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为了获得稳健的结果,我们建议优化MTT检测试剂盒ab211091:
每孔较低细胞数下的分析数据扩展段:HeLa细胞在含有10%FBS的DMEM培养基补充剂中生长,使用胰蛋白酶采集,并使用台盼蓝和血细胞仪进行计数。然后在透明细胞培养板中连续稀释细胞,并在37°C下用MTT试剂培养3小时。培养后,在室温下用MTT溶剂处理细胞15分钟。在OD=590 nm时测量吸光度。
参考文献:
或者,我们推荐以下协议。
制备MTT溶液MTT可溶于水(10 mg/mL)、乙醇(20 mg/mL)和缓冲盐溶液和培养基(5 mg/mL)。我们建议在PBS中使用5 mg/mL溶液。通过涡流或超声波混合。
加入MTT后过滤消毒液。
将MTT溶液储存在-20°C(稳定至少6个月)。在4°C温度下储存的时间不要超过几天。
制备MTT溶剂4 mM HCl,0.1%NP40异丙醇溶液
笔记
细胞增殖分析
对于细胞计数,可以用已知的细胞数和固定的培养时间与分析试剂建立标准曲线。
细胞毒性试验