主要功能和细节
一次性90分钟协议 灵敏度:9.1 pg/ml 范围:46.88 pg/ml-3000 pg/ml 样品类型:细胞培养上清液、Cit血浆、EDTA血浆、Hep血浆、血清 检测方法:比色法 分析类型:三明治(定量) 反应对象:鼠标
概述
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产品名称 -
检测方法 比色法 -
精密度 批内分析 样品 n个 平均值 标准偏差 变异系数% 总体 8 6.7% 内部通话 样品 n个 平均值 标准偏差 变异系数% 总体 3 9.8% -
样品类型 细胞培养上清液、血清、Hep血浆、EDTA血浆、Cit血浆 -
分析类型 三明治(定量) -
敏感 9.1微微克/毫升 -
范围 46.88微微克/毫升- 3000微微克/毫升 -
恢复 样品特定回收率 样品类型 平均% 范围 血清 97 85% - 115% 细胞培养基 111 109% - 115% Hep血浆 92 85% - 103% EDTA血浆 99 98% - 101% Cit血浆 87 85% - 88% -
化验时间 1小时 3000万 -
检测持续时间 一步分析法 -
物种反应性 与以下物质反应: 鼠标 -
产品概述 小鼠TNF-αELISA试剂盒(ab208348)是一种单洗90分钟夹心ELISA试剂,用于定量测定细胞培养上清液、血清、cit血浆、edta血浆和hep血浆中的TNF-β蛋白。 它使用我们专有的SimpleStep ELISA®技术。 以9.1 pg/ml的灵敏度定量小鼠TNFα。
SimpleStep ELISA®技术使用与亲和标签结合的捕获抗体,亲和标签被用于覆盖SimpleStepELISA®板的单克隆抗体识别。 这种夹心ELISA方法允许在一个步骤中形成抗体分析夹心复合物,显著缩短了分析时间。 有关更多详细信息,请参阅图像部分中的SimpleStep ELISA®协议摘要。 我们的SimpleStep ELISA®技术具有以下优点:
-单次刷洗方案将分析时间缩短至90分钟或更短 -高级抗体的高灵敏度、特异性和再现性 -在生物样品中充分验证 -96块钢板可分解成12 x 8个井带
384孔单步ELISA®微孔板( 约203359 )可作为SimpleStep ELISA®试剂盒提供的96-well微孔板的替代品使用。
检测特异性
该试剂盒仅识别血清、血浆和细胞培养上清液样本中的天然和重组小鼠TNFα蛋白。
交叉反应性
以100 ng/mL制备重组小鼠TNF RI、TNF RII、OPG、CD40受体、IL1β、IL-16和IL-5,并分析交叉反应性。 未观察到交叉反应。
以100 ng/mL、25 ng/mL和3 ng/mL制备重组人TNF-α,并测定交叉反应性。 平均而言,观察到3.0%的交叉反应性,标准偏差为0.7%。
干扰
以100 ng/mL的浓度制备重组小鼠TNF RI、TNF RII、OPG、CD40受体、IL1β、IL-16和IL-5以及重组人TNFα,并进行干扰测试。 未观察到对的干扰。
物种反应性
该试剂盒可识别小鼠TNF-α蛋白。
校准
该免疫分析是根据高度纯化的小鼠TNF-α进行校准的。 NIBSC/WHO未分类纯化小鼠TNFα制剂88/532在该试剂盒中进行了评估。
未分类标准88/532的剂量反应曲线与SimpleStep标准曲线平行。 要将使用SimpleStep鼠标TNFα试剂盒获得的样本值转换为近似NIBSC 88/532单位,请使用以下等式。
NIBSC(88/532)近似值(单位/mL)=2.0 x单步小鼠TNFα值(pg/mL)
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笔记 肿瘤坏死因子(TNF-α)是一种与TNFRSF1A/TNFR1和TNFRSF1/TNFBR结合的细胞因子。此外,TNF-β是TNF超家族的配体,在炎症、凋亡、增殖、侵袭、血管生成、转移和形态发生中起着重要作用。 它主要由巨噬细胞分泌,可诱导某些肿瘤细胞系的细胞死亡。 大鼠和人TNF-α与小鼠TNF-alpha分别为95%和79%。 TNF-α以26kDa跨膜蛋白的形式在巨噬细胞、内皮细胞、上皮细胞和肿瘤细胞上表达。 TNF-α通过蛋白水解过程分裂为六条链:(1)TNF膜形式,(2)细胞内结构域1(ICD1),(3)细胞内区域2(ICD2)、(4)C域1、(5)C域2和(6)TNF可溶性形式。ICD1和ICD2释放到胞浆中,而C域1和C域2释放到细胞外空间。 此外,丝氨酸残基磷酸化的是膜形式,而不是可溶性形式。 膜形式的去磷酸化通过与可溶性TNFRSF1A/TNFR1结合发生。 TNF-α发出的信号因启动信号事件的配体类型(细胞内、膜或可溶性)而异。 例如,TNF-α的膜形式似乎介导抗肿瘤治疗反应,而可溶性配体与炎症和增殖有关。 同样,TNF胞内结构域(ICD)形式诱导树突状细胞产生IL-12。 -
站台 预涂层微孔板(12 x 8孔板条)
属性
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储存说明 储存于+4°C。 请参阅协议。 -
组件 1 x 96测试 1 x 96测试 10X小鼠TNFα捕获抗体 1 x 600微升 1 x 600微升 10X小鼠TNFα检测抗体 1 x 600微升 1 x 600微升 10X清洗缓冲液PT(ab206977) 1 x 20毫升 1 x 20毫升 抗体稀释液CPI2 1 x 6毫升 1 x 6毫升 小鼠TNF-α冻干重组蛋白 2瓶 2瓶 平板密封件 1台 1台 样品稀释剂NBS 1 x 20毫升 1 x 20毫升 样品稀释剂NS(ab193972) 1 x 50毫升 1 x 50毫升 单步预涂96孔微孔板(ab206978) 1台 1台 停止解决方案 1 x 12毫升 1 x 12毫升 TMB开发解决方案 1 x 12毫升 1 x 12毫升 -
研究领域 -
功能 与TNFRSF1A/TNFR1和TNFRSF1B/TNFBR结合的细胞因子。主要由巨噬细胞分泌,可诱导某些肿瘤细胞系的细胞死亡。 它是一种通过直接作用或刺激白细胞介素-1分泌而引起发热的强效热原,与恶病质的诱导有关。在某些条件下,它可以刺激细胞增殖和诱导细胞分化。 -
参与疾病 TNF的遗传变异是银屑病关节炎(PSORAS)易感性的一个原因[MIM:607507]。 PSORAS是一种与银屑病相关的炎症性、血清阴性关节炎。 这是一种异质性疾病,从轻微的非破坏性疾病到严重的进行性侵蚀性关节病。 银屑病关节炎有五种类型:以手指或脚趾小关节为主的不对称性少关节炎; 涉及四肢关节的不对称性关节炎; 对称性多关节炎,其特征是类似风湿病的模式,可累及手、手腕、脚踝和脚; 多发性关节炎,这是一种罕见但变形和破坏性的疾病; 骶髂关节和脊柱关节炎(银屑病性脊柱炎)。 -
序列相似性 属于肿瘤坏死因子家族。 -
翻译后 修改 可溶性形式来源于通过蛋白水解过程形成的膜形式。 膜形式,而不是可溶性形式,在丝氨酸残基上磷酸化。 膜形式的去磷酸化通过与可溶性TNFRSF1A/TNFR1结合发生。 O-糖基化; 聚糖包含半乳糖、N-乙酰半乳糖胺和N-乙酰神经氨酸。 -
手机定位 分泌膜和细胞膜。 -
UniProt提供的信息 -
替代名称 APC1接口 APC1蛋白 缓存凝集素
查看所有内容 -
数据库链接
相关产品
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替代版本 -
相关产品
图像
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绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
按说明制备TNFα标准曲线。 原始数据值显示在表中。 绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
按说明制备TNFα标准曲线。 原始数据值显示在表中。 绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
按说明制备TNFα标准曲线。 原始数据值显示在表中。 绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
根据TNF-α标准曲线插值并校正样品稀释度,重复测量TNF-β浓度。 未稀释样品如下:血浆(柠檬酸盐)100%、血浆(EDTA)100%和血浆(肝素)100%。 绘制插值稀释因子校正值(平均值+/-SD,n=2)。 血浆(柠檬酸盐)、血浆(EDTA)和血浆(肝素)中的平均TNF-α浓度分别为1.68 ng/mL、1.81 ng/mL和1.47 ng/mL。 -
根据TNF-α标准曲线插值并校正样品稀释度,重复测量TNF-β浓度。 未稀释样品如下:血清100%,细胞培养100%,RAW 264.7 LPS刺激细胞培养上清液50%。 绘制插值稀释因子校正值(平均值+/-SD,n=2)。 血清中TNFα的平均浓度为1.63 ng/mL,细胞培养中为1.00 ng/mL和RAW 264.7 LPS刺激的细胞培养上清液中为6.07 ng/mL。 -
根据TNF-α标准曲线插值并校正样品稀释度,重复测量TNF-β浓度。 未稀释的样品如下:RAW 264.7 LPS刺激的上清液50%和RAW 264.7 LPS未刺激的上清液50%。 绘制插值稀释因子校正值(平均值+/-SD,n=2)。 RAW 264.7 LPS刺激上清中的平均TNFα浓度为6346.4 pg/mL,RAW 2647-LPS未刺激上清的平均TNF-α浓度为83.7 pg/mL。 RAW 264.7细胞在含有100μg/mL卡那霉素和2 mM L-谷氨酰胺的HGDMEM中培养。 细胞饥饿24小时,并在有无5μg/mL LPS的条件下处理。 -
计算出的最小可检测剂量(MDD)是通过计算零标准复制品的平均值并添加2个标准偏差,然后外推相应的浓度来确定的。 MDD取决于使用的样品稀释液缓冲液。 -
SimpleStep ELISA技术允许在一个步骤中形成抗体-抗原复合物,将检测时间缩短至90分钟。 将样品或标准品和抗体混合物一次性添加到微孔中,培养、清洗并添加最终基质。 有关详细的分步指南,请参阅协议。
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (177)
汉XD 等。 人牙周韧带干细胞来源的细胞外囊泡对牙周炎患者巨噬细胞焦下垂和牙周炎症损伤的影响。 细胞组织器官 211:57-72 (2022). 公共医学:34525477 李斯(Li S) 等。 CD155/TIGIT信号通过NF-κB通路调节结直肠癌肿瘤浸润CD8+T细胞的效应器功能。 胃肠肝素杂志 37:154-163 (2022). 公共医学:34734434 肖赫 等。 CircRNAPTK2通过与miR-29b-3p和BAK1竞争性结合促进脓毒症小鼠心肌细胞凋亡。 国际过敏免疫学 183:552-565(2022年)。 公共医学:34915498 白Y 等。 镁合金对钛牙种植体的抗菌和抗氧化作用。 计算数学方法医学 2022:6537676 (2022). 公共医学:35035523 刘杰 等。 Toll样受体2介导的炎症诱导家族性高血压合并高脂血症及其机制的研究。 J Healthc工程 2022:1473597 (2022). 公共医学:35035808