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组织固定、脱水和包埋
阵列的准备
免疫染色、洗脱和数据分析
阵列层析成像是一种超高分辨率成像技术,最初由Kristina D.Micheva和Stephen J.Smith在斯坦福大学开发,用于研究神经回路。
树脂包埋的组织被切割成有序的超薄连续切片阵列,并安装在显微镜载玻片上,用荧光抗体染色。阵列可以多次洗脱和重新染色,以重建抗原分布的三维图像。
阵列层析成像提供多重、超高分辨率容积成像和深度相关免疫荧光染色。
了解如何修复、脱水和嵌入组织以用于阵列层析成像。组织固定固定抗原,同时保留分子结构。固定组织通过浸泡在浓度增加的乙醇中脱水,并用丙烯酸树脂替换水。丙烯酸树脂允许超薄切片和重复免疫染色。
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学习如何从树脂包埋组织中制备连续切片阵列。盖玻片用钻屑溶液处理,以粘附连续部分。嵌入的组织被切割成超薄切片,然后转移到盖玻片上,并安装在显微镜载玻片上进行重复免疫染色。
阅读阵列抗体染色、重复洗脱和数据分析。在成像和分析之前,阵列被阻断并与荧光抗体孵育。这个过程可以重复多次,以建立单个组织样本内抗原分布的三维图像。
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所有协议均由Kristina D.Micheva提供。