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查看我们的IHC组织处理协议;IHC固定协议;石蜡包埋组织切片视频协议如果你需要从头开始准备组织切片。
石蜡嵌段为第一脱蜡的用水代替蜡;这是因为大多数染色溶液都是水溶液。有关更多详细信息,请参阅我们的IHC脱蜡协议。
脱蜡后通常采用抗原提取方法,该方法可以揭开在固定过程中被掩盖的抗原。找到最适合你感兴趣目标的抗原回收方法至关重要。你可以从两种抗原回收方法中选择:热介导(也称为热诱导表位回收或HIER)和酶法IHC抗原检索协议.
接下来,根据将要使用的抗体类型,发生一系列阻断步骤,以最大限度地减少抗体的非特异性相互作用,并阻断可能导致假阳性的内源性酶。
阻断后,将切片培养在抗体中;这种孵育可以在直接结合的初级抗体中进行,也可以在初级抗体和次级抗体(荧光抗体或酶联抗体)中进行连续孵育。
如果使用酶联二级培养基,则需要在底物中进一步培养,否则可以安装切片并成像。
查看我们的石蜡切片、冷冻切片和游离漂浮切片的IHC染色方案;全贴装样品的IHC染色方案了解更多详细信息。