主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 Rad21-ChIP级兔单克隆抗体[EPR22506-15] 适用于:Flow Cyt(Intra)、WB、IHC-P、ICC/IF、ChIP、IP 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 Rad21-ChIP级兔单克隆抗体[EPR22506-15] -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:人心脏和胎儿肾脏组织裂解物。 大鼠大脑、小鼠大脑和心脏组织裂解物。 HeLa、MCF7、Raw264.7、NIH/3T3和C6细胞裂解物。 IHC-P:人类乳腺癌、胃、小鼠胃和大鼠结肠组织。 ICC/IF:HeLa和NIH/3T3细胞。 流量:HeLa和NIH/3T3细胞。 IP:HeLa全细胞裂解物。
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一般注意事项
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%牛血清白蛋白 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 EPR22506-15 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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目标
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功能 凝集素复合体的可分裂成分,参与细胞周期中的染色体凝聚力、DNA修复和凋亡。 凝集素复合体是DNA复制后姐妹染色单体的凝聚力所必需的。 黏连蛋白复合体显然形成了一个大的蛋白质环,姐妹染色单体可以被困在其中。 在中期-后期转换时,该蛋白被separase/ESPL1裂解并与染色质分离,从而使姐妹染色单体分离。 凝集素复合体也可能在有丝分裂期间的纺锤体极组装中发挥作用。 在细胞凋亡的早期阶段,通过caspase-3/CASP3或caspase-7/CASP7对其进行切割,也在细胞凋亡中发挥作用:C末端64kDa切割产物可能作为核信号,启动参与细胞凋亡途径的细胞质事件。 -
序列相似性 属于rad21家族。 -
域 C端部分与SMC1A的头部相关联,而N端部分则与SMC3的头部相绑定。 -
翻译后 修改 在后期开始时被separase/ESPL1裂解。 在细胞凋亡开始时被胱天蛋白酶-3和胱天蛋白酶-7切割。 ESPL1和caspase-3的裂解发生在不同的位点。 磷酸化; 在细胞周期的M期变得过度磷酸化。 在前期,凝集素从染色体臂上大量分离,部分原因可能是其被PLK磷酸化。 -
手机定位 核心。 染色体。 染色体>着丝粒。 与染色质相关。 在前期之前,它沿着染色体臂散布。 在前期,大多数凝集素复合物可能由于PLK的磷酸化作用而从染色质中分离出来,但在着丝粒处,凝集素复合体仍然存在。 在后期,它被separase/ESPL1裂解,导致复合体与染色体分离,从而使染色体分离。 一旦被caspase-3裂解,C末端64kDa裂解产物就会转移到细胞质中,在那里它可能会触发细胞凋亡。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 CDLS4抗体 双链断裂修复蛋白rad21同源抗体 hHR21抗体
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图像
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根据Abcam X-ChIP方案从MCF7细胞制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25µg染色质、5µg ab217678(红色)和20µl蛋白A/g sepharose珠进行ChIP。 将5μg兔正常IgG添加到珠子对照(灰色)中。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(sybr green方法)定量。 引物和探针位于转录区的第一kb。 观察到的Rad21结合富集曲线与文献中描述的一致(PMID:23145106) -
所有车道: 抗Rad21抗体[EPR22506-15]-ChIP等级(ab217678),稀释度为1/1000 车道1: RAW264.7(小鼠Abelson小鼠白血病病毒诱导的肿瘤巨噬细胞),全细胞裂解物 车道2: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 3号车道: C6(大鼠胶质瘤胶质细胞),全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 72千帕 观察到的频带大小: 130-75千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 全长Rad21约为130kDa,劈开Rad21约75 kDa。 观察到的分子量与文献中描述的一致(PMID:12417729,PMID:21876002)。 曝光时间:7.7秒 封闭/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
所有车道: 抗Rad21抗体[EPR22506-15]-ChIP等级(ab217678),稀释度为1/1000 车道1: 大鼠脑组织裂解物 车道2: 小鼠脑组织裂解物 3号车道: 小鼠心脏组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 72千帕 观察到的频带大小: 130-75千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 全长Rad21约为130kDa,劈开Rad21约75 kDa。 观察到的分子量与文献中描述的一致(PMID:12417729,PMID:21876002)。 阻塞/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 曝光时间:3分钟。 -
所有车道: 1/1000稀释的抗-Rad21抗体[EPR22506-15]-ChIP等级(ab217678) 车道1: 人心脏组织裂解物 车道2: 人胎肾组织裂解物 3号车道: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞),全细胞裂解物 车道4: MCF7(人乳腺癌上皮细胞),全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 1-2车道: IP检测试剂VeriBlot(HRP)( 阿布131366 )稀释度为1/1000 车道3-4: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 72千帕 观察到的频带大小: 130-75千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 全长Rad21约为130 kDa,劈开Rad21约75 kDa。 观察到的分子量与文献中描述的一致(PMID:12417729,PMID:21876002)。 封闭/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 暴露时间: 1-2车道:37秒 3号车道:5.5秒 4号车道:48秒 -
从0.35mg HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解液中用ab217678以1/30的稀释度免疫沉淀Rad21。 使用ab217678在1/1000稀释度下对免疫沉淀进行Western blot。 用于IP二级抗体(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )以1/5000稀释度作为二级抗体。 车道1: HeLa全细胞裂解液10µg(输入) 车道2: ab217678在HeLa全细胞裂解物中的IP。 3号车道: 兔单克隆IgG( 约172730 )而不是HeLa全细胞裂解液中的ab217678。 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:3秒。 如文献(PMID:28854249)所述,车道2中75kDa以下的微弱带可能是Rad21解理产物。 -
用ab217678在1/500稀释度(红色)下对4%副甲醛固定NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)细胞系标记Rad21进行细胞内流式细胞术分析,并与兔单克隆IgG进行比较( 约172730 ,黑色)同种型对照和未标记对照(未与第一抗体和第二抗体孵育的细胞)(蓝色)。 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)以1/2000稀释度作为二级抗体。 -
用ab217678在1/500稀释度(红色)下对4%副甲醛固定HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞系标记Rad21进行细胞内流式细胞术分析,并与兔单克隆IgG进行比较( 约172730 ,黑色)同型对照和未标记对照(未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞)(蓝色)。 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)以1/2000稀释度作为二级抗体。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)细胞的免疫荧光分析,在1/100稀释度下用ab217678标记Rad21,然后用AlexaFluor ® 488羊抗兔二级抗体( 约150077 )稀释度为1/1000(绿色)。 共聚焦成像显示NIH/3T3细胞系细胞核染色。 nuvlear计数器标记为DAPI(蓝色)。 使用Ab195889抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor)对管蛋白进行复染 ® 594),稀释度为1/200。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体为AlexaFluor ® 488山羊抗兔次级( 约150077 )稀释度为1/1000。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞的免疫荧光分析,在1/100稀释度下用ab217678标记Rad21,然后用AlexaFluor标记 ® 488羊抗兔二级抗体( 约150077 )稀释度为1/1000(绿色)。 共聚焦图像显示HeLa细胞系的核染色。 nuvlear计数器标记为DAPI(蓝色)。 使用Ab195889抗α-微管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor®594)在1/200稀释度下对微管蛋白进行复染。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体为AlexaFluor ® 488山羊抗兔次级( 约150077 )稀释度为1/1000。
协议
数据表和文件
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合格证书
工具书类 (2)
甘·W 等。 凝集素亚单位在食管癌中的预测价值和潜在调控网络。 J癌症 13:1588-1602 (2022). 公共医学:35371307 刘S 等。 Hi-TrAC揭示了转录因子在组织染色质环中的分工。 国家公社 13:6679 (2022). 公共医学:36335136