概述
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产品名称 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 希拉牌手表 -
有机体 人类 -
突变描述 通过使用CRISPR/Cas9,在外显子1插入1 bp,在外显子1插入选择盒实现敲除。 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
笔记 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经过测试的应用程序
属性
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储存说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab255475-人CAV1敲除HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 ab255552-人野生型HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 腺癌 -
性别 女性 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:11、12 D13S317:12、13.3 D7S820:8、12 D16S539:9、10 vWA:16、18 TH01:7型 TPOX:8、12 CSF1PO:9、10
目标
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功能 可能在小泡膜内充当支架蛋白。 直接与G蛋白α亚单位相互作用,并能在功能上调节其活性(通过相似性)。 参与T细胞受体(TCR)介导的T细胞激活所必需的共刺激信号。 其与DPP4的结合以T细胞受体/CD3依赖的方式诱导T细胞增殖和NF-kappa-B活化。 招募CTNNB1到小窝膜,并可能通过Wnt途径调节CTNNB1介导的信号传导。 -
组织特异性 在肌肉和肺中表达,在肝脏、大脑和肾脏中表达较少。 -
参与疾病 CAV1缺陷是先天性全身性脂肪营养不良3型(CGL3)的病因[MIM:612526]; 也称为Berardinelli-Seip先天性脂肪营养不良3型(BSCL3)。 先天性全身性脂肪营养不良是一种常染色体隐性遗传疾病,其特征是脂肪组织几乎缺失、胰岛素抵抗严重、高甘油三酯血症、肝脂肪变性和糖尿病早期发病。 -
序列相似性 属于卡沃林家族。 -
翻译后 修改 β亚型的引发剂蛋氨酸在翻译过程中或翻译后被去除。 然后将新的N-末端氨基酸N-乙酰化。 -
手机定位 高尔基体膜。 细胞膜。 膜>小窝。 薄膜筏。 在膜筏中用DPP4染色。 膜中潜在的发夹状结构。 小窝膜蛋白。 -
UniProt提供的信息 -
替代名称 BSCL3型 CAV汽车 CAV1型
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KO细胞系 -
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应用
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图像
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车道1: 野生型HeLa细胞裂解物20 ug 车道2: CAV1敲除HeLa细胞裂解物20 ug 3号车道: A431细胞裂解物20 ug 车道4: A549细胞裂解物20 ug 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 公元193893年 在20 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 公元193893年 在Western印迹中显示与野生型HeLa细胞中的Caveolin-1反应,在CAV1敲除细胞系中观察到信号丢失 ab255371号 (CAV1敲除细胞裂解物ab263806)。 对野生型HeLa和CAV1敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )孵育前 公元193893年 和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4时过夜 ° C,稀释度分别为1/5000和1/20000。 印迹与山羊抗鼠IgG H&L(IRDye)孵育 ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: A431细胞裂解物(20µg) 车道2: A549细胞裂解物(20µg) 3号车道: 野生型HeLa细胞裂解物(20µg) 车道4: CAV1敲除HeLa细胞裂解物(20µg) 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约32577 在20 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 在37kDa下观察到。 约32577 在野生型HeLa细胞中显示与Caveolin-1反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255371号 采用敲除细胞裂解物ab263806。 对野生型和Caveolin-1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约32577 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: A431细胞裂解物(20µg) 车道2: A549细胞裂解物(20µg) 3号车道: 野生型HeLa细胞裂解物(20µg) 车道4: CAV1敲除HeLa细胞裂解物(20µg) 车道1-4: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约192869年 在20 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 在37kDa下观察到。 约192869年 在野生型HeLa中与Caveolin-1反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255371年 采用敲除细胞裂解物ab263806。 对野生型和Caveolin-1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约192869年 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1比10000和1比20000稀释培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
等位基因-1:1 bp插入外显子1 -
等位基因-2:在外显子1中插入选择盒
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载