主要功能和细节
兔LC3B-自噬体标记多克隆 适用人群:ICC/IF、IHC-P、WB 反应对象:小鼠、大鼠、人类 同种型:IgG
使用重组抗体获得更好的批间重现性
充满信心的研究——每批产品的结果一致且可重复 长期和可扩展的供应–由重组技术提供动力,实现快速生产 第一次实验的成功——通过广泛验证证实了特异性 符合道德标准–生产无动物
概述
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产品名称 -
描述 兔LC3B-自噬体标记多克隆 -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠、老鼠、人 预计用于: 奶牛 -
免疫原 对应于人LC3B的合成肽(N末端)。 一种合成肽,由人类LC3蛋白序列的N末端部分制成(残基1-100之间)。 数据库链接: 问题9GZQ8 -
阳性对照 WB:HeLa、NIH/3T3细胞。 ICC/IF:HeLa细胞; 大鼠肝细胞。 IHC-P:小鼠脑组织。
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一般注意事项 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
属性
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表格 液体 -
存储说明 在4°C下装运。 交付后,将等分样品保存在-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 免疫原亲和力纯化 -
克隆性 多克隆 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
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应用
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目标
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功能 可能与自噬体空泡(自噬小体)的形成有关。 -
组织特异性 最丰富的是心脏、大脑、骨骼肌和睾丸。 在肝脏中观察到少量表达。 -
序列相似性 属于MAP1 LC3家族。 -
翻译后 修改 前体分子被APG4B/ATG4B裂解形成LC3-I。这被APG7L/ATG7激活,转移到ATG3并结合到磷脂形成LC3-II。 -
手机定位 细胞质>细胞骨架。 内膜系统。 细胞质小泡>自噬体膜。 LC3-II与自噬膜结合。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 408001 奶牛 Entrez基因: 81631 人类 Entrez基因: 67443 鼠标 Entrez基因: 64862 老鼠 Omim公司: 609604 人类 瑞士保护银行: O41515号 奶牛 瑞士保护银行: 问题9GZQ8 人类 瑞士保护银行: Q9CQV6系列 鼠标
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替代名称 ATG8F抗体 自噬相关蛋白LC3 B抗体 自噬相关泛素样修饰物LC3 B抗体
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图像
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所有车道: 0.5µg/ml时的抗-LC3B抗体-自噬体标记物(ab48394) 车道1: 野生型HepG2未经处理的对照细胞裂解物 车道2: 野生型HepG2处理的氯喹(50 uM,16 h)细胞裂解物 3号车道: MAP1LC3B敲除HepG2未经处理的对照细胞裂解物 车道4: MAP1LC3B敲除HepG2处理的氯喹(50 uM,16 h)细胞裂解物 车道5: U-87 MG细胞裂解物 车道6: PC-12细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 14.16千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:0.5 ug/ml时抗-LC3B抗体-吞噬体标记染色,以绿色显示; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab48394显示与LC3B特异性结合。 在处理过的野生型HepG2细胞裂解液中,在16/14 kDa处观察到一条带(黄色箭头),在MAP1LC3B敲除细胞系中未观察到该大小的信号 ab277828号 (敲除细胞裂解物 约283796 ). 为了生成此图像,分析了野生型和MAP1LC3B敲除HepG2细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
瘦肉和肥胖小鼠(A;HFD或B组8周;HFD组16周)下丘脑弓状核LC3(绿色)免疫染色。 DAPI(蓝色)用于核染色。 小鼠被斩首后,大脑被切除。 每个SNC固定在4%多聚甲醛中,每个下丘脑进行石蜡包埋并切片为5.0μm的切片。 将样品与一级抗体和与FITC或罗丹明结合的二级抗体孵育2小时(分别为sc2777和sc2092;加州圣克鲁斯的圣克鲁斯生物技术公司)。 DAPI染色用于核染色,而徕卡FW 4500 B显微镜捕获图像。 根据小鼠脑图谱中的地标观察下丘脑区域。 使用Leica Application Suite V3.6(瑞士)对结果进行分析和记录。 -
Western Blot显示HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞系和LC3B敲除HeLa细胞系(KO)未经处理(-)或用50μM氯喹处理(+)18小时的裂解物。 用0.5 ug/mL ab48394检测PVDF膜,然后用HRP-结合的抗狂犬病IgG二级抗体进行检测。 在亲代HeLa细胞系中约15 kDa(如图所示)处检测到LC3B的特异带,但在敲除HeLa的细胞系中未检测到。 GAPDH显示为一个加载控件。 本实验是在还原条件下进行的。 -
HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞(野生型,左侧;LC3B敲除HeLa,右侧)在ICC/IF中以0.3μg/ml的ab48394(红色)对LC3B进行染色。在室温下培养一级抗体3小时,然后培养NorthernLights™557-结合的抗Rabbit IgG二级抗体。 DAPI(蓝色)复染。 在浸没固定氯喹处理的Hela细胞(左)中检测到LC3,但在LC3敲除的Hela电池(右)中未检测到。 -
PD 13卵巢初级卵泡中的LC3B免疫荧光。 红点代表LC3b,DAPI(蓝色)表示细胞核。 为了进行免疫荧光分析,将卵巢固定在4%多聚甲醛中,包埋在石蜡中,并切片为5μm的切片。 抗原回收后,用山羊血清封闭载玻片,并在4°C下与一级抗体(兔抗LC3B,1:200)孵育过夜。 Alexa Fluor 594(Invitrogen)用作免疫荧光检测中的二级抗体。 -
免疫组织化学分析中,使用ab48394在1/200稀释度下对福尔马林固定、石蜡包埋的小鼠脑组织进行LC3B染色。 用HRP结合二级抗体和DAB试剂检测LC3的特异性信号,并用苏木精对细胞核进行复染。 这种LC3抗体在胶质细胞中产生了低到中等水平的细胞质染色。 神经元胞浆中LC3呈中度至强染色。 -
Western blot显示未经氯喹处理(-)或处理(+)的小鼠NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)和大鼠PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系)细胞系的裂解物。 用0.5 ug/mL兔抗LC3B多克隆抗体(ab48394)探测PVDF膜,然后用1:2000稀释的山羊抗兔IgG二级抗体进行检测。 -
ab48394通过ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)染色大鼠肝细胞中的LC3B。 细胞用甲醛固定,用0.2%Triton X-100在PBS中渗透,并用1%驴血清在0.1%PBST中在21℃下封闭60分钟。 样品与一级抗体(1/50在PBS+1%BSA中)在22°C下孵育3小时。 Alexa Fluor公司 ® 394-共轭驴抗兔IgG多克隆用作二级抗体,稀释度为1/200。 -
所有车道: 抗-LC3B抗体-吞噬体标记物(ab48394),稀释1/2000 车道1: 大鼠全组织裂解物-正常肝脏 车道2: 大鼠全组织裂解物-用AEE788以50 mg/kg处理肝脏,每周3次,持续1周 3号车道: 大鼠全组织裂解物-肝脏用RAD每日2.5 mg/kg治疗1周 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab6721号 )稀释1/5000 使用ECL技术开发。 在非还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 1分钟
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (625)
罗斯亚努F 等。 NDR1/2激酶的缺失会损害内膜运输和自噬,导致神经退化。 生命科学联盟 6:不适用(2023年)。 公共医学:36446521 祖德G 等。 PACSIN2作为自噬和巯基嘌呤细胞毒性的调节剂:淋巴和肠细胞的机制。 生命科学联盟 6:不适用(2023年)。 公共医学:36596605 太阳J 等。 生长分化因子11通过抑制自噬加速肝脏衰老。 老化细胞 21:e13532(2022)。 公共医学:34905649 伟X 等。 黄芪甲苷IV对高血糖诱导雪旺细胞有丝分裂的调节作用。 基于Evid的补体Alternat Med 2022:7864308 (2022). 公共医学:35069769 Ma C公司 等。 泛素化AIF是低氧诱导线粒体功能障碍和肺动脉平滑肌细胞增殖的主要介质。 细胞生物学 12:9 (2022). 公共医学:35090552