主要功能和细节
分析类型:定量 检测方法:比色法 平台:缩微板阅读器 分析时间:2小时 样品类型:细胞裂解液、血清、组织裂解液、尿液
概述
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产品名称 -
检测方法 比色法 -
样品类型 尿液、血清、细胞裂解液、组织裂解液 -
分析类型 定量 -
范围 400毫微米- 2000毫微米 -
检测时间 2小时 00米 -
产品概述 NAD/NADH分析试剂盒(比色法)ab65348为NAD的定量提供了一种方便而灵敏的工具 + 以及NADH,并测量它们在哺乳动物和其他物种样品中的比例。
试剂盒中的NAD循环酶混合物在酶循环反应中专门作用于NADH/NAD,从而显著提高灵敏度和特异性。 没有从样品中纯化NADH/NAD的要求。
两种NADt的水平(总NAD + NADH)和NADH易于测量; NAD水平 + 可以通过从NADt中减去NADH来轻松计算。 通过450 nm处的吸光度读取分析结果。
NAD/NADH分析方案概要: -用提取缓冲液从细胞/组织中提取样品并用旋转柱脱蛋白 -对于NADH测量,将样品加热到60ºC 30分钟以分解NAD + ,在冰上冷却(测量总NAD不需要此步骤 + /NADH) -将样品和标准品添加到井中 -添加反应混合物并在室温下培养5分钟,以将NAD转化为NADH -在反应循环期间,添加NADH显影剂并孵育1-4小时 -在1-4小时孵育过程中多次使用微孔板阅读器进行分析 -用停止溶液可以停止反应。 -
笔记 该产品由Abcam公司BioVision制造,之前称为K337 NAD/NADH定量比色试剂盒。 K337-100与ab65348的100测试尺寸相同。 该试验专门检测NAD和NADH,但不检测NADP和NADPH。 如果您想使用荧光读数,请参考NAD/NADH分析试剂盒(荧光测定)( 约176723 ). NAD/NADH检测试剂盒 约221821年 使用另一种分析方法,该方法依赖于从样品中纯化NAD和NADH,并且在某些样品中可能更敏感。 查看我们的 代谢分析指南 了解代谢产物、代谢酶、线粒体功能和氧化应激的检测,以及如何使用平板阅读器检测活细胞的代谢功能。 其他研究人员如何使用NAD/NADH检测试剂盒ab65348 该NAD/NADH分析试剂盒已在各种样品类型的出版物中使用,包括: -人:原代血单个核细胞 1 ,上皮性卵巢癌细胞 2 、Jurkat细胞 三 -小鼠:细胞培养裂解物 4 ,心肌细胞培养裂解物 5 ,肝脏 6 、肝脏和肌肉 7 ,原代肝细胞培养 8 ,主动脉组织 9 -大鼠:脑组织 10 -蝗虫:胸肌 11 细菌:Z mobilis 12 ,大肠杆菌 13 参考文献:1-Castro-Marrero J等人2015; 2-Zhu J等人2019年,Xia H等人2015年; 3-Miller TW等人,2015年; 4-Mekala NK等人2019年,Ling S等人2017年; 5-Zhang D等人2019年; 6-Shao D等人2017年,Mukherji A等人2015年,Yu JH等人2016年; 7-Karandrea S等人2017年; 8-Traboulsi H等人2014; 9-Liu Y等人2016年; 10-Rao G等人2016年; 11-Ding D等人2018; 12-Wu B等人2019年; 13-Long YM等人2017 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 -
站台 缩微板阅读器
属性
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储存说明 储存于-20°C。 请参阅协议。 -
组件 100次测试 2000次测试 循环缓冲器I 1 x 15毫升 20 x 15毫升 NAD循环酶混合物 1小瓶 20瓶 开发人员解决方案II 1小瓶 20瓶 NADH标准II 1小瓶 20瓶 提取缓冲液II 1 x 50毫升 20 x 50毫升 停止解决方案II 1 x 1.2毫升 20 x 1.2毫升 -
研究领域 -
关联 NAD(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)是代谢氧化还原反应中的辅酶,是多种细胞信号分子的前体,也是蛋白质翻译后修饰的底物。 NAD是一种二核苷酸,由两个通过磷酸基团连接的核苷酸组成:一个核苷酸含有腺苷环,另一个含有烟酰胺。 在新陈代谢中,NAD参与氧化还原反应,将电子从一个反应传递到另一个反应。 因此,在细胞中辅酶有两种形式:NAD是一种氧化剂,它接受其他分子的电子并被还原,形成NADH,然后NADH可用作还原剂来释放电子。 这些电子转移反应是NAD的主要功能。 然而,它也用于其他细胞过程,最显著的是酶的底物,在翻译后修饰中从蛋白质中添加或删除化学基团。
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图像
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比目鱼肌NADH/NAD+比值用ab65348测定。 p? 使用独立t检验比较(+)HFD和LFD、(*)HFD+TQ和HFD以及(#)LFD和LFD+TQ时为0.05。 结果为平均值±SEM(每组8-10只小鼠)。 LFD:低脂饮食,HFD:高脂饮食,TQ:胸腺醌。 -
在K562 ME2敲除细胞中测量NAD/NADH(pLKO-空载体;shME2-2和shME2-3-两个选定的敲除克隆)。 数据表示为平均值±:SD,n=3。 NAD/NADH比率按照产品协议中的描述进行计算。 任志刚等提供的图像; PLOS one,2010年; 5(9):e12520(DOI:10.1371/journal.pone.0012520) -
NAD和NADH(tNAD)或单独的NADH测量的细胞裂解物。 将5e6细胞溶解在1mL中,旋转过滤,并进行纯或1/5(重复+/-SD)测试。 -
减去背景信号的标准曲线(重复;+/-SD)。 -
NADH标准校准曲线。 根据产品协议并使用试剂盒中提供的NADH标准对NAD(菱形)和NADH(方形)进行定量。 在该反应中未检测到NADP(三角形)。 标准曲线范围:20-100 pmol。
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (245)
郭C 等。 短暂低血糖导致HIF-1α蓄积可能加重糖尿病眼病。 单元格代表 42:111976(2023年)。 公共医学:36640318 Hunt连卡佛和Demontis F 与年龄相关的骨骼肌乳酸脱氢酶活性增加会缩短果蝇的寿命。 老年医学杂志 77:259-267 (2022). 公共医学:34477202 桑切斯·罗曼一世 等。 DNA修复和脑代谢的分子标记与百岁老人的认知相关。 古生物学 44:103-125(2022)。 公共医学:34966960 苏亚雷斯-里韦罗JM 等。 在线粒体疾病细胞模型中,翼状胬肉与线粒体辅因子联合改善线粒体功能。 前沿药理学 13:862085 (2022). 公共医学:35370630 李F 等。 肠道微生物代谢物烟酰胺n-氧化物通过激活小胶质细胞的有丝分裂来预防单纯疱疹病毒性脑炎。 肠道微生物 14:2096989 (2022). 公共医学:35793266