主要功能和细节
兔多克隆到mTOR 适用于:ICC/IF、IP、WB 反应对象:大鼠、人 同种型:IgG
使用重组抗体获得更好的批间重现性
充满信心的研究——每批产品的结果一致且可重复 长期和可扩展的供应–由重组技术提供动力,实现快速生产 第一次实验的成功——通过广泛验证证实了特异性 符合道德标准–生产无动物
概述
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产品名称 -
描述 兔多克隆到mTOR -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 大鼠,人类 预计用于: 鼠标 -
免疫原 -
阳性对照 ICC/IF:HepG2细胞。 L6肌管。 IP:HeLa裂解物。 WB:HeLa、HEK-293T、Jurkat HepG2和LNCaP全细胞裂解物。
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一般注意事项 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
属性
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表格 液体 -
存储说明 在4°C下装运。 交付后,将等分样品保存在-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7 防腐剂:0.1%叠氮化钠 成分:0.021%PBS、1.764%柠檬酸钠、1.815%Tris -
正在加载浓度信息。。。 -
净化注意事项 使用固定在固体载体上的免疫肽纯化亲和力。 -
克隆性 多克隆 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
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兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
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应用
目标
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功能 mTORC1和mTORC2的激酶亚单位,根据营养和激素信号调节细胞生长和存活。 mTORC1在生长因子或氨基酸的作用下被激活。 生长因子刺激的mTORC1活化涉及AKT1介导的TSC1-TSC2磷酸化,从而激活RHEB GTPase,该酶能有效激活mTORC2的蛋白激酶活性。 mTORC1的氨基酸噬菌体需要通过Ragulator复合物和Rag GTPases介导的溶酶体重新定位。 活化的mTORC1通过磷酸化mRNA翻译和核糖体合成的关键调节因子上调蛋白质合成。 mTORC1磷酸化EIF4EBP1并释放其以抑制伸长起始因子4E(eiF4E)。 mTORC1磷酸化并激活“Thr-421”处的S6K1,然后通过磷酸化PDCD4并将其靶向降解来促进蛋白质合成。 磷酸化MAF1导致其RNA聚合酶III抑制功能减弱。 mTORC2也被生长激活。 因素,但似乎对营养不敏感。 mTORC2可能通过激活一个或多个Rho型鸟嘌呤核苷酸交换因子,在Rho GTPases上游发挥作用,调节肌动蛋白细胞骨架。 mTORC2促进血清诱导的应激纤维或F-肌动蛋白的形成。 mTORC2在AKT1‘Ser-473’磷酸化中起关键作用,这可能促进PDK1对‘Thr-308’上AKT1激活环的磷酸化,这是完全激活的先决条件。 mTORC2调节“Ser-422”处SGK1的磷酸化。 mTORC2还调节“Ser-657”上PRKCA的磷酸化。 -
组织特异性 在许多组织中表达,在睾丸中表达水平最高。 -
序列相似性 属于PI3/PI4-激酶家族。 包含1个FAT域。 包含1个FATC域。 包含7次HEAT重复。 包含1个PI3K/PI4K域。 -
翻译后 修改 自身磷酸化; 当mTORC1或mTORC2的一部分时。 -
手机定位 内质网膜。 高尔基体膜。 线粒体外膜。 溶酶体。 细胞质。 细胞核>PML体。 在细胞质和细胞核之间穿梭。 在核内积累以应对缺氧(根据相似性)。 针对溶酶体取决于氨基酸的可用性以及RRAGA和RRAGB。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 2475 人类 Entrez基因: 56717 鼠标 Entrez基因: 56718 老鼠 Omim公司: 601231 人类 瑞士保护银行: 第42345页 人类 瑞士保护银行: Q9JLN9号 鼠标 瑞士保护银行: 第42346页 老鼠 尤尼金: 338207 人类
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替代名称 dJ576K7.1(FK506结合蛋白12雷帕霉素相关蛋白1)抗体 FK506结合蛋白12雷帕霉素相关蛋白1抗体 FK506结合蛋白12雷帕霉素相关蛋白2抗体
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图像
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所有车道: 1/2000稀释度的抗-mTOR抗体(ab2732) 车道1: 野生型A549细胞裂解物 车道2: MTOR[homo]CRISPR-Cas9编辑的A549细胞裂解物 3号车道: HepG2细胞裂解物 车道4: HEK-293细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 289千帕 观察到的频带大小: 250千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:稀释1/2000的抗-mTOR抗体染色,以绿色显示; 鼠抗CANX[CANX/1543]( ab238078型 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab2732显示与mTOR特异结合。 在野生型A549细胞裂解液中观察到250 kDa的条带,在MTOR CRISPR-Cas9编辑的细胞系中未观察到该大小的信号 ab283257号 。在CRISPR-Cas9编辑的低于250 kDa的裂解液通道中观察到的带可能代表mTOR的截断形式。 这还没有进一步研究,基因产物的功能特性也没有确定。 为了生成该图像,分析了野生型和MTOR CRISPR-Cas9编辑的A549细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
所有车道: 0.1µg/ml时的抗-mTOR抗体(ab2732) 车道1: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: HEK-293T(大T抗原转化胚胎肾人上皮细胞系)全细胞裂解物 3号车道: Jurkat(外周血T细胞白血病细胞系)全细胞裂解物 车道4: HepG2(人肝癌细胞系)全细胞裂解物 车道5: LNCaP(人前列腺癌细胞系)全细胞裂解物 每车道50µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 289千帕 暴露时间: 3分钟 使用NETN裂解缓冲液制备的裂解液。 -
ab2732染色的HepG2细胞的ICC/IF图像。 细胞被100%甲醇固定(5分钟),然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中孵育1小时,以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。 然后将细胞与抗体(ab2732,1µg/ml)在+4°C下孵育过夜。 二级抗体(绿色)为Alexa Fluor®488山羊抗兔IgG(H+L),以1/1000稀释度使用1h。 Alexa Fluor®594 WGA用于在1/200稀释度下标记质膜(红色)1小时。 采用DAPI对浓度为1.43µM的细胞核(蓝色)进行染色。 -
ab2732在L6肌管中以1:100稀释的共焦染色mTOR(红色),以及核抗原抗体(绿色)。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (331)
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