抗核纤层蛋白B1抗体-核包膜标记物(AB16048)

敲除兔多克隆层粘连蛋白B1抗体。在WB、IHC、ICC/IF中进行验证,并在小鼠、大鼠、人、猪、非洲爪蟾、印度麂中进行检测。在442个出版物中引用。

简介

  • 产品名称

    抗核纤层蛋白B1抗体-核包膜标志物
    见LAMI1 B1一级抗体
  • 描述

    LAM-B1多克隆基因-核包膜标记物
  • 寄主种

    兔子
  • 测试应用

    适用于:ICC/IF免疫复合物受体世界银行IHC-PIHC更多细节
  • 物种反应性

    与之反应:鼠、鼠、人、猪、爪蟾、印度麂
    预计工作:Zebrafish鸡
  • 免疫原

    与小鼠LAMB1 AA 400-500(内部序列)结合的锁孔血蓝蛋白的合成肽。
    肽可用AB16375

  • 阳性对照

    • 该抗体在以下全细胞裂解物中呈阳性信号:HeLa。该抗体在随后的甲醇固定细胞系中呈阳性信号:HeLa。该抗体在以下FFPE组织中呈阳性信号:人正常肝。
  • 一般注释

    核纤层蛋白B1和Lamin B抗体是非常有用的核负荷控制用于核提取物。当使用LAMIN B1抗体作为核负荷对照时,应注意在凋亡细胞中,层粘连蛋白B1被切割(Kottke TJ等人)。如果核膜被抽出,LAMIN B1也将被从核预备物中去除。这种抗体被设计成核装载控制,然而它尚未在合适的裂解物中进行测试。

性能

应用

我们的保证担保覆盖使用AB16048在以下测试应用中。

应用注意事项包括推荐的起始稀释液;最佳稀释/浓度应由最终用户确定。

应用 退让 笔记
ICC/IF 使用浓度为0.1~1μg/ml。
免疫复合物受体 使用依赖于测定的浓度。
世界银行 使用浓度为0.1μg/ml的检测约68 kDa的带(预测分子量:66 kDa)。

我们推荐山羊抗兔IgG H&L(染料)®预吸附(AB21673).

IHC-P 使用0.1~1μg/ml的浓度,在开始使用IHC染色方案之前进行热介导的抗原检索。
IHC 使用依赖于测定的浓度。PubMed:25368174

目标

  • 功能

    层粘连蛋白是核层的组成部分,位于核膜的核质侧上的纤维层,被认为是提供核包膜的框架,也可能与染色质相互作用。
  • 疾病参与

    LMNB1的缺陷是白质营养不良脱髓鞘常染色体显性遗传成人发病(ADLD)的原因[MIM:169500 ]。ADLD是一种进展缓慢且致命的脱髓鞘性白质营养不良,表现在生命的第四或第五个十年。临床特征为早期自主神经异常,锥体和小脑功能障碍,中枢神经系统对称脱髓鞘。它不同于多发性硬化症和其他脱髓鞘疾病,神经病理学显示在少部分脱髓鞘和缺乏星形胶质细胞增生的情况下少突胶质细胞的保存。
  • 序列相似性

    属于中间丝家族。
  • 翻译后的
    修改

    B型层粘连蛋白经过一系列修饰,如法尼酯化和磷酸化。膜蛋白磷酸化的增加发生在包膜崩解之前,并且可能在调节层粘连蛋白的作用中起作用。
  • 细胞定位

    细胞核内膜。
  • UniProt信息
  • 数据库链接

  • 替代名称

    • ADLD抗体
    • 层粘连蛋白B1抗体
    • LAM-B1抗体
    • LMN抗体
    • LMN2抗体
    • LMNB抗体
    • LMNB1抗体
    • LMNB1-人抗体
    • MGC111419抗体
    • OtRAMP000 000 099218抗体
    查看全部

图像

  • 第1巷:野生型HAP1全细胞裂解液(20μg)
    第2巷:空巷
    第3巷:KO-HAP1 LMNB1全细胞裂解液(20μg)
    第4巷:空巷
    1 - 4车道:合并信号(红色和绿色)。绿色-AB16048观察到70 kDa。红色负载控制,AB8245,观察到37 kDa。

    在野生型HAP1细胞中,AB16048与LMNB1(LAMB1)特异性反应。当LMNB1(LAMB1)敲除样品被使用时没有观察到带。AB16048 LMNB1(LAMB1)及AB8245(小鼠抗GAPDH负荷控制)在4℃下每隔0.1μg和1/10000稀释分别孵育一周。印迹被开发出来山羊抗兔IgG H&L(铱®800 CW)预吸附(AB21673)山羊抗小鼠IgG H&L(Ir染料®第六百八十)预吸附(AB21677)二次抗体在室温下稀释1/10000小时,成像前1小时。

  • 人和小鼠细胞用AB16048染色(1/500)。将细胞固定在4%μ甲醛、0.2% TrM M x100℃下,室温下浸泡10分钟,然后在PBS中洗涤3X。

    答:HeLa细胞+AB16048(绿色)
    B:HeLa细胞与DAPI(蓝色)复染
    C:3T3细胞+AB16048(绿色)
    D3: 3细胞用DAPI(蓝色)染色

  • 在正常人肝福尔马林固定石蜡包埋组织切片中的LIB B1染色IHC图像,使用标准的协议F在徕卡邦德系统上进行,该切片用热介导的抗原检索用柠檬酸钠缓冲液(PH6,表位检索溶液1)预处理20分钟。然后将该切片与AB16048、1μg/ml孵育,在室温下15分钟,并用HRP偶联的紧凑聚合物系统检测。使用DAB作为显色剂。然后切片用苏木精复染,并安装DPX。

    对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原检索条件,一级抗体浓度和抗体孵育时间。

    *由人类研究组织库获得的组织,由NIHR剑桥生物医学研究中心支持

  • 第1巷野生型HAP1核裂解物(10μg)
    第2巷LAMB1基因敲除HAP1核裂解物(10μg)

    1和2车道:绿色信号从目标-AB16048观察到68 kDa。来自负载控制的红色信号AB10799观察到18 kDa。

    在野生型HAP1细胞中,AB16048与LAMB1特异性反应。未观察到带被敲除样品。野生型和层粘连蛋白B1敲除样品进行SDS-PAGE。AB16048和AB10799(组蛋白H3在0.1μg/ml的负载控制)均在4℃孵育过夜。山羊抗兔IgG H&L(铱®800 CW)预吸附(AB21673)山羊抗小鼠IgG H&L(Ir染料®第六百八十)预吸附(AB21677)二次抗体在室温下稀释1/10000小时,在成像前1小时。

  • 所有车道:抗LAMB1抗体-核信封标记(AB16048)1/1000稀释度

    第1巷:Hela全细胞裂解液
    第2巷:Hela全细胞裂解液小鼠层粘连蛋白B1肽AB16375)1μg/ml

    裂解物/蛋白质,每车道20盎司。

    次要的
    所有车道:Alexa Furor山羊多克隆兔IgG 1/10000稀释

    在还原条件下进行。

    预测波段大小:66 kDa
    观察波段大小:68~70 kDa为什么实际频带大小与预测不同?

  • Ac16/48的ICA16048染色人HeLa细胞图像。将细胞固定于甲醇(5分钟),并在室温下与抗体(AB16048,1μg/ml)孵育1h。第二抗体(Green)为Alexa Furor®488山羊抗兔IgG(H+L),稀释1/1000小时,对其进行成像。TMFX信号增强器被用作主要阻断剂,5% BSA(在TBS- T)被用于所有其他阻断步骤。DAPI用于染色细胞核(蓝色)。Alexa For For®594 WGA被用来标记质膜(红色)。

  • 抗LAMB1抗体-核信封标记(AB16048)在1/1000稀释+胰腺细胞系- 20℃下的全细胞裂解物

    次要的
    HRP结合山羊抗兔抗体1/2000稀释

    采用ECL技术开发。

    在还原条件下进行。

    预测波段大小:66 kDa
    观察波段大小:68 kDa为什么实际频带大小与预测不同?


    曝光时间:30秒

    见复审

  • AB16048免疫组化法(IHC-P-多聚甲醛固定,石蜡包埋切片)染色人纤维瘤病组织切片中的层粘连蛋白B1。用甲醛固定组织,室温下用1% FBS/BSA封闭3小时,在TrpH9中通过热中介进行抗原修复。样品与原代抗体(1/100在TBS + 1% BSA + 1% FBS)孵育16小时。用未稀释的HRP结合山羊抗兔IgG多克隆作为第二抗体。

    见复审

  • APC16048通过ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)染色猪PAE细胞中的层粘连蛋白B1。用甲醛固定细胞,室温下用3%的血清封闭1小时。样品与原代抗体(1/100在PBS+ 1%牛血清白蛋白)孵育1小时。阿列克萨氟®488的驴抗兔IgG多克隆(1/500)作为第二抗体。

    见复审

  • 所有车道:抗LAMB1抗体-核信封标记(AB16048)1/1000稀释度

    所有车道:猪PAE全细胞裂解液

    裂解物/蛋白质,每车道50盎司。

    次要的
    所有车道:HRP结合山羊抗兔IgG多克隆1/2000稀释

    采用ECL技术开发。

    在还原条件下进行。

    预测波段大小:66 kDa
    观察波段大小:65 kDa为什么实际频带大小与预测不同?


    曝光时间:三分钟

    见复审

  • 人和小鼠细胞用AB16048染色(1/500)。在20℃下将细胞固定在100%甲醇中6分钟,然后在PBS中冲洗一次。

    答:HeLa细胞+AB16048(绿色)
    B:HeLa细胞与DAPI(蓝色)复染
    C:3T3细胞+AB16048(绿色)
    D3: 3细胞用DAPI(蓝色)染色

    γ

推荐信

该产品已被引用:

参见本产品的所有538个出版物

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-属于96评论

应用
蛋白质印迹法
样品
大鼠组织裂解液-核(比目鱼肌)
凝胶运行条件
约化Non Denaturing(本土化)(10)
装载量
10μg
规格
比目鱼肌
阻塞步骤
12小时(s)和0分钟(s)·浓度的无堵塞步骤:1/1000 g/ml·温度:4°C

伊娜·帕拉莫诺娃

核实客户

2019 9月26日提交

应用
蛋白质印迹法
样品
小鼠细胞裂解液-全细胞(原代巨噬细胞)
凝胶运行条件
变性变性(10)
装载量
30μg
规格
原代巨噬细胞
阻塞步骤
牛奶为1小时(S)和0分钟(S)·浓度的封闭剂:10%℃:温度25℃

用户社区

核实客户

2019 8月26日提交

应用
蛋白质印迹法
样品
人细胞裂解液-全细胞(黑色素瘤)
凝胶运行条件
变性变性(10%)
装载量
10μg
规格
黑色素瘤
阻塞步骤
牛奶作为30分钟(s)·浓度的封闭剂:5%℃:25℃

用户社区

核实客户

2019 6月26日提交

应用
蛋白质印迹法
样品
小鼠细胞裂解液-全细胞(脾原巨噬细胞)
凝胶运行条件
变性变性(10%)
装载量
45μg
规格
脾原巨噬细胞
阻塞步骤
BSA作为1小时(S)和0分钟(S)·浓度的阻滞剂:5%℃:温度25℃

用户社区

核实客户

2019 6月20日提交

应用
免疫细胞化学/免疫荧光
样品
人细胞(人黑色素瘤)
透化作用
是- 0.2% Triton X100
规格
人黑色素瘤
阻塞步骤
BSA作为1小时(S)和0分钟(S)·浓度的阻滞剂:1%℃:温度25℃
固定剂
多聚甲醛

用户社区

核实客户

2019 4月30日提交

应用
蛋白质印迹法
样品
小鼠细胞裂解液-核(MEF)
凝胶运行条件
变性变性(12)
装载量
10μg
规格
MEF
阻塞步骤
牛奶作为30分钟(s)·浓度的封闭剂:5%℃:25℃

用户社区

核实客户

提交09一月2019

应用
蛋白质印迹法
样品
人类组织裂解液-核(B细胞)
凝胶运行条件
约化Denaturing(4-20%)
装载量
30μg
规格
B细胞
阻塞步骤
牛奶为1小时(S)和0分钟(S)·浓度的封闭剂:5%℃:温度25℃

用户社区

核实客户

2018 12月18日提交

应用
免疫细胞化学/免疫荧光
样品
人细胞(HeLa细胞)
透化作用
是- Triton 0.3%
规格
HeLa细胞
阻塞步骤
BSA作为15分钟(s)·浓度的阻断剂:1%℃:21℃
固定剂
多聚甲醛

用户社区

核实客户

2018 11月13日提交

应用
蛋白质印迹法
样品
人细胞裂解液-全细胞(人肝细胞)
凝胶运行条件
变性变性
装载量
20μg
规格
人肝细胞
阻塞步骤
牛奶为1小时(S)和0分钟(S)·浓度的封闭剂:5%℃:温度23℃

用户社区

核实客户

2018 6月12日提交

应用
蛋白质印迹法
样品
人细胞裂解液-核(LNCaP -前列腺癌细胞)
凝胶运行条件
还原变性(8% SDS-PAGE)
装载量
15μg
规格
前列腺癌细胞LNCaP
阻塞步骤
牛奶为1小时(S)和0分钟(S)·浓度的封闭剂:5%℃:温度22℃

Armen Petrosyan博士

核实客户

2018 3月28日提交

-属于96评论

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