主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 组蛋白H3(三甲基K27)-ChIP级兔单克隆抗体[EPR18607] 适用于:IHC-P、ChIP、ICC/IF、WB、PepArr、ELISA、ChIP测序 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 组蛋白H3(三甲基K27)-ChIP级兔单克隆抗体[EPR18607] -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HeLa和NIH/3T3全细胞裂解物; 野生型小鼠ES全细胞裂解物, IHC-P:人结肠、小鼠结肠和大鼠肾组织。 ICC:HeLa细胞。 ChIP:从HeLa细胞制备的染色质,Myo-D ChIP引物对 约269261 . ELISA:组蛋白H3–未修饰,组蛋白H3。
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一般注意事项
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油、0.05%牛血清白蛋白 -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 EPR18607系列 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
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应用
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目标
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功能 核小体的核心成分。 核小体将DNA包裹并压缩成染色质,限制了需要DNA作为模板的细胞机制对DNA的访问。 因此,组蛋白在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥着核心作用。 DNA可及性是通过组蛋白的一系列复杂的翻译后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节的。 -
序列相似性 属于组蛋白H3家族。 -
发育阶段 在S期表达,然后随着分化过程中细胞分裂减慢,表达强烈下降。 -
翻译后 修改 乙酰化通常与基因激活有关。 Lys-10(H3K9ac)上的乙酰化破坏Arg-9(H3R8me2s)的甲基化。 Lys-19(H3K18ac)和Lys-24(H3K24ac)上的乙酰化有利于Arg-18(H3R17me)上的甲基化。 PADI4在Arg-9(H3R8ci)和/或Arg-18(H3R17ci)处的瓜氨酸化会损害甲基化并抑制转录。 CARM1在Arg-18(H3R17me2a)处的不对称二甲基化与基因激活有关。 PRMT5在Arg-9(H3R8me2s)处的对称二甲基化与基因抑制有关。 PRMT6在Arg-3(H3R2me2a)处的不对称二甲基化与基因抑制有关,并且与H3 Lys-5甲基化(H3K4me2和H3K4me3)相互排斥。 H3R2me2a存在于基因的3'处,无论其转录状态如何,它在非活性启动子上富集,而在活性启动子中不存在。 Lys-5(H3K4me)、Lys-37(H3K36me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化与基因激活有关。 Lys-5(H3K4me)的甲基化促进H3和H4的后续乙酰化。 Lys-80甲基化(H3K79me)与DNA双链断裂(DSB)反应相关,是TP53BP1的特异靶点。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化与基因抑制有关。 Lys-10(H3K9me)的甲基化是HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)的一个特定靶点,可防止随后Ser-11(H3S10ph)的磷酸化以及H3和H4的乙酰化。 Lys-5(H3K4me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化需要H2B在“Lys-120”的初步单泛素化。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化富集在非活性X染色体染色质中。 前期GSG2/haspin在Thr-4(H3T3ph)下磷酸化,后期去磷酸化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化对有丝分裂和减数分裂期间的染色体凝聚和细胞周期进展至关重要。 此外,RPS6KA4和RPS6KA5在Ser-11(H3S10ph)处的磷酸化在间期很重要,因为它能够在外界刺激后转录基因,如丝裂原、应激、生长因子或紫外线照射,并导致基因的激活,如c-fos和c-jun, 与基因激活相关,防止Lys-10(H3K9me)甲基化,但促进H3和H4的乙酰化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化介导HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)与异染色质的分离。 Ser-11的磷酸化(H3S10ph)也是肿瘤细胞转化的重要调节机制。 在有丝分裂期间或紫外线B照射下,MLTK亚型1、RPS6KA5或AURKB在Ser-29(H3S28ph)下磷酸化。 PRKCBB在Thr-7(H3T6ph)处的磷酸化是表观遗传转录激活的特异标记,可防止LSD1/KDM1A对Lys-5(H3K4me)的去甲基化。 在着丝粒处,DAPK3和PKN1在Thr-12(H3T11ph)从前期到后期的早期特异性磷酸化。 PKN1在Thr-12(H3T11ph)处的磷酸化是表观遗传转录激活的特异性标签,其促进KDM4C/JMJD2C对Lys-10(H3K9me)的去甲基化。 JAK2在Tyr-42(H3Y41ph)处的磷酸化促进CBX5(HP1α)从染色质中排除。 RAG1在淋巴细胞中单泛素化,V(D)J重组需要单泛素(根据相似性)。 CUL4-DDB-RBX1复合物对紫外线照射的反应中泛素化。 这可能会削弱组蛋白和DNA之间的相互作用,并促进DNA对修复蛋白质的可及性。 -
手机定位 核心。 染色体。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 8350 人类 Entrez基因: 8351 人类 Entrez基因: 8352 人类 Entrez基因: 8353 人类 Entrez基因: 8354 人类 Entrez基因: 8355 人类 Entrez基因: 8356 人类 Entrez基因: 8357 人类
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替代名称 H3组蛋白家族成员E假基因抗体 H3组蛋白家族成员A抗体 H3/A抗体
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图像
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从HeLa细胞制备染色质。 细胞用1%甲醛固定10分钟。 ChIP采用10 7 HeLa细胞和4µg抗-Histone H3(三甲基K27)抗体[EPR18607]-ChIP级(ab192985)。 ChIP DNA在Illumina NovaSeq 6000上进行测序,深度为3000万次。
可以下载映射读取的其他屏幕截图 在这里 . -
根据Abcam X-ChIP协议,从HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25µg染色质、2µg ab192985(蓝色)和20µl抗兔IgG sepharose珠进行ChIP。 将2μg兔正常IgG添加到珠子对照中(黄色)。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(Sybr green方法)定量。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100透性HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞)标记组蛋白H3(三甲基K27)细胞的免疫荧光分析,ab192985,1/1000稀释,然后是山羊抗Rabbit IgG(Alexa Fluor) ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共聚焦图像显示HeLa细胞系上的核染色。 核染色为DAPI(蓝色)。 用抗阿尔法Tubulin小鼠单克隆抗体检测Tubulin( 约7291 )稀释1/1000,然后使用山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )稀释度为1/1000的二级抗体(红色)。 阴性对照如下:- -ve控件1: ab192985,稀释度为1/1000,然后是山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )二级抗体的稀释度为1/1000。 -ve控制2: 抗α-Tubulin小鼠MAb( 约7291 )稀释1/1000,然后使用山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )二级抗体的稀释度为1/1000。 -
所有车道: 抗-Histone H3(三甲基K27)抗体[EPR18607]-ChIP等级(ab192985),稀释度为1/1000 车道1: 用1%十二烷基硫酸钠热裂解法制备的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解液 车道2: 用RIPA裂解法制备的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG(HRP),针对1/5000稀释度的非还原型IgG 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 15千Da 暴露时间: 3分钟 阻塞/稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST 对于本产品,我们建议使用1%SDS热裂解法。 有关裂解液制备方案,请参阅方案部分的方案手册或 此处(可下载副本)。 -
所有车道: 抗-Histone H3(三甲基K27)抗体[EPR18607]-ChIP等级(ab192985),稀释度为1/1000 车道1: 用5%NFDM/TBST裂解HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞 车道2: 用2%BSA/TBST裂解HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞 每车道15µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )(山羊抗兔IgG,(H+L),过氧化物酶偶联) 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 15千Da 暴露时间: 40秒 我们建议使用2%BSA作为阻断和抗体稀释缓冲液。 -
抗-Histone H3(三甲基K27)抗体[EPR18607]-ChIP等级(ab192985),1/1000稀释+NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)全细胞裂解液,10µg 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/50000 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 15千Da 暴露时间: 1秒 阻塞/稀释缓冲液: 5%BSA/TBST -
所有车道: 抗-Histone H3(三甲基K27)抗体[EPR18607]-ChIP等级(ab192985),稀释度为1/1000 车道1: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: HeLa(子宫颈腺癌人上皮细胞系)用5µg的H3K4Me1肽裂解全细胞 3号车道: HeLa(子宫颈腺癌人上皮细胞系)用H3K4Me2肽以5µg的浓度裂解全细胞 车道4: HeLa(子宫颈腺癌人上皮细胞系)用H3K4Me3肽以5µg的浓度裂解全细胞 车道5: HeLa(来自宫颈腺癌的人上皮细胞系)全细胞裂解物,含5µg H3K9Me1肽 车道6: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)用H3K9Me2肽以5µg的浓度裂解全细胞 7号车道: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)用H3K9Me3肽以5µg的浓度裂解全细胞 第8车道: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)用H3K27Me1肽以5µg的浓度裂解全细胞 9号车道: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)用H3K27Me2肽以5µg的浓度裂解全细胞 10号车道: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)用H3K27Me3肽以5µg的浓度裂解全细胞 11号车道: HeLa(子宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解液与5µg H3K27未修饰肽 每条泳道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 使用ECL技术开发。 预测的带宽大小: 15千Da 暴露时间: 5秒 抗体被三甲基K27肽(第10道)阻断,并被二甲基K27肽类轻微阻断(第9道,根据ELISA测定,与二甲基K29有14%的交叉反应性)。 -
所有车道: 抗-Histone H3(三甲基K27)抗体[EPR18607]-ChIP等级(ab192985),稀释度为1/1000 车道1: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系) 车道2: EED-/-小鼠全细胞裂解物 3号车道: 野生型小鼠ES全细胞裂解物 每条泳道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/50000 使用ECL技术开发。 预测的带宽大小: 15千Da 暴露时间: 8分钟 -
使用浓度为0.1µg/ml的ab192985进行肽阵列分析,然后使用1/50000稀释度的山羊抗狂犬病IgG(H+L)Fluo 647nm结合二级抗体。 ab192985在肽阵列中对501种不同的修饰和未修饰组蛋白肽进行了测试; 每个肽以六种浓度打印在阵列上(每种浓度一式三份)。 圆圈区域表示抗体和肽之间的亲和力:所有含抗原肽显示为红色圆圈,所有其他肽显示为蓝色圆圈。 当根据相应的肽浓度绘制抗体结合值时,亲和力计算为曲线下面积。 每个圆圈区域归一化为亲和力最强的肽。 可以下载完整的数据集,包括所有肽的完整列表和图中每个肽的位置信息 在这里 . -
使用ab192985在0-0.25µg/ml的浓度范围内对1µg/ml的抗原进行ELISA分析,然后用1/2500稀释的碱性磷酸酶偶联物AffiniPure山羊抗兔IgG(H&L)二级抗体进行ELISA分析。 对所有批次的ab192985进行ELISA测试,以对抗不同组蛋白H3修饰的肽。 结果表明,该抗体与组蛋白H3-三甲基K27免疫肽有很强的结合,表明该抗体能特异性地识别组蛋白H3-三甲基K26修饰。 弱绑定 (14%) 还检测到H3-二甲基K27修饰。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
合格证书
工具书类 (42)
塔瓦雷斯M 等。 JAZF1-SUZ12在细胞分化过程中失调PRC2功能和基因表达。 单元格代表 39:110889 (2022). 公共医学:35649353 Geis FK公司 等。 两种淋巴细胞系能有效沉默未整合的HIV-1 DNA。 逆转录病毒学 19:16 (2022). 公共医学:35810297 刘杰 等。 lncRNA HOTTIP招募EZH2抑制慢性髓系白血病PTEN表达并参与IM抵抗。 干细胞Int 2022:9993393 (2022). 公共医学:36117724 陈F 等。 两种Keap1异构体α和β对Nrf2的不同抑制作用对人肝癌恶性行为的影响。 国际分子科学杂志 23:不适用(2022年)。 公共医学:36142252 Huang K和Tang Y SChLAP1通过与EZH2相互作用,通过DNMT3a-反馈环介导5号染色体多个miRNA的启动子甲基化修饰,从而促进前列腺癌的发展。 细胞死亡疾病 12:188(2021)。 公共医学:33589600