主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 抗IGF1受体的兔单克隆[EPR19322] 适用于:Flow Cyt(Intra)、WB、ICC/IF、IP 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 抗IGF1受体的兔单克隆[EPR19322] -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 重组片段。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:C2C12、HeLa、293、MCF7、C6和NIH/3T3全细胞裂解物; 小鼠脑和脾裂解物; 大鼠脑裂解物。 ICC/IF:C2C12和C6细胞。 流式细胞仪(内部):C2C12细胞。 IP:C2C12全细胞裂解物。
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一般注意事项
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油、0.05%牛血清白蛋白 -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 EPR19322 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白 -
相关产品
应用程序
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目标
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功能 调节胰岛素样生长因子1(IGF1)作用的受体酪氨酸激酶。 高亲和力结合IGF1,低亲和力结合胰岛素(INS)和IGF2。 激活的IGF1R参与细胞生长和生存控制。 IGF1R对肿瘤转化和恶性细胞存活至关重要。 配体结合激活受体激酶,导致受体自身磷酸化和多种底物的酪氨酸磷酸化,这些底物作为信号衔接蛋白发挥作用,包括胰岛素受体底物(IRS1/2)、Shc和14-3-3蛋白。 IRS蛋白的磷酸化导致两条主要信号通路的激活:PI3K-AKT/PKB通路和Ras-MAPK通路。 激活MAPK途径的结果是增加细胞增殖,而激活PI3K途径抑制细胞凋亡并刺激蛋白质合成。 磷酸化IRS1可以激活PI3K(PIK3R1)的85kDa调节亚单位,从而激活包括蛋白AKT/PKB在内的几个下游底物。 AKT磷酸化反过来通过mTOR激活促进蛋白质合成,并通过BAD的磷酸化和失活触发IGFIR的抗凋亡作用。与PI3K驱动的信号传递类似,磷酸化IRS1或Shc对Grb2/SOS的招募导致Ras的招募和Ras-MAPK通路的激活。 除了这两条主要的信号通路外,IGF1R信号也通过Janus激酶/信号转导子和转录激活子途径(JAK/STAT)传递。 JAK蛋白的磷酸化可导致信号转导物和转录激活物(STAT)蛋白的磷酸盐化/活化。 尤其是STAT3的激活,可能对IGF1R的转化活性至关重要。 JAK/STAT通路激活基因转录,可能与转化活性有关。 JNK激酶也可以被IGF1R激活。 IGF1通过磷酸化和抑制MAP3K5/ASK1对JNK活化发挥抑制作用,这与IGF1R直接相关。 当存在于带有INSR的杂交受体中时,与IGF1结合。 PubMed:12138094表明,由IGF1R和INSR亚型Long组成的杂交受体被IGF1高亲和力激活,而IGF2低亲和力,胰岛素不显著激活,由IGF1、IGF2和胰岛素激活由IGF1R和INSR-亚型Short组成的杂交接受器。 相比之下,PubMed:16831875显示,由IGF1R和INSR亚型Long组成的杂交受体以及由IGF1R和INSR-亚型Short组成的混合受体具有相似的结合特性,两者都与IGF1结合,对胰岛素的亲和力较低。 -
组织特异性 在肌肉、心脏、肾脏、脂肪组织、骨骼肌、肝癌、成纤维细胞、脾脏和胎盘(蛋白质水平)中发现INSR的杂交受体。 在多种组织中表达。 在肿瘤中过度表达,包括黑色素瘤、结肠癌、胰腺癌、前列腺癌和肾癌。 -
参与疾病 胰岛素样生长因子1抵抗 -
序列相似性 属于蛋白激酶超家族。 酪氨酸蛋白激酶家族。 胰岛素受体亚家族。 包含4个纤维连接蛋白III型结构域。 包含1个蛋白激酶结构域。 -
翻译后 修改 酪氨酸残基上的自磷酸化对配体结合的反应。 自身磷酸化发生在反式中,即二聚体受体的一个亚基磷酸化另一个亚单位上的酪氨酸残基。 自动磷酸化以连续的方式发生; Tyr-1165首先主要被磷酸化,然后是Tyr-161和Tyr-1186的磷酸化。 虽然每一次磷酸化都会增加激酶活性,但激酶激活环中的所有三个酪氨酸残基(Tyr-1165、Tyr-161和Tyr-1186)都必须磷酸化才能获得最佳活性。 可以在额外的酪氨酸残基上进行自磷酸化(在体外)。 自磷酸化之后是膜旁酪氨酸和C末端丝氨酸的磷酸化。 IRS1-和SHC1-结合需要Tyr-980的磷酸化。 GSK-3β对Ser-1278的磷酸化抑制激酶活性并促进细胞表面表达,这需要在Ser-1282启动磷酸化。 通过PTPN1脱磷。 在Lys-1168和Lys-1171处通过“Lys-48”和“Lys-29”链接进行多泛素化,促进受体内吞并随后被蛋白酶体降解。 泛素化由预先存在的磷酸化促进。 用SUMO1进行Sumoylated。 受调节膜内蛋白水解(RIP)控制。 经历金属蛋白酶依赖的构成性外结构域脱落,产生一个膜锚定的52 kDa C末端片段,该片段被早老蛋白γ-分泌酶进一步处理,产生细胞内50 kDa片段。 -
手机定位 细胞膜。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 3480 人类 Entrez基因: 16001 鼠标 Entrez基因: 25718 老鼠 奥密姆: 147370 人类 瑞士保护银行: P08069号 人类 瑞士保护银行: 问题60751 鼠标 瑞士保护银行: 第24062页 老鼠 尤尼金: 643120 人类
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替代名称 CD221抗体 CD221抗原抗体 IGF 1受体抗体
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图像
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所有车道: 抗IGF1受体抗体[EPR19322](ab182408),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HCT 116细胞裂解物 车道2: IGF1R敲除HCT 116细胞裂解物 3号车道: 野生型MCF7 约290784 细胞裂解产物 车道4: IGF1R淘汰赛MCF7 约287507 细胞裂解产物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 156千帕 观察到的频带大小: 82千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 抗IGF1R抗体[EPR19322](ab182408)在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗CANX[CANX/1543]( ab238078型 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab182408显示与IGF1R特异性结合。 在野生型HCT 116细胞裂解液中在82 kDa处观察到一条带,在IGF1R敲除细胞系中未观察到该大小的信号。 为了生成此图像,分析了野生型和IGF1R敲除HCT 116细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在荧光蛋白印迹(基于TBS)封闭溶液中封闭膜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L 800CW和山羊抗小鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/2000。 -
所有车道: 抗IGF1受体抗体[EPR19322](ab182408),稀释度为1/1000 车道1: 野生型MCF7细胞裂解物 车道2: IGF1R敲除MCF7细胞裂解物 3号车道: HeLa细胞裂解物 车道4: HDLM-2细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 156千帕 观察到的频带大小: 82千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗IGF1受体抗体[EPR19322]在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗CANX[CANX/1543]( ab238078型 )以1/20000稀释度进行负荷对照染色,以红色显示。在Western blot中,ab182408显示与IGF1受体特异性结合。 在野生型MCF7细胞裂解物中观察到82kDa(β链)的条带,在IGF1R敲除细胞系中没有观察到该大小的信号。 为了生成此图像,分析野生型和IGF1R敲除MCF7细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在荧光蛋白印迹(基于TBS)封闭溶液中封闭膜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L 800CW和山羊抗小鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/2000。 -
所有车道: 抗IGF1受体抗体[EPR19322](ab182408),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: IGF1R敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 156千帕 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在100kDa下观察到ab182408。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab182408与野生型HeLa细胞中的IGF1受体反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约264801 (敲除细胞裂解物 约256951 )已使用。 对野生型HeLa和IGF1R敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 将膜在室温下用3%脱脂奶粉在0.1%TBST中封闭1小时。 ab182408和抗-GAPDH抗体[6C5]-负载控制( 约8245 )在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透性C6(大鼠胶质瘤细胞系)细胞的免疫荧光分析,以1/1000稀释度用ab182408标记IGF1受体,然后用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共焦图像显示C6细胞系上的膜和细胞质染色。 核反染为DAPI(蓝色)。 用抗α-管蛋白抗体[DM1A]检测管蛋白-负载控制( 约7291 )稀释1/1000,羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor®594)预吸附( ab150120型 )稀释度为1/1000(红色)。 阴性对照如下: -ve对照1:ab182408,稀释度为1/1000,然后 ab150120型 稀释度为1/1000。 -ve控制2: 约7291 稀释1/1000,然后 约150077 稀释度为1/1000。 -
车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物(40µg) 车道2: IGF1R敲除HAP1全细胞裂解物(40µg) 3号车道: HeLa全细胞裂解物(40µg) 车道1-3 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在100 kDa下观察到ab182408。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 ab182408被证明在野生型HAP1细胞中特异性识别IGF1R以及其他交叉反应带。 检测IGF1R敲除样品时未观察到条带。 野生型和IGF1R基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab182408和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别以1/2000稀释度和1/10000稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
1-4车道: 1/2000稀释度的抗IGF1受体抗体[EPR19322](ab182408) 5-6车道: 1/1000稀释的抗-IGF1受体抗体[EP19322](ab182408) 车道1: C2C12(小鼠成肌细胞系)全细胞裂解液(20µg) 车道2: HeLa(子宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解液(20µg) 3号车道: 293(来自胚胎肾的人上皮细胞系)全细胞裂解物,20µg 车道4: 20µg MCF7(人乳腺癌细胞系)全细胞裂解液 车道5: C6(大鼠胶质瘤细胞系)全细胞裂解液(10µg) 车道6: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)全细胞裂解液(10µg) 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 156千帕 观察到的频带大小: 100200千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 曝光时间:通道1:5秒; 2-4车道:3分钟; 5/6车道:2秒。 观察到的表达谱与文献中描述的一致(PMID:11402025)。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100透性C2C12(小鼠成肌细胞系)细胞的免疫荧光分析,在1/1000稀释度下用ab182408标记IGF1受体,然后用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共焦图像显示C2C12细胞系上的膜和细胞质染色。 核反染为DAPI(蓝色)。 用抗α-管蛋白抗体[DM1A]检测管蛋白-负载控制( 约7291 )稀释1/1000,羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor®594)预吸附( ab150120型 )稀释度为1/1000(红色)。 阴性对照如下: -ve对照1:ab182408,稀释度为1/1000,然后 ab150120型 稀释度为1/1000。 -ve控制2: 约7291 稀释1/1000,然后 约150077 稀释度为1/1000。 -
车道1: 1/1000稀释的抗-IGF1受体抗体[EP19322](ab182408) 2-3车道: 1/5000稀释的抗IGF1受体抗体[EPR19322](ab182408) 车道1: 小鼠脑裂解物 车道2: 小鼠脾裂解物 3号车道: 大鼠脑裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 156千帕 观察到的频带大小: 100200千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 曝光时间:通道1:10秒; 第二车道:3分钟; 第三跑道:1分钟。 观察到的表达谱与文献中描述的一致(PMID:11402025)。 -
与兔IgG单克隆[EPR25A]-同位素对照相比,用ab182408以1/80稀释度(红色)标记IGF1受体的4%副甲醛固定C2C12(小鼠成肌细胞系)细胞的细胞内流式细胞术分析( 约172730 )(黑色)和未标记对照(未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞)(蓝色)。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)稀释1/500作为次级抗体。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
合格证书
工具书类 (46)
吴莉(Wu L) 等。 长非编码RNA LINC01291通过作为microRNA-625-5p的竞争内源性RNA发挥作用,并随后增加IGF-1R的表达,从而促进黑色素瘤的侵袭性。 癌症基因治疗 29:341-357 (2022). 公共医学:33674778 邱尔 等。 A549肺癌细胞核定位胰岛素受体(IR)的生物学功能。 Endokrynol Pol公司 73:121-130 (2022). 公共医学:34855195 蒋S 等。 人类骨髓间充质干细胞衍生的外泌体通过miR-99b-5p/IGF1R轴减弱前列腺癌的进展。 生物工程 13:2004-2016 (2022). PubMed:35030978 郭A 等。 lncRNA IRAIN的过度表达通过抑制IGF-1R-PI3K-NF-κB信号通路抑制胶质瘤的进展和替莫唑胺耐药。 组织病理学 37:543-554(2022年)。 公共医学:35102541 王菲 等。 CircRASSF2通过海绵miR-6838-5p促进IGF1R和骨肉瘤转移。 Ann Transl医学 10:11 (2022). 公共医学:35242856