主要功能和细节
兔多克隆至RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S5) 适用于:IHC-Fr、IHC-P、ELISA、IP、WB、ChIP、ICC/IF、IHC-批发 对以下动物有反应:小鼠、大鼠、人类、酿酒酵母、非洲爪蟾、拟南芥、秀丽隐杆线虫、果蝇、裂殖酵母、斑马鱼 同位素:IgG
使用重组抗体获得更好的批间重现性
充满信心的研究——每批产品的结果一致且可重复 长期和可扩展的供应–由重组技术提供动力,实现快速生产 第一次实验的成功——通过广泛验证证实了特异性 符合道德标准–生产无动物
概述
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产品名称 -
描述 兔多克隆至RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S5) -
寄主物种 兔子 -
特异性 该抗体识别RNA聚合酶II的C末端结构域重复序列YSPTSPS的氨基酸5位置中发现的磷酸化丝氨酸。 从2024年1月起,该多克隆补货批次的QC测试发生了变化。 我们的Abcam产品承诺仍涵盖所有测试和预期的应用和反应性物种组合。 然而,我们不再测试所有应用程序。 有关特定批次的更多信息,请联系我们的科学支持部门,他们将乐于提供帮助。 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 小鼠、大鼠、人类、酿酒酵母、非洲爪蟾、拟南芥、秀丽隐杆线虫、果蝇、裂殖酵母、斑马鱼 预计用于: 种类繁多的其他物种 -
免疫原 -
阳性对照 ICC/IF:HeLa细胞。 WB:非洲爪蟾全组织裂解物
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一般注意事项 RNA聚合酶II最大亚单位C末端结构域(CTD)的磷酸化是mRNA代谢过程中的关键事件。 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买前向我们发送询问和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS 浓度<1mg/ml的该产品批次可以添加BSA作为稳定剂。 如果您想了解有关特定批次配方的信息,请联系我们的科学支持团队,他们将乐于提供帮助。 -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 免疫原亲和力纯化 -
初级抗体注释 RNA聚合酶II最大亚单位C末端结构域(CTD)的磷酸化是mRNA代谢过程中的关键事件。 -
克隆性 多克隆 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
免疫肽(阻断) -
同位素控制 -
重组蛋白 -
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应用
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目标
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功能 依赖于DNA的RNA聚合酶利用四种核糖核苷三磷酸作为底物催化DNA转录成RNA。 RNA聚合酶II的最大催化成分,合成mRNA前体和许多功能性非编码RNA。 与第二大亚基一起形成聚合酶活性中心。 Pol II是基础RNA聚合酶II转录机制的核心组成部分。 它由相对移动的移动元素组成。 RPB1是中心大裂口核心元件的一部分,夹持元件移动以打开和关闭裂口,以及夹持进入DNA模板的颌骨。 在转录开始时,启动子的单链DNA模板链位于Pol II的中心活性位点裂缝内。 桥接螺旋来自RPB1并穿过催化位点附近的缝隙,被认为通过在核苷酸添加的每一步从直构象转换为弯构象,作为棘轮移动RNA-DNA杂交体穿过活性位点,从而促进Pol II的易位。 在转录延伸过程中,Pol II随着转录延伸在模板上移动。 延伸受Pol II最大亚基(RPB1)C末端结构域(CTD)磷酸化状态的影响,该结构域是调节转录起始、延伸、终止和mRNA处理的因子的组装平台。 当与三角型肝炎病毒的小三角抗原相关时,作为RNA依赖的RNA聚合酶,同时作为病毒RNA循环基因组的复制和转录酶。 -
序列相似性 属于RNA聚合酶β链家族。 -
域 C末端结构域(CTD)是调节转录起始、延伸、终止和mRNA处理的因子的组装平台。 -
翻译后 修改 C末端结构域(CTD)中的串联七肽重复序列可以被高度磷酸化。 磷酸化激活Pol II。 磷酸化主要发生在七肽重复序列的“Ser-2”和“Ser-5”残基上,至少由CDK7和CDK9介导。 与DNA相关的POLR2A的CDK7磷酸化通过触发与DNA的分离来促进转录启动。 七肽重复序列的“Ser-7”也发生磷酸化,这是snRNA基因高效转录和转录物处理所必需的。 磷酸化状态被认为是由位点特异性CTD激酶和磷酸酶的平衡作用引起的,并提出了一个“CTD编码”,用于指定Pol II在转录周期中的位置。 蛋白磷酸酶CTDSP1脱磷。 在C-末端结构域(CTD)的串联七肽重复序列中,有些不符合Y-S-P-T-S-P-S共识,第七个丝氨酸残基“Ser-7”被赖氨酸取代 在这些非感官七肽重复序列中,赖氨酸-7’可以选择性地乙酰化、甲基化和二甲基化。 EP300是一种能够乙酰化“Lys-7”的酶。 非感觉七肽重复序列的“Lys-7”乙酰化与“Ser-2”磷酸化和活性转录相关。 它可以调节转录的起始或早期延伸步骤,特别是诱导基因。 当CTD被低磷酸化时,在转录起始前在Arg-1810处甲基化,在Ser-1805和Ser-1808处磷酸化阻止这种甲基化。 分别由PRMT5和CARM1在Arg-1810处对称或不对称二甲基化。 对称或不对称二甲基化调节与CTD结合蛋白(如SMN1/SMN2和TDRD3)的相互作用。 SMN1/SMN2优先与对称二甲基形式相互作用,而TDRD3优先与不对称形式相互作用。通过SMN1/SMN2的招募,需要对称二甲基化来解析RNA聚合酶II产生的RNA-DNA杂种,该杂种在转录末端区域形成R-loop, 正确终止转录的重要步骤。 CTD二甲基化也可能促进选择性RNA的表达。 在C-末端结构域(CTD)的串联七肽重复序列中,有些不符合Y-S-P-T-S-P-S共识,第七个丝氨酸残基“Ser-7”被赖氨酸取代 在这些非感官七肽重复序列中,赖氨酸-7’可以选择性地乙酰化、甲基化和二甲基化。 甲基化发生在最早的转录阶段,先于或伴随着“Ser-5”和“Ser-7”磷酸化。 被WWP2泛素化,导致蛋白酶体降解(通过相似性)。 紫外线处理后,RNA聚合酶II(RNA pol IIo)的伸长形式是泛素化的紫外线损伤位点,不会导致降解:KIAA1530/UVSSA促进泛素化,并促进RNA polⅡo回溯,以允许进入核苷酸切除修复机制。 -
手机定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 177190 秀丽隐杆线虫 Entrez基因: 32100 黑腹果蝇 Entrez基因: 5430 人类 Entrez基因: 20020 鼠标 Entrez基因: 363633 老鼠 Entrez基因: 851415 酿酒酵母 Omim公司: 180660 人类 瑞士保护银行: 第18616页 拟南芥
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替代名称 DNA定向RNA聚合酶ⅡA抗体 DNA导向RNA聚合酶Ⅱ最大亚单位RNA聚合物Ⅱ220kd亚单位抗体 DNA导向RNA聚合酶II亚单位A抗体
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图像
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来自培养细胞、小鼠PVN穿孔(由3组组成的单个池)或从新鲜大脑中分离的整个下丘脑的染色质被交叉连接、超声破坏并纯化。 Suz12对无翼飞机的束缚( 重量1 )β-catenin依赖性发育调节因子和RNA聚合酶II启动子( 核糖核酸 )在这些实验中,家政基因分别作为阳性和阴性对照。 -
根据Abcam X-ChIP协议,从U-2 OS(人类骨肉瘤上皮细胞系)细胞制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25µg染色质、2µg ab5131(蓝色)和20µl蛋白A/g sepharose珠进行ChIP。 未向珠子对照组(黄色)添加抗体。 免疫沉淀DNA在非活性AFM和F8启动子、GAPDH启动子(活性)和y-Actin基因(活性)上定量。 图的顶部显示了y-Actin基因的示意图。黑盒子代表外显子,细线代表内含子。 PCR产物被描述为基因下的棒状物。 -
ab5131染色HeLa细胞中的RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S5)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用1µg/ml的ab5131将细胞培养过夜 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 ,山羊抗兔IgG多克隆第二抗体-H&L(Alexa Fluor ® 488),以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 ab150120型 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以假彩色红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
所有车道: 抗-RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S5)抗体(ab5131),1/5000稀释 车道1: 非洲爪蟾全组织裂解液经二甲基亚砜处理24小时 车道2: 非洲爪蟾全组织裂解液经CDK抑制剂处理24小时 次要 所有车道: HRP-结合山羊抗兔IgG多克隆(1/10000稀释) 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 217千Da 观察到的频带大小: 240千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 1分钟
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ab5131染色的HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞的ICC/IF图像。 细胞在甲醇中固定5分钟,在TBS-T中渗透20分钟,并在室温下与抗体(ab5131,1µg/ml)孵育1小时。 用1%牛血清白蛋白/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸淬灭自身荧光并阻断非特异性蛋白质相互作用。 二级抗体(绿色)为Alexa Fluor ® 488只山羊抗兔IgG(H+L),按1/1000稀释液使用1小时。 Alexa Fluor公司 ® 594 WGA用于标记质膜(红色)。 DAPI染色细胞核(蓝色)。 -
所有车道: 1µg/ml的抗RNA聚合酶II CTD重复YSPTSPS(磷酸S5)抗体(ab5131) 车道1: HeLa(人上皮癌细胞系)核裂解物 车道2: 酿酒酵母(Y190)全细胞裂解液 3号车道: HeLa(人上皮癌细胞系)核裂解物与酿酒酵母RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS肽( 公元12795年 )浓度为1µg/ml 车道4: 酿酒酵母(Y190)全细胞裂解物与酿酒酵母RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS肽( 公元12795年 )浓度为1µg/ml 车道5: HeLa(人上皮癌细胞系)核裂解物 人RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸S5)肽( 约18488 )浓度为1µg/ml 车道6: 酿酒酵母(Y190)全细胞裂解液 人类RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S5)肽( 约18488 )浓度为1µg/ml 7号车道: HeLa(人上皮癌细胞系)与酿酒酵母RNA聚合酶II CTD重复YSPTSPS(磷酸S2)肽的核裂解物( 公元12793年 )浓度为1µg/ml 第8车道: 酿酒酵母(Y190)全细胞裂解物与酿酒酵母RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S2)肽( 公元12793年 )浓度为1µg/ml 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊多克隆至兔IgG-H&L-Pre-Adsorbed(HRP),稀释度为1/3000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 217千Da 暴露时间: 30秒 -
车道1和3-4: 1/500稀释的抗-RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S5)抗体(ab5131) 车道2: 抗-RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S5)抗体(ab5131),1/2000稀释 1-2车道: HeLa核提取物 3号车道: HeLa核提取物 人类RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S5)肽( 约18488 )浓度为1µg/ml 车道4: 带有酿酒酵母RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS肽的HeLa核提取物( 公元12795年 )浓度为1µg/ml 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab6721型 )稀释1/5000 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 217千Da 观察到的频带大小: 250千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 30秒
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (421)
奇农A 等。 超增强相关lncRNA的基因组染色质接触证实LINC01013是主动脉瓣纤维化的调节器。 公共科学图书馆-基因 18:e1010010(2022)。 公共医学:35041643 Garipler G公司 等。 BTB转录因子ZBTB11和ZFP131通过抑制促分化基因维持多能性。 单元格代表 38:110524 (2022). 公共医学:35294876 驻车K 等。 ZWC复合物介导的SPT5磷酸化抑制活性基因启动子处的不同反义RNA转录。 核酸研究 50:3835-3851 (2022). 公共医学:35325203 枕头B 等。 专用伴侣协调核糖体蛋白生产与核糖体组装的共翻译调控,以保持蛋白质平衡。 埃利夫 11:不适用(2022年)。 公共医学:35357307 杨CC 等。 细胞外囊泡中蛋白质转运的昼夜调节。 科技进步 8:eabc9061(2022)。 公共医学:35394844