主要功能和细节
一次性90分钟协议 灵敏度:132 pg/ml 范围:0.63 ng/ml-40 ng/ml 样品类型:细胞培养提取物、组织提取物 检测方法:比色法 分析类型:三明治(定量) 反应对象:人类
概述
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产品名称 -
检测方法 比色法 -
精密度 内部审计 样品 n个 平均值 标准偏差 变异系数% 总体 5 2% 内部通话 样品 n个 平均值 标准偏差 变异系数% 总体 三 4.1% -
样品类型 细胞培养提取物、组织提取物 -
分析类型 三明治(定量) -
敏感 132微微克/毫升 -
范围 0.63纳克/毫升- 40纳克/毫升 -
恢复 样品特定回收率 样品类型 平均% 范围 细胞培养基 94 90% - 101% 胎牛血清 84 83% - 85% 牛血清白蛋白 107 106% - 107% -
检测时间 1小时 3000万 -
检测持续时间 一步分析法 -
物种反应性 与以下物质反应: 人类 -
产品概述 人SIRT1 ELISA试剂盒(ab171573)是一种单洗90分钟夹心ELISA试剂,用于定量测定人细胞样品中的SIRT1蛋白。 它使用我们专有的SimpleStep ELISA®技术。 以132 pg/ml的灵敏度定量人体SIRT1。 SimpleStep ELISA®技术使用与亲和标签结合的捕获抗体,亲和标签被用于覆盖SimpleStepELISA®板的单克隆抗体识别。 这种夹心ELISA方法允许在一个步骤中形成抗体分析夹心复合物,显著缩短了分析时间。 有关更多详细信息,请参阅图像部分中的SimpleStep ELISA®协议摘要。 我们的SimpleStep ELISA®技术具有以下优点: -单次刷洗方案将分析时间缩短至90分钟或更短 -高级抗体的高灵敏度、特异性和再现性 -在生物样品中充分验证 -96个井板,可破碎成12 x 8个井带 384孔单步ELISA®微孔板( 约203359 )可作为SimpeStep ELISA®试剂盒提供的96-well微孔板的替代品使用。 -
笔记 SIRT1-沉默交配型信息调节2同源物(酵母Sir2的同源物)-编码脱乙酰酶的sirtuins家族的一个成员。 sirtuin 1蛋白(基因SIRT1)负责向细胞核募集后的表观遗传基因沉默。 Sirtuin-1去乙酰化蛋白,包括组蛋白,在细胞凋亡和衰老、肌肉分化的广泛(和不断增长的)过程中,可作为细胞溶质NAD+/NADH传感器。 这种酶还可以调节细胞的昼夜节律时钟,以响应代谢条件。 SIRT1被烟酰胺抑制,并可能被红酒成分白藜芦醇激活。 白藜芦醇可能参与sirtuin蛋白的激活,因此可能参与延长酵母的寿命。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 -
站台 微孔板
属性
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储存说明 储存于+4°C。 请参阅协议。 -
组件 1 x 96测试 10X人SIRT1捕获抗体 1 x 600微升 10X人SIRT1检测抗体 1 x 600微升 10X清洗缓冲液PT(ab206977) 1 x 20毫升 50X细胞提取增强剂溶液(ab193971) 1 x 1毫升 5X细胞提取缓冲液PTR(ab193970) 1 x 10毫升 抗体稀释液5B 1 x 6毫升 人SIRT1冻干重组蛋白 2瓶 平板密封件 1台 样品稀释剂NS(ab193972) 1 x 12毫升 单步预涂96孔微孔板(ab206978) 1台 停止解决方案 1 x 12毫升 TMB开发解决方案 1 x 12毫升 -
研究领域 -
功能 NAD依赖性蛋白脱乙酰酶,将转录调控直接与细胞内能量学联系起来,并参与多种分离细胞功能的协调,如细胞周期、对DNA损伤的反应、代谢、凋亡和自噬。 可以通过组蛋白的去乙酰化调节染色质功能,并可以促进组蛋白和DNA甲基化的改变,导致转录抑制。 脱乙酰化广泛的转录因子和协同调节因子,从而对目标基因的表达进行正调控和负调控。 作为NAD(+)/NADH细胞溶质比率的传感器,该比率因葡萄糖缺乏和与热量限制相关的代谢变化而改变。 对骨骼肌细胞分化至关重要,对低营养素的反应介导对骨骼肌成肌细胞分化的抑制作用,这也涉及5'-AMP活化蛋白激酶(AMPK)和烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)。 eNoSC(能量依赖性核仁沉默)复合物的成分,该复合物可调节rDNA沉默以响应细胞内能量状态,并通过招募组蛋白修饰酶发挥作用。 eNoSC复合物能够感知细胞的能量状态:在葡萄糖饥饿时,NAD(+)/NADP(+)比率的升高激活SIRT1,导致组蛋白H3脱乙酰化,然后通过SUV39H1将H3在“Lys-9”(H3K9me2)二甲基化,并在rDNA基因座中形成沉默的染色质。 将SUV39H1的“Lys-266”去乙酰化,导致其活化。 通过脱乙酰PCAF和MYOD1抑制骨骼肌分化。 HIST1H1E的去乙酰化H2A和'Lys-26'。 组蛋白H4的去乙酰化酶“Lys-16”(体外)。 通过染色质重塑参与NR0B2/SHP共表达功能:通过NR0B2/SHP招募到LRH1靶基因启动子,从而刺激组蛋白H3和H4脱乙酰化,导致转录抑制。 建议通过积极调节端粒长度来促进基因组完整性; 然而,关于着丝粒周围异染色质定位的报道相互矛盾。 建议通过调节核SUV39H1的可用池,在组成异染色质(CH)的形成和/或维护中发挥作用。 氧化/代谢应激通过MDM2抑制SUV39H1多泛素化来减少SUV39H2降解。 SUV39H1水平的增加增加了CH中SUV39H2的周转,这反过来似乎加快了异染色质的更新,异染色素在应激反应期间与更大的基因组完整性相关。 去乙酰化p53/TP53的“Lys-382”并损害其诱导转录依赖性促凋亡程序和调节细胞衰老的能力。 脱乙酰化TAF1B,从而通过RNA聚合酶I抑制rDNA转录。脱乙酰化MYC,促进MYC与MAX的结合,降低MYC稳定性,导致转化能力受损。 去乙酰化FOXO3以应对氧化应激,从而提高其诱导细胞周期阻滞和抗氧化应激抵抗的能力,但抑制FOXO3-介导的凋亡转录活性诱导; 也导致FOXO3泛素化和蛋白质体降解。 在转录活性和细胞凋亡的调节中,似乎对MLLT7/FOXO4具有类似的作用。 去乙酰化物DNMT1; 从而损害DNMT1甲基转移酶诱导的依赖性转录抑制因子活性,调节DNMT1细胞周期调节功能和DNMT1介导的基因沉默。 脱乙酰化酶RELA/NF-kappa-B p65从而抑制其反式激活潜能并增强对TNF-α的反应中的凋亡。 脱乙酰HIF1A、KAT5/TIP60、RB1和HIC1。 去乙酰化FOXO1导致其核保留并增强其转录活性,从而增加肝脏中的糖异生。 抑制E2F1转录活性和凋亡功能,可能通过去乙酰化。 参与HES1和HEY2介导的转录抑制。 与MYCN合作似乎参与了DUSP6/MAPK3的转录抑制,从而通过“Ser-62”磷酸化使MYCNs稳定。 脱乙酰MEF2D。 对可能与组蛋白H3的局部脱乙酰化有关的AR依赖基因的拮抗剂介导的转录抑制所必需。 抑制HNF1A介导的转录。 CREBZF用于抑制ESRRG。 调节AP-1转录因子活性。 脱乙酰化物NR1H3和NR1H2以及‘Lys-434’处NR1H3脱乙酰化正调控NR1H3:RXR靶基因的转录,促进NR1H4蛋白体降解,导致胆固醇外流; 提出了reach轮转录后启动子清除机制。 参与脂质代谢。 通过抑制PPARG(可能与NCOR1和SMRT/NCOR2相关)调节白色脂肪细胞的脂肪生成和脂肪动员。 去乙酰化ACSS2导致其活化,以及HMGCS1。 参与肝脏和肌肉代谢。 通过去乙酰化和激活PPARGC1A,在低血糖条件下激活骨骼肌中的脂肪酸氧化,并参与葡萄糖稳态。 参与肝脏PPARA和脂肪酸β氧化的调节。 参与葡萄糖对胰岛β细胞胰岛素分泌的正向调节; 该功能似乎暗示了UCP2的转录抑制。 建议去乙酰化IRS2,从而促进其胰岛素诱导的酪氨酸磷酸化。 去乙酰化SREBF1亚型SREBP-1C,从而降低其在脂肪生成基因表达中的稳定性和反式激活。 通过抑制参与DNA修复的基因(如XPC和TP73)参与DNA损伤反应,脱乙酰化XRCC6/Ku70,促进补充额外因子到受损DNA位点,如SIRT1-脱乙酰化NBN可以招募ATM来启动DNA修复,SIRT1-去乙酰化XPA与RPA2相互作用。 还通过同源重组和特异性单链退火(独立于XRCC6/Ku70和NBN)参与DNA双链断裂的DNA修复。XPC的转录抑制可能涉及E2F4:RBL2抑制复合物和蛋白激酶B(AKT)信号。 TP73的转录抑制可能涉及E2F4和PCAF。 脱乙酰化WRN,从而调节其解旋酶和核酸外切酶活性,并调节WRN核转位以应对DNA损伤。 在“Lys-6”和“Lys-7”处脱乙酰APEX1,并通过促进APEX1与XRCC1的结合刺激细胞AP内切酶活性。 通过阻断细胞质p53/TP53的核转位并可能将其重定向至线粒体,增加p53/TP33介导的转录依赖性凋亡。在“Lys-539”和“Lys-542”处脱乙酰化XRCC6/Ku70,使其将BAX与线粒体隔离,从而抑制应激诱导的凋亡。 可能通过去乙酰化ATG5、ATG7和MAP1LC3B/ATG8参与自噬。 去乙酰化AKT1,导致AKT1和PDK1与PIP3的结合增强,并促进其活化。 建议在调节与细胞衰老相关的STK11/LBK1依赖性AMPK信号通路中发挥作用,这似乎涉及调节STK11/LBK1的乙酰化状态。 能去乙酰化STK11/LBK1,从而增加其活性、细胞质定位和与STRAD的结合; 然而,这种活性在正常细胞中的相关性尚不清楚。 内皮细胞中显示出抑制STK11/LBK1活性并促进其降解。 在“Lys-64”和“Lys-70”处对SMAD7进行去乙酰化,从而促进其降解。 去乙酰化CIITA并增强其MHC II类转录激活,并有助于其稳定性。 终止MECOM/EVI1。 在“Lys-487”处脱乙酰化PML,这种脱乙酰化促进PML对PER2核定位的控制。 在神经原性转换期间,通过抑制选择性NOTCH1靶基因 异构体2:异构体2显示为p53/TP53的去乙酰化'Lys-382',但活性低于异构体1。 结合起来,这两种亚型发挥相加作用。 异构体2调节p53/TP53的表达和细胞应激反应,并被p53/TP3抑制,呈现SIRT1异构体依赖的自身调节环。 (微生物感染)如果HIV-1感染,与病毒Tat蛋白相互作用并使其脱乙酰。 病毒Tat蛋白抑制SIRT1对RELA/NF-kappa-B p65的去乙酰化活性,从而增强其转录活性,SIRT1被认为有助于感染期间T细胞的过度激活。 SirtT1 75kDa片段:催化失活的75SirT1可能参与细胞凋亡的调控。 可能通过与细胞色素C结合和干扰凋亡小体组装,参与保护软骨细胞免受凋亡死亡。 -
组织特异性 广泛表达。 -
序列相似性 属于sirtuin家族。 I类亚科。 包含1个去乙酰化酶sirtuin型结构域。 -
翻译后 修改 多个赖氨酸残基甲基化; DNA损伤后甲基化增强,对p53/TP53的脱乙酰酶活性来说是必不可少的。 磷酸化。 STK4/MST1磷酸化,导致SIRT1介导的p53/TP53脱乙酰化受到抑制。 丝氨酸-27、丝氨酸-47和丝氨酸-530的MAPK8/JNK1磷酸化导致核定位和酶活性增加。 DYRK1A和DYRK3在Thr-530处的磷酸化激活脱乙酰酶活性并促进细胞存活。 雷帕霉素复合物1(mTORC1)在Ser-47的哺乳动物靶点磷酸化抑制脱乙酰活性。 被CaMK2磷酸化,导致p53/TP53和NF-kappa-B p65/RELA脱乙酰活性增加(通过相似性)。 涉及MAPK9的Ser-27磷酸化与蛋白质稳定性有关。 一些磷酸化位点存在一些模糊性:Ser-159/Ser-162和Thr-544/Ser-545。 经TNF-α处理后,组织蛋白酶B进行蛋白质水解,生成催化活性但稳定的SirtT1 75kDa片段(75SirT1)。 GAPDH对S-亚硝基化,导致抑制NAD依赖性蛋白脱乙酰酶活性。 -
手机定位 细胞质。 线粒体和细胞核,PML体。 细胞质。 核心。 通过与PML的互动招募到核机构(PubMed:12006491)。 在细胞核中用APEX1染色(PubMed:19934257)。 可在核仁、核常染色质、异染色质和内膜中发现(PubMed:15469825)。 细胞核和细胞质之间的穿梭(根据相似性)。 利用XBP1亚型2在细胞核中进行结肠酸化(PubMed:20955178)。 -
UniProt提供的信息 -
替代名称 75信号T1 hSIR2型 hSIRT1型
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数据库链接
图像
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SimpleStep-ELISA技术允许在一个步骤中形成抗体-抗原复合物,将测定时间减少到90分钟。 将样品或标准品和抗体混合物一次性添加到微孔中,培养、清洗并添加最终基质。 有关详细的分步指南,请参阅协议。 -
示例SIRT1标准曲线。 绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
在分析的工作范围内滴定HeLa提取物。 绘制了从重复测量中减去的背景数据。 -
不同细胞系SIRT1表达的比较。 绘制了从重复测量中减去的背景数据。 注意,在A431细胞系中SIRT1的表达相对较低。 -
基于125µg/mL的裂解液负荷,绘制所示细胞系的sirtuin1插值值。在上述定量的相同裂解液上使用检测器sirtuin抗体进行Western blot。 -
使用本试剂盒中的SIRT1检测抗体对人HDFn细胞进行免疫细胞化学染色( ab110304型 ). 靶蛋白主要位于细胞核中。
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (11)
Van Der Stukken C公司 等。 新生儿衰老的端粒-线粒体轴。 老龄化(纽约州奥尔巴尼市) 14:1627-1650 (2022). 公共医学:35169104 裴勇俊 等。 孕酮减轻SIRT1缺陷介导的先兆子痫。 生物分子 12:不适用(2022年)。 公共医学:35327614 他是M 等。 ALDH2/SIRT1通过抑制氧化应激促进1型和2型糖尿病诱导的视网膜病变。 氧化介质细胞Longev 2021:1641717 (2021). 公共医学:34725563 谢敏阳 Sirt1表达减少通过Th17和Th22反应促进眼部Behçet病进展。 眼科研究 64:554-560 (2021). 公共医学:33142293 白M 等。 SIRT1通过灭活缺氧诱导因子-1a缓解坏死性肠炎。 细胞周期 19:2018-2027 (2020). 公共医学:32657204