主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔P4HB单克隆抗体[EPR9499] 适用于:流式细胞周期(内部)、WB、IHC-P、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔P4HB单克隆抗体[EPR9499] -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 人P4HB aa 450内的合成肽至C末端(C末端)。 确切的顺序是专有的。 -
阳性对照 WB:HeLa、HepG2、293T、Raw264.7、PC-12和A431细胞裂解物。 ICC/IF:HeLa、A-431、MCF7、A549和U2OS细胞 IHC-P:人类乳腺癌、人脑、人肾、小鼠肝和大鼠肝组织。 流式细胞周期(内部):HepG2和HeLa细胞。
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一般注意事项
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油、0.05%BSA、59%PBS -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 EPR9499系列 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
阳性对照
应用
目标
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功能 这种多功能蛋白质催化二硫键的形成、断裂和重排。 在细胞表面,似乎起着还原酶的作用,分解附着在细胞上的蛋白质的二硫键。 因此可能会导致面部外蛋白的结构改变。 在细胞内,似乎形成/重排新生蛋白质的二硫键。 在高浓度下,作为伴侣发挥作用,抑制错误折叠蛋白质的聚集。 低浓度时,促进聚集(抗伴侣活性)。 可能与其他伴侣参与激素生物发生中TG前体的结构修饰。 还充当各种酶的结构亚单位,如脯氨酰4-羟化酶和微粒体三酰甘油转移蛋白MTTP。 -
序列相似性 属于蛋白质二硫键异构酶家族。 包含2个硫氧还蛋白结构域。 -
手机定位 内质网腔。 褪黑激素组。 细胞膜。 非常丰富。 在某些细胞类型中,似乎也被分泌或与质膜相关,在质膜中,它从细胞内来源不断脱落和替换(可能)。 位于淋巴细胞表面CD4富集区附近。 通过质谱鉴定第一阶段至第四阶段的黑素体组分。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 5034 人类 Entrez基因: 18453 鼠标 Entrez基因: 25506 老鼠 Omim公司: 176790 人类 瑞士保护: P07237号 人类 瑞士保护: P09103号 鼠标 瑞士保护: P04785号 老鼠 尤尼金: 464336 人类
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替代名称 细胞甲状腺激素结合蛋白抗体 细胞甲状腺激素结合蛋白抗体 胶原蛋白脯氨酰4羟化酶β抗体
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图像
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所有车道: 稀释1/1000的抗-P4HB抗体[EPR9499](ab137110) 车道1: HeLa细胞裂解物 车道2: HepG2细胞裂解物 3号车道: 野生型A431细胞裂解物 车道4: P4HB敲除A431细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 57千帕 观察到的频带大小: 60千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗-P4HB抗体[EPR9499]在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab137110显示与P4HB特异结合。 在野生型HeLa细胞裂解液中在60 kDa处观察到一条带,在P4HB敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约261887 (敲除细胞裂解物 约261696 ). 为了生成此图像,分析了野生型和P4HB敲除HeLa细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
ab137110染色野生型A431细胞中的P4HB(顶部面板)和P4HB敲除A431细胞(底部面板)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用1µg/ml的ab137110培养细胞过夜 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 488),以1/1000稀释度预吸附(显示为绿色),以及 ab150120型 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以假彩色红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
人肾癌组织标记P4HB的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,使用稀释度为1/1000的纯化ab137110。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
ab137110染色U2OS细胞中的P4HB。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用ab137110以0.2µg/ml和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 488),以1/1000稀释度预吸附(显示为绿色),以及 ab150120型 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以假彩色红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
ab137110染色A549细胞中的P4HB。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用ab137110以0.2µg/ml和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 488),以1/1000稀释度预吸附(显示为绿色),以及 ab150120型 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以假彩色红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
ab137110染色HeLa细胞中的P4HB。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用ab137110以0.2µg/ml和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 488),以1/1000稀释度预吸附(显示为绿色),以及 ab150120型 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以假彩色红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
ab137110染色MCF7细胞中的P4HB。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用1µg/ml的ab137110培养细胞过夜 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 488),以1/1000稀释度预吸附(显示为绿色),以及 ab150120型 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以假彩色红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
所有车道: 1/10000稀释(纯化)的抗-P4HB抗体[EPR9499](ab137110) 车道1: HepG2全细胞裂解物 车道2: HeLa全细胞裂解物 3号车道: HEK293全细胞裂解物 每条泳道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 57千帕 观察到的频带大小: 57千帕 阻隔和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
所有车道: 1/10000稀释(纯化)的抗-P4HB抗体[EPR9499](ab137110) 车道1: Raw264.7全细胞裂解液 车道2: PC-12全细胞裂解物 每条泳道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 57千帕 观察到的频带大小: 57千帕 阻隔和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析小鼠肝组织用稀释1/1000的纯化ab137110标记P4HB。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析大鼠肝组织用稀释1/1000的纯化ab137110标记P4HB。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
用纯化的ab137110在1/300(红色)稀释度下标记P4HB的HeLa细胞的细胞内流式细胞术分析。 细胞用4%多聚甲醛固定。 Alexa Fluor公司 ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/500)作为二级抗体。 黑色-同种型对照,兔单克隆IgG。 蓝色-未标记对照,细胞未与初级和次级抗体孵育。 -
所有车道: 1/1000稀释(未净化)的抗-P4HB抗体[EPR9499](ab137110) 车道1: HepG2细胞裂解物 车道2: HeLa细胞裂解物 3号车道: 293T细胞裂解物 车道4: A431细胞裂解物 每条泳道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 1/2000稀释的HRP偶联山羊抗兔IgG 使用ECL技术开发。 预测的带宽大小: 57千帕 -
所有车道: 1/2000稀释(未净化)的抗-P4HB抗体[EPR9499](ab137110) 车道1: 小鼠脑组织裂解物 车道2: 小鼠心脏组织裂解物 3号车道: 小鼠肾组织裂解物 车道4: 小鼠脾组织裂解物 预测的带宽大小: 57千帕 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析用稀释1/100的未纯化ab137110标记人乳腺癌组织P4HB。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
用稀释1/100的未纯化ab137110对人脑组织标记P4HB进行免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
重叠直方图显示HepG2细胞用未纯化的ab137110染色(红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(未纯化的ab137110,1/1000稀释)孵育30分钟。 使用的二级抗体是山羊抗兔Alexa Fluor ® 488(IgG H&L)( 约150077 )在22°C下以1/2000稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(0.1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 该抗体在用4%多聚甲醛(10分钟)固定/用0.1%PBS-Tween渗透20分钟的HepG2细胞中发出阳性信号。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (14)
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