概述
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产品名称 人VDAC1(孔蛋白)敲除HEK-293T细胞裂解物 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 HEK293吨 -
有机体 人类 -
突变描述 通过使用CRISPR/Cas9,外显子2中2 bp缺失实现敲除。 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
笔记 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute和ERS Genomics limited的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经过测试的应用程序
属性
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储存说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab255548-人VDAC1敲除HEK293T细胞裂解物 1 x 100微克 ab255553-人类野生型HEK293T细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:8、9 D13S317:12、14 D7S820:11 第16天第539页:第9页,第13页 vWA:16、19 TH01:7、9.3 TPOX:11个 CSF1PO:11、12
目标
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功能 通过线粒体外膜和质膜形成通道。 线粒体外膜的通道允许小的亲水分子扩散; 在质膜中,它参与细胞体积调节和凋亡。 它在低或零膜电位下采用开放构象,在30-40 mV以上的电位下采用封闭构象。开放态具有弱阴离子选择性,而封闭态具有阳离子选择性。 可能参与形成通透性过渡孔复合体(PTPC),负责释放触发细胞凋亡的线粒体产物。 -
组织特异性 心脏、肝脏和骨骼肌。 -
序列相似性 属于真核生物线粒体孔蛋白家族。 -
域 主要由19条β链形成的跨膜β-桶组成。 螺旋N末端折叠回孔开口,并在电压门控通道活性中发挥作用。 -
手机定位 线粒体外膜。 细胞膜。 -
UniProt提供的信息 -
替代名称 第2441页 OMP2号机组 POR1
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应用
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图像
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车道1: 野生型Hap1细胞裂解物(20µg) 车道2: VDCA1敲除Hap1细胞裂解物(20µg) 3号车道: 野生型HEK-293T细胞裂解物(20µg) 车道4: VDAC1敲除HEK-293T细胞裂解物(20µg) 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约14734 在31 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约181602 在37kDa下观察到。 约14734 在野生型HEK-293T细胞中显示与VDAC1/孔蛋白反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255444年 使用敲除细胞裂解物ab263839。 对野生型和VDAC1/孔蛋白敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约14734 和抗-GAPDH抗体[EPR16891]-负荷控制( 约181602 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型Hap1细胞裂解物(20µg) 车道2: VDCA1敲除Hap1细胞裂解物(20µg) 3号车道: 野生型HEK-293T细胞裂解物(20µg) 车道4: VDAC1敲除HEK-293T细胞裂解物(20µg) 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约154856 在31 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 在37kDa下观察到。 约154856 在野生型HEK-293T中显示与VDAC1/卟啉反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约255444 使用敲除细胞裂解物ab263839。 对野生型和VDAC1/孔蛋白敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约154856 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
纯合子:外显子2中2 bp缺失
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载