主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR19759]到PD-L1 适用于:Flow Cyt(Intra)、WB、IHC-P、ICC/IF、IP 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆[EPR19759]到PD-L1 -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:用100 ng/mL IFNγ处理的野生型A549( ab259377号 )48h细胞裂解液; 过表达PD-L1的中国仓鼠卵巢细胞裂解物; NCI-H1975全细胞裂解液。 IHC-P:人类扁桃体、胎盘和胃癌组织。 ICC/IF:CHO-PDL1和NCI-H1975细胞。 IP:NCI-H1975全细胞裂解液。 流式细胞仪(内部):CHO-PDL1。
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一般注意事项
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分试样。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 EPR19759 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用程序
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目标
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功能 以IL2依赖和PDCD1依赖的方式参与共刺激信号,对T细胞增殖和IL10和IFNG的产生至关重要。 与PDCD1的相互作用抑制T细胞增殖和细胞因子的产生。 -
组织特异性 在心脏、骨骼肌、胎盘和肺部高度表达。 在胸腺、脾脏、肾脏和肝脏中弱表达。 在活化的T细胞和B细胞、树突状细胞、角质形成细胞和单核细胞上表达。 -
序列相似性 属于免疫球蛋白超家族。 BTN/MOG系列。 包含1个Ig样C2型(免疫球蛋白样)结构域。 包含1个Ig样V型(免疫球蛋白样)结构域。 -
手机定位 细胞膜和内膜系统。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 B7 H抗体 B7 H1抗体 B7同源物1抗体
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图像
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人类脾组织标记PDI的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析 约243644 1.02µg/mL(B),PD-L 1,ab213524,1/100稀释度(C),CD68 约213363 稀释度为1/300(D)。 抗兔和小鼠聚合物HRP用作二级抗体,DAPI用于核反染。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行20分钟的热介导抗原检索。 热介导抗原检索(徕卡ER2,PH9.0,20分钟)用于轮间酪胺信号放大,以去除前一轮的抗体,避免任何交叉反应。 A组:抗PD1(绿色,Opal™520)、抗PD-L1(红色,Opal®570)和抗CD68(黄色,Opal■690)的合并染色。 B组:抗原刺激T细胞上的抗PD1染色。 C组:参与T细胞抑制的细胞上的抗PD-L1染色 D组:巨噬细胞上的抗CD68染色。 切片在三轮染色中孵育:按 约243644 , 约213363 和ab213524在室温下保持30分钟。 每一轮之后都有一个单独的荧光酪胺信号放大系统。 免疫染色在带有Opal™4色试剂盒的Leica Biosystems BOND®RX仪器上进行。 使用徕卡SP8共焦显微镜进行图像采集。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗PD-L1抗体[EPR19759](ab213524) 车道1: 用100 ng/ml干扰素γ处理野生型A549( ab259377号 )48小时细胞裂解物 2号和6号车道: 用100 ng/ml干扰素γ治疗CD274敲除物A549( ab259377号 )48小时的细胞裂解物 3号车道: U-87 MG细胞裂解物 车道4: MCF7细胞裂解物 车道5: 野生型A549未经处理的细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 33千帕 观察到的频带大小: 50千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-6车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在50 kDa下观察到ab213524。 红色负载控制, 约8245 在37kDa下观察到。 在western blot中,ab213524重组抗PD-L1抗体[EPR19759]在用100 ng/mL IFNγ处理48 h细胞的野生型A549中显示出与PD-L1特异性反应。 在处理和未处理的敲除细胞系中均观察到信号丢失 约267054 (经处理和未经处理的敲除细胞裂解物 约256831 )使用。 对野生型和PD-L1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab213524和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别以1000分之一和20000分之一的稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
抗PD-L1抗体[EPR19759](ab213524) 人类扁桃体组织标记PD-L1的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,用ab213524稀释1:250。 使用AR9抗原回收液进行热介导抗原回收,并在20%功率下微波处理15分钟。 使用抗狂犬病/小鼠HRP聚合物(PerkinElmer Opal polymer HRP Ms Plus Rb)作为二级抗体。 使用蛋白石520荧光团进行蛋白石酪胺扩增。 DAPI染色反染色。 使用Vectra 3.0扫描图像,并通过Phenochart软件进行分析。 这张图片是由佐治亚州癌症中心的Houssein Abdul Sater博士礼貌地提供的。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100透性CHO(中国仓鼠卵巢细胞系)细胞的免疫荧光分析,在1/100稀释度下用ab213524标记PD-L1,然后用山羊抗Rabbit IgG(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共聚焦图像显示CHO-PDL1细胞的膜和细胞质染色。 核复染剂是DAPI(蓝色)。 用抗阿尔法Tubulin小鼠单克隆抗体检测Tubulin( 约7291 )稀释1/1000,然后使用山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )稀释度为1/1000的二级抗体(红色)。 阴性对照如下:- -ve对照1:ab213524(1/100稀释),然后是山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )二级抗体的稀释度为1/1000。 -ve对照2:抗α-微管蛋白小鼠MAb( 约7291 )稀释1/1000,然后使用山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )二级抗体的稀释度为1/1000。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗PD-L1抗体[EPR19759](ab213524) 车道1: 用100 ng/mL IFNγ处理野生型A549 48 h细胞裂解物 车道2: CD274敲除物A549用100 ng/mL IFNγ处理48 h细胞裂解物 3号车道: U-87 MG细胞裂解物 车道4: MCF7细胞裂解物 车道5: 野生型A549未经处理的细胞裂解物 车道6: CD274敲除A549未经处理的细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 33千帕 观察到的频带大小: 50千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-6车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在50kDa下观察到ab213524。 红色负载控制, 约8245 在37 kDa时观察到。 在western blot中,ab213524重组抗PD-L1抗体[EPR19759]在用100 ng/mL IFNγ处理48 h细胞的野生型A549中显示出与PD-L1特异性反应。 当处理和未处理的敲除细胞系都出现信号丢失 约267055 (经处理和未经处理的敲除细胞裂解物 约256866 )使用。 对野生型和PD-L1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab213524和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别以1000分之一和20000分之一的稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗PD-L1抗体[EPR19759](ab213524) 车道1: H1975(人非小细胞肺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: NCI-H1299(人肺癌上皮细胞)全细胞裂解物 3号车道: A549(人肺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道4: MDA-MB-231(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道5: MCF7(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道6: SK-BR-3(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 7号车道: SW480(人大肠腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 第8车道: HCT 116(人结直肠癌上皮细胞)全细胞裂解物 9号车道: PC-3(人前列腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 10号车道: DU 145(人前列腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 11号车道: A375(人恶性黑色素瘤上皮细胞)全细胞裂解物 12号车道: MeWo(人恶性黑色素瘤成纤维细胞)全细胞裂解物 13号车道: U-87 MG(人胶质母细胞瘤-星形细胞瘤上皮细胞)全细胞裂解物 车道14: Huh7(人肝癌上皮细胞)全细胞裂解物 15号车道: HepG2(人肝癌上皮细胞)全细胞裂解物 16号车道: BXPC-3(人胰腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 17号车道: PANC-1(人胰腺上皮样癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道18: NIH:OVCAR-3(人卵巢腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 19号车道: SK-OV-3(人卵巢癌上皮细胞)全细胞裂解物 20号车道: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/20000稀释 使用ECL技术开发。 预测的带宽大小: 33千帕 观察到的频带大小: 40-60千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 180秒 PD-L1在肿瘤细胞系中的表达差异很大 阻隔缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
所有车道: 0.5µg/ml的抗PD-L1抗体[EPR19759](ab213524) 车道1: 未经处理的A549(人肺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: 100ng/mlγ干扰素处理A549(人肺癌上皮细胞)48小时全细胞裂解物 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 33千帕 暴露时间: 3秒 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
CHO-PD-L1(红色)和CHO-S(蓝色)细胞的细胞内流式细胞术分析,在1/500处用ab213524标记PD-L1。 细胞用4%多聚甲醛固定,用0.1%吐温-20-PBS渗透,用10%山羊血清封闭。 Alexa Fluor公司 ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/2000)作为二级抗体。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100透性NCI-H1975(人肺非小细胞癌细胞系)细胞的免疫荧光分析,在1/100稀释度下用ab213524标记PD-L1,然后用山羊抗Rabbit IgG(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共聚焦图像显示NCI-H1975细胞膜和细胞质染色较弱。 核复染剂是DAPI(蓝色)。 用抗阿尔法Tubulin小鼠单克隆抗体检测Tubulin( 约7291 )稀释1/1000,然后使用山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )稀释度为1/1000的二级抗体(红色)。 阴性对照如下:- -ve对照1:ab213524(1/100稀释),然后是山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )二级抗体的稀释度为1/1000。 -ve对照2:抗α-微管蛋白小鼠MAb( 约7291 )稀释1/1000,然后用山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )二级抗体的稀释度为1/1000。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗PD-L1抗体[EPR19759](ab213524) 车道1: 中国仓鼠卵巢细胞裂解物 车道2: 中国仓鼠卵巢细胞裂解物过度表达PD-L1 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 33千帕 观察到的频带大小: 40-60千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3秒 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 下带预计为亚型2。 -
1/1000稀释的抗PD-L1抗体[EPR19759](ab213524)+NCI-H1975(人非小细胞肺癌细胞系)全细胞裂解液(10µg) 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 33千帕 观察到的频带大小: 40-60千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3分钟 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 观察到的表达谱/分子量与文献中描述的一致(PMID:26546452)。 -
免疫组织化学分析中使用“ab213524”对“抗-PD-L1抗体[EPR19759]”进行组织芯片染色。此表提供了阳性(勾号)和阴性(十字号)的详细概述 每个测试样品类型的染色。 在开始IHC染色方案之前,对切片进行热介导抗原回收。 切片在+4°C下与ab213524孵育过夜。 二级抗体是兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB( 约209101 ).
数据表和文件
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合格证书
工具书类 (74)
太阳L 等。 PD-L1通过对TGF-β受体I和II选择性的不同机制促进肝星状细胞的肌纤维母细胞活化。 单元格代表 38:110349 (2022). 公共医学:35139382 蔡C 等。 肿瘤免疫浸润相关snoRNAs(TIIsno)的鉴定,通过TIIsno评分模型预测结肠癌患者的预后和免疫状况。 EBioMedicine公司 76:103866 (2022). 公共医学:35144219 曹毅 等。 HIV感染与非HIV感染患者结直肠癌中淋巴细胞浸润及PD-1和PD-L1的表达:一项倾向评分匹配队列研究。 前Oncol 12:827596 (2022). 公共医学:35311077 王X 等。 肿瘤微环境中细胞衰老的综合评估。 生物信息简介 23:不适用(2022年)。 公共医学:35419596 张X 等。 lncRNA MIAT靶向miR-411-5p/STAT3/PD-L1轴介导肝癌免疫反应。 国际实验病理学杂志 103:102-111 (2022). 公共医学:35429078