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嗨,我在发送第一封电子邮件时不小心选错了表格。我写的产品是PerCP-Cy5.5 3x100ug套件,ab102911,批号:GR42604-1。(我们也尝试了其他试剂盒(PerCP),但没有取得好的结果。我尝试过的抗体都是在内部制造的,一种抗体对雪貂CD5有交叉反应,另一种抗体则对雪鼬CD4有交叉反应。这两种抗体都与各种染料(APC、FITC、PE等)结合,CD5抗体以前使用不同的方法与PerCP结合。这两种抗体都在PBS中,没有任何添加剂(没有叠氮化物)。我们正在对红细胞溶解后通过淋巴细胞梯度从全血中获得的PBMC单细胞悬浮液进行染色。存活率为95-100%,大约有20-60%的CD5细胞和10-40%的CD4细胞。我已经附上了我们所做的一些跑步的数据。我们也有一个工作共轭的例子。我们还使用了0.5μl和2μl的抗体,但没有更好的结果(只是添加的抗体越多,向右移动的次数越多)。如果你有什么建议,请告诉我。谢谢,
Abcam社区
已验证客户
2012年1月16日被问及
感谢您回复我,并确认您遇到困难的套件的正确产品代码。虽然您已经提供了一些详细信息,但如果我能获得更多信息,帮助我确定问题的根源,我将不胜感激。1) 你能确认一级抗体的浓度和用于偶联反应的蛋白质量吗?2) 了解抗体储存缓冲液的组成也很重要(缓冲液和pH值、任何BSA、防冻剂或防腐剂)?我从您的电子邮件中了解到,一级抗体已成功与其他荧光色素结合。您能否确认是否也使用了EasyLink接合套件?我期待着很快收到你的来信。
2012年1月16日答复