第8车道: 人结肠组织裂解物 9号车道: 小鼠睾丸组织裂解物 10号车道: 小鼠结肠组织裂解物 11号车道: 大鼠睾丸组织裂解物 12号车道: 大鼠结肠组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 以1/10000稀释度预吸附的山羊抗鼠IgG H&L(HRP) 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 81千Da 观察到的频带大小: 110千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 4分钟 该印迹是在MOPS缓冲系统下使用4-12%双三凝胶生成的。 凝胶在200V下运行50分钟,然后在30V下转移到硝基纤维素膜上70分钟。 然后使用3%牛奶将膜封闭一小时,然后在4°C下与ab110304孵育过夜。 使用与HRP结合的抗鼠抗体检测抗体结合,并使用ECL显影液进行可视化。 -
所有车道: 1/1000稀释度下的抗SIRT1抗体[19A7AB4](ab110304) 所有车道: 大鼠骨骼肌 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗鼠剂,稀释度为1/6000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 81千Da 观察到的频带大小: 120千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 13分钟 4C时用3%牛奶(TBS-tween)封闭16小时 -
所有车道: 0.125µg/ml时的抗SIRT1抗体[19A7AB4](ab110304) 车道1: HepG2细胞裂解物(人) 车道2: H9C2细胞裂解物(大鼠) 3号车道: MEF细胞裂解物(小鼠) 预测的带宽大小: 81千Da WB条件 初级抗体:在10X封闭缓冲液中0.25µg/mL( 约126587 ). 室温下3小时。 次级抗体:在10X封闭缓冲液中1:5000( 约126587 ). 室温下3小时。 ab110304检测到大约110 kDa(110-121 kDa)的带,这可能是由于翻译后糖基化所致。 已知SIRT1与其他几种蛋白质结合,121kDa带也可能是由于这些复合物之一的存在(确保样品充分还原和变性)。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (257)
刘Q 等。 PUM2通过抑制SIRT1,通过SLC7A11依赖性抑制铁下垂,加重缺血再灌注诱导的神经炎症和脑损伤。 分子细胞生物化学 478:609-620 (2023). 公共医学:35997855 李杰 等。 氧合序贯保存减轻肝移植缺血再灌注损伤。 iScience公司 26:105858 (2023). 公共医学:36636350 贾C 等。 血管生成素样蛋白4(Angptl4)沉默通过Sirtuin 1/NF-κB途径减少骨关节炎的炎症、细胞外基质降解和细胞凋亡。 氧化介质细胞Longev 2022:1135827 (2022). 公共医学:36071864 岩原N 等。 SIRT1的激活通过皮质素促进膜重封。 科学代表 12:15328 (2022). 公共医学:36097021 Erichsen L和Adjaye J 尿源性肾祖细胞中年龄累积的DNA损伤与SIRT1-AKT-GSK3轴之间的串扰。 老龄化(纽约奥尔巴尼) 14:8179-8204 (2022). 公共医学:36170022