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我没有看到这种抗体的信号。在室温下,将膜用10%的奶粉在TBS-T中稀释2小时。一级抗体为abcam 16048兔抗层粘连蛋白B,在2%的奶粉中稀释TBS-T。稀释1:10000(0.1ug/mL)和1:1000(1ug/mL。一级抗体在真空袋中与膜一起孵育过夜,温度为4度,持续摇晃。去除一级抗体后,用TBS-T清洗滤膜3次,每次5分钟。
Abcam社区
已验证客户
2011年10月11日被问及
我已经看过你的协议,我确实有一些建议给你。我认为你在西方斑上没有看到任何信号的原因是因为细胞膜被过度阻塞了。一般情况下,我们建议在室温下将膜在5%牛奶或BSA中封闭1小时,或在4摄氏度下过夜。此外,由于您没有看到任何信号,我建议您坚持使用较高浓度的抗体,即1:1000或1:900抗体。
2011年10月11日答复