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我们系统地测量了K(K)D类(抗体与其抗原之间的平衡解离常数),对840多个RabMAb抗体,即兔单克隆抗体Abcam系列,不仅评估其个体KD类值,还可以查看拉布MAb抗体。根据与已发表的小鼠单克隆抗体文献值的比较RabMAb抗体亲和力平均高1-2个数量级(图1)。
图1。K(K)D类RabMAb抗体与小鼠MAb的分布:在这个比较中,KD类88个小鼠单克隆抗体的值来源于已发表的文献。每个鼠标MAb K的单独测量值D类价值可能是使用许多不同的方法和途径开发出来的。K系列D类863株RabMAb抗体的测量值均来自Ol-RD测量项目。
K(K)D类 是平衡解离常数,k的比值远离的/k个在在抗体和抗原之间。K(K)D类与亲和力呈负相关。K系列D类该值与抗体浓度(特定实验所需的抗体量)有关,因此K值越低D类值(浓度较低),因此抗体的亲和力较高。
表1。K(K)D类和摩尔值
这些测量是与加州大学戴维斯分校物理系J.Landry和X.Zhu合作进行的。OI-RD(斜入射反射率差)结合亲和力数据的数据处理、数据分析和报告生成在加州大学戴维斯分校物理系进行了测量,并在发布前由Abcam的科学家审查了测量置信度。
阅读这种测量抗体K的新方法的详细信息D类.
特定KD类每个抗体的值和单个图都已添加到每个抗体产品页面中,以便您能够查看每个测得的抗体KD类值。
图2。K的描述D类值图表:
K(K)D类是抗体解离率(k远离的),从抗原中分离的速度,到抗体结合率(k在)抗体与抗原结合的速度。K系列D类网站上列出的值是通过测量k来确定的在 和k远离的特定抗体/抗原相互作用的速率,然后使用这些值的比率计算KD类值。
亲和力是单个分子与其配体结合的强度。它通常由平衡解离常数(K)测量和报告D类),用于评估和排序双分子相互作用的有序强度。抗体与其抗原的结合是一个可逆过程,结合反应的速率与反应物的浓度成正比。
在平衡状态下,[抗体][抗原]复合物的形成速率等于其组分[抗体]+[抗原]的解离速率。反应速率常数的测量可用于定义平衡或亲和常数(1/KD类). 简而言之,K越小D类值越大,抗体对其目标的亲和力越大。
大多数抗体都有KD类低微摩尔值(10-6)至纳摩尔(10-7到10-9)范围。高亲和力抗体通常被认为在低纳米摩尔范围内(10-9),具有非常高亲和力的抗体位于微粒体(10-12)范围。中位数KD类基于使用OI-RD测量的850多个测量值,RabMAb抗体的值约为7 x 10-11M,表明RabMAb抗体平均具有很高的亲和力。
K系列D类这些数值是使用加州大学戴维斯分校物理系詹姆斯·兰德里博士和朱向东博士开发的新型无标签检测系统进行测量的。这是一个基于微阵列的系统,与基于偏振调制斜入射反射率差(OI-RD)的无标签光学扫描仪相结合(参考文献)。
了解OI-RD方法。
使用OI-RD或Biacore仪器对六对独立的抗体-抗原对进行动力学测量。在这个实验中,抗原被两次捕获到固体载体上。通过注射四种浓度的RabMAb抗体生成结合数据。使用全局曲线拟合分析,用于拟合实验数据的模型为1比1朗缪尔。表2和图2总结了对比分析。结果表明,分析方法之间在一个数量级内具有良好的相关性。
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