主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆抗体[MJFF2(c41-2)]到LRRK2 适用于:ICC/IF、WB、IP 敲除已验证 反应对象:老鼠、人类
相关偶联物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体[MJFF2(c41-2)]到LRRK2 -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠,人类 预计用于: 老鼠 -
免疫原 人类LRRK2 aa 950内的重组片段到达C末端。 确切的顺序是专有的。 数据库链接: Q5S007问题 -
阳性对照 WB:A549和MEF细胞裂解物; 用LRRK2细胞裂解物转染HEK293细胞。 ICC/IF:神经-2a细胞。 IHC-P:1岁Rgs6-/-小鼠的SNc; 小鼠脑组织 IP:小鼠大脑皮层,A549。
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一般注意事项 高效检测和纯化LRRK2蛋白的特征抗体是帕金森病(PD)研究界的关键需求。 为了帮助加速LRRK2的研究,迈克尔·J·福克斯基金会(MJFF)与Abcam合作,产生了独特且高质量的LRRK2兔单克隆抗体,可广泛用于PD研究社区。 LRRK2(富含亮氨酸重复激酶2,达达林)是一种属于ROCO家族的蛋白激酶,由ROC(复杂蛋白的Ras/GTPase)结构域和COR(ROC的C末端)区域的存在定义。 LRRK2具有激酶活性,因此可以进行自磷酸化并磷酸化一般底物。 此外,LRRK2的GTPase结构域可以调节GDP(鸟苷-5′-二磷酸)/GTP(鸟苷5′-三磷酸)结合以及GTP水解。 LRRK2在大量帕金森病(PD)患者中突变。 该基因突变占PD的4%,在1%的散发性PD患者中观察到。 携带LRRK2 PD相关突变的患者的临床症状与典型散发性PD无明显区别。与LRRK1相对应的PARK8(8型)的神经病理学特征谱很广,似乎包括与其他家族性PD病例相关的特征,如PARK1(α-突触核蛋白)和PARK2(帕金)。 该基因突变患者具有典型的晚发性帕金森综合征,其特征与特发性PD相当; 症状包括不对称静止性震颤、运动迟缓、僵硬,以及对3,4-二羟基-l-苯丙氨酸(l-DOPA)反应良好。 LRRK2突变病例的病理是多形性的。 有关使用该LRRK2抗体的更多表征数据和方案,请参考Davies等人2013。 生物化学J 453(1):101-113[PMID:23560750] Abcam推荐的次级方案-山羊抗兔HRP( 约205718 )和山羊抗兔Alexa Fluor®488( 约150077 ). 或者搜索我们广泛的二级抗体用于您的实验。 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高敏感性和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
有关更多信息 看这里 。 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉布MAb ® 专利 。 这种抗体是在迈克尔·J·福克斯基金会的支持下开发的。
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.5%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 MJFF2(c41-2) -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
相关产品
应用
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目标
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功能 通过钙依赖性激活CaMKK/AMPK信号通路,积极调节自噬。 这一过程涉及烟酸腺嘌呤二核苷酸磷酸(NAADP)受体的激活、溶酶体pH值的增加以及溶酶体中钙的释放。 与RAB29一起,在溶酶体和高尔基体之间以逆转录依赖的方式循环蛋白质(如甘露糖6磷酸受体(M6PR))的逆行运输途径中发挥作用。 调节完整中枢神经系统(CNS)中的神经元过程形态。 在突触小泡运输中起作用。 磷酸化物PRDX3。 具有GTPase活性。 可能在帕金森病中枢蛋白的磷酸化中发挥作用。 -
组织特异性 在大脑中表达。 表达于视皮层所有皮质层的锥体神经元、黑质致密部和尾状壳核的神经元(蛋白质水平)。 在成人大脑中表达,但水平低于心脏和肝脏。 也表达于胎盘、肺、骨骼肌、肾脏和胰腺。 在大脑中,表达于小脑、大脑皮层、髓质、脊髓枕极、额叶、颞叶和壳核。 在大脑多巴胺感受区的表达尤其高。 -
参与疾病 帕金森病8 -
序列相似性 属于蛋白激酶超家族。 TKL Ser/Thr蛋白激酶家族。 包含12个LRR(富含亮氨酸)重复序列。 包含1个蛋白激酶结构域。 包含1个Roc域。 包含7个WD重复。 -
域 七叶WD重复区对突触囊泡运输至关重要,并介导与多个囊泡相关突触前蛋白的相互作用。 Roc结构域介导同源二聚并调节激酶活性。 -
翻译后 修改 自动磷酸化。 -
手机定位 膜。 细胞质。 核周体。 线粒体。 高尔基器械。 细胞投射,轴突。 细胞投射,树突。 内质网。 细胞质小泡,分泌小泡,突触小泡膜。 内皮细胞。 溶酶体。 线粒体外膜。 线粒体内膜。 线粒体基质。主要与胞质内囊泡和膜结构相关(通过相似性)。 定位于细胞质,与细胞膜结构相关。 主要与线粒体的线粒体外膜相关。与RAB29沿着高尔基体的管状结构染色。 定位于神经元胞周、树突和轴突的胞质内点状结构。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 类风湿性关节炎17抗体增强 AURA17抗体 Dardarin抗体
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图像
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BPA对未经WT或G2019S LRRK2转导或转导的SH-SY5Y-DRD1细胞多巴胺处理后DRD1胞内和胞外水平的评估 (C和D)DRD1在基础条件(C)和多巴胺处理SH-SY5Y-DRD1细胞15分钟(D)时的定位。 激动剂处理后,将细胞固定,并分别与不同的一级抗体(针对DRD1和ab133474的抗FLAG)和针对DRD2或LRRK2的Alexa647-结合二级抗体(红色)或Alexa488-结合二次抗体(绿色)孵育。 比例尺=10μm。 -
车道1: 野生型A549全细胞裂解物(20µg) 车道2: 野生型MEF全细胞裂解物(20µg) 3号车道: LRRK2敲除物A549全细胞裂解物(20µg) 车道4: LRRK2敲除MEF全细胞裂解液(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在286 kDa下观察到ab133474。 红色-装载控制, 约18058 ,在130 kDa下观察到。 ab133474能够识别野生型A549和MEF细胞中的LRRK2以及其他交叉反应带。 而LRRK2敲除细胞中未发现信号。 对野生型和LRRK2基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab133474和 约18058 (小鼠抗Vinculin负荷对照)分别在4°C、10000和1/10000稀释度下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 野生型和LRRK2敲除MEF和A549细胞是由MRC蛋白质磷酸化和泛素化单位(邓迪大学)Dario Alessi教授慷慨赠送的。 -
免疫沉淀法验证LRRK2和ArfGAP1的相互作用 体内 LRRK2与野生型小鼠脑提取物中的ArfGAP1相互作用,该脑提取物来源于野生型小鼠,用ab133474(一种LRRK2-特异性单克隆抗体(MJFF-2/c41-2)进行免疫沉淀,而ArfGAP2在LRRK1基因敲除小鼠的提取物中没有免疫沉淀 通过在TNE缓冲液(10mM Tris-HCL pH 7.4、150mM NaCl、5mM EDTA、0.5%NP-40、1×磷酸酶抑制剂混合物1和2,1×完全迷你蛋白酶抑制剂混合物)中均质化,从成年野生型和LRRK2敲除小鼠的大脑皮层(靶向缺失LRRK2基因的外显子41)制备蛋白质提取物。 通过BCA测定法测定蛋白质浓度。 将脑提取物(10 mg蛋白质)与50µl蛋白G-Dynabeads结合,预先与兔抗LRRK2抗体(5µG;MJFF2/c41-2;Abcam,Inc.)、兔抗ArfGAP1抗体(3µG)或兔IgG抗体孵育,然后在4°C下孵育过夜。 用TNE缓冲液和TBS缓冲液(10 mM Tris-HCL pH 7.4,150 mM NaCl)依次洗涤两次镝配合物。 免疫沉淀物在70°C下加热10 min洗脱,通过SDS-PAGE进行分离,并进行Western blot分析。 -
所有车道: 1/10000稀释的抗-LRRK2抗体[MJFF2(c41-2)](ab133474) 车道1: 转染3*Flag载体的HEK293细胞裂解物 车道2: 转染3*Flag全长野生型LRRK2的HEK293细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP标记山羊抗兔抗体(稀释度为1/2000) 预测的带宽大小: 286千Da
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (106)
乔·E 等。 14-3-3γ单倍体不足导致小鼠多巴胺途径改变和帕金森病样运动失调。 臼齿脑 16:2 (2023). 公共医学:36604743 纳巴尔NR 等。 LRRK2是CD38介导的NAADP-Ca2+信号传导和免疫细胞中TFEB(转录因子EB)下游激活所必需的。 自噬 18:204-222 (2022). 公共医学:34313548 平移ZN 等。 LRRK2调节小鼠卵母细胞减数分裂过程中肌动蛋白装配的纺锤体迁移和线粒体功能。 分子细胞生物学杂志 14:无(2022)。 公共医学:34918122 刘Z 等。 含α-突触核蛋白的红细胞胞外小泡:帕金森病单核细胞过度激活的重要因素。 J神经炎症 19:53 (2022). 公共医学:35193594 Stormo AED公司 等。 E3连接酶TRIM1泛素化LRRK2并控制其定位、降解和毒性。 J细胞生物学 221:不适用(2022年)。 公共医学:35266954