抗-GFP抗体(ab13970)
主要功能和细节
GFP鸡多克隆 适用人群:WB、ICC/IF 反应:物种无关 同位素:IgY
使用重组抗体获得更好的批次间再现性
充满信心的研究——每批产品的结果一致且可重复 长期和可扩展的供应–由重组技术提供动力,实现快速生产 第一次实验的成功——通过广泛验证证实了特异性 符合道德标准–生产无动物
概述
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产品名称 -
描述 GFP鸡多克隆 -
寄主物种 鸡肉 -
特异性 我们的GFP抗体确实与来自维多利亚海蜇的许多荧光蛋白发生交叉反应。这些蛋白与最初的GFP只有几个点突变(EGFP、YFP、mVenus、CFP、BFP等)。 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 反应: 物种无关 -
免疫原 与GFP相对应的重组全长蛋白。 数据库链接: 第42212页 -
阳性对照 ICC:GFP转染NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)。 WB:转基因小鼠脊髓。
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一般注意事项 多年来,生命科学行业一直处于再现性危机之中。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 在+4°C下短期储存(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7 防腐剂:0.01%硫柳汞(硫代汞) 成分:PBS、50%甘油、0.16%磷酸钠 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 IgY分数 -
净化注意事项 无菌过滤。 -
克隆性 多克隆 -
同位素 免疫球蛋白Y -
研究领域
相关产品
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兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
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应用
目标
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关联 功能: 能量转移受体。 其作用是通过能量转移将蛋白质的蓝色化学发光转换为绿色荧光。 在体内接受钙的能量时发出荧光 2+ -激活的光蛋白绿原。
子单元结构: 单体。
组织特异性: 光细胞。
翻译后修改: 包含由修饰氨基酸残基组成的发色团。 发色团由Ser-65和Gly-67之间的自催化主链缩合以及Tyr-66氧化为二氢酪氨酸形成。 生色团的成熟只需要分子氧。
生物技术应用: 绿色荧光蛋白已被工程化以产生大量不同颜色的突变体、融合蛋白和生物传感器。 荧光蛋白及其突变的等位基因形式,蓝色、青色和黄色,已经成为制造嵌合蛋白的有用且普遍的工具,它们在嵌合蛋白中起到荧光蛋白标签的作用。 通常,它们能耐受N端和C端与多种蛋白质的融合。 它们已在大多数已知的细胞类型中表达,并在活细胞和生物体中用作非侵入性荧光标记物。 它们在细胞谱系示踪剂、基因表达报告器或蛋白质相互作用的测量方面具有广泛的应用。 也可用作分子温度计,可以精确测量流体中的温度。 测量过程依赖于使用荧光相关光谱检测GFP闪烁。
序列相似性: 属于GFP家族。
生物物理化学特性: 吸收:Abs(max)=395 nm 在470 nm处显示较小的吸收峰。 荧光发射光谱在509 nm处达到峰值,肩部在540 nm处。 -
替代名称 GFP抗体 绿色荧光蛋白抗体
图像
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所有车道: 抗-GFP抗体(ab13970),1/2000稀释(稀释液1x TBS/4小时,4°C) 车道1: 在室温下用BSA在小鼠心肌细胞全细胞裂解物中过表达3µg GFP质粒1小时 车道2: 2µg GFP质粒在小鼠心肌细胞中过度表达,在室温下用BSA/全细胞裂解1小时 3号车道: 1µg GFP质粒在含有BSA的小鼠心肌细胞全细胞裂解物中过表达,室温下1小时 每车道25µg的裂解液/蛋白质。 每条通道5%的阻断肽。 次要 所有车道: 山羊抗鸡IgY H&L(Alexa Fluor®594)预吸附( 约150176 )稀释1/5000 在还原条件下进行。 其他波段位于: 25千Da。 我们不确定这些额外波段的身份。 暴露时间: 30秒 凝胶运行条件:减少变性(15%PAGE) 检测方法:荧光二级抗体 -
用ICC/IF法对U-2OS(人骨肉瘤上皮细胞系)细胞中的GFP进行ab13970染色。 细胞被多聚甲醛固定,用0.5%的triton渗透,用2%的抗体稀释缓冲液封闭2小时。 细胞与一级抗体(1/1000)在25°C下孵育1小时。 未稀释Alexa Fluor ® 以488结合羊抗鸡多克隆为二级抗体。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-GFP抗体(ab13970) 车道1: 从HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞制备的全细胞裂解物。 车道2: 由HeLa细胞制备的全细胞裂解物。 每车道25µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: IRDye 800CW结合山羊抗鸡多克隆,1/15000稀释
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在脊髓II层选择性表达GFP的转基因小鼠。 在右侧面板中,注意绿色(兔子抗GFP)和红色信号(来自Abcam的鸡抗GFP信号)之间的对应关系,表明这两种抗体制剂识别相同的基因产物。 与ab13970一起使用的二级抗体是FITC-标记的山羊抗鸡抗体 -
ab13970染色GFP转染NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)细胞中的GFP。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Tween中的1%BSA/0.3M甘氨酸封闭细胞1小时。 然后用ab13970以1/2000稀释度在+4°C下孵育过夜,然后用山羊抗鸡IgY H&L(Alexa Fluor ® 488)预吸附层( 约150173 )1μg/ml,持续1小时。 在相同的实验条件下,与转染NIH/3T3细胞中GFP表达的基础水平相比,应用ab13970的细胞在488通道中发出更强的信号,表明ab13970与GFP结合,从而引发信号放大。 ab13970也应用于非GFP转染的NIH/3T3细胞,其未产生阳性染色,表明GFP的特异性。 核DNA用1.43μM DAPI(蓝色)标记。 -
车道1: 兔抗GFP 车道2: 抗-GFP抗体(ab13970) 所有车道: 转基因小鼠脊髓 转基因小鼠脊髓的Western blot显示,兔抗GFP(第1道)和鸡抗GFP的(Abcam;第2道)识别相同分子量的条带。 -
ab13970用ICC/IF染色小鼠肌细胞GFP+肿瘤。 细胞被甲醛固定,并在24°C下用3%牛血清白蛋白封闭1小时,然后与一抗(1/500)在24°C下孵育1小时。 Alexa Fluor公司 ® 以488只结合羊抗鸡为次要成分。 -
对转染GFP的胞浆化HEK-293细胞(胚胎肾人上皮细胞系)进行免疫细胞化学/免疫荧光分析,用ab13970标记GFP,在4°C下用1%BSA在PBS中孵育16小时。次要使用的是驴抗鸡多克隆DyLight ® 594,1/500。 GFP显示为红色(DyLight ® 594). 细胞核被复染为蓝色(DAPI)。 左侧显示转染了GFP的HEK-293细胞,右侧显示未转染的HEK-29.3细胞。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (3182)
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