主要功能和细节
针对组蛋白H3(磷酸S10)的小鼠单克隆[mAbcam 14955] 适用于:IHC-P、ELISA、流式细胞仪(Intra)、ICC/IF、WB 反应对象:小鼠、人类、果蝇 同位素:IgG1
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 针对组蛋白H3(磷酸S10)的小鼠单克隆[mAbcam 14955] -
寄主物种 鼠标 -
特异性 ab14955识别组蛋白H3上的磷酸化S10。 通过ELISA识别磷酸S28肽,但不被WB中的磷酸S28阻断。 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 小鼠、人类、果蝇 预计用于: 大鼠、鸡、酿酒酵母、非洲爪蟾、拟南芥、秀丽隐杆线虫、印度麂、猴子、波姆裂殖酵母、斑马鱼、哺乳动物、烟草、莱茵衣藻、非洲绿猴、巢状曲霉、粗糙神经孢子菌、Oncopeltus -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:对照HeLa组蛋白制剂。冰片处理的HeLa组织蛋白制剂。用花萼蛋白A处理的HeLa细胞裂解液。 IHC-P:人体肾组织。 ICC:HeLa和10T1/2细胞。 流式细胞仪(内部):HeLa细胞。
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一般注意事项 制备杂交瘤,并通过ELISA对免疫三甲基K9和磷酸S10二修饰肽的克隆进行阳性筛选。 克隆还针对三甲基K9和磷酸S10肽进行了阳性筛选。 克隆与未修饰的肽进行负筛选。 该克隆与三甲基K9和磷酸化S10二修饰肽结合,并与磷酸化S10肽结合,但不与三甲基K9肽或等效的未修饰组蛋白H3肽结合。 该抗体克隆由Abcam制造。 如果您需要为您的实验定制缓冲配方或共轭物,请联系 订单@abcam.com . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系,在解决这一问题方面处于领先地位。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是该产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分试样。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.50 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS -
浓度信息加载。。。 -
纯度 IgG分数 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 单抗14955 -
同位素 IgG1 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
对应的未修饰肽 -
同位素控制 -
重组蛋白
应用程序
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目标
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功能 核小体的核心成分。 核小体将DNA包裹并压缩成染色质,限制了需要DNA作为模板的细胞机制对DNA的访问。 因此,组蛋白在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥着核心作用。 DNA可及性是通过组蛋白的一系列复杂的翻译后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节的。 -
序列相似性 属于组蛋白H3家族。 -
发育阶段 在S期表达,然后随着分化过程中细胞分裂减慢,表达强烈下降。 -
翻译后 修改 乙酰化通常与基因激活有关。 Lys-10(H3K9ac)上的乙酰化破坏Arg-9(H3R8me2s)的甲基化。 Lys-19(H3K18ac)和Lys-24(H3K24ac)上的乙酰化有利于Arg-18(H3R17me)上的甲基化。 PADI4在Arg-9(H3R8ci)和/或Arg-18(H3R17ci)处的瓜氨酸化会损害甲基化并抑制转录。 CARM1在Arg-18(H3R17me2a)处的不对称二甲基化与基因激活有关。 PRMT5在Arg-9(H3R8me2s)处的对称二甲基化与基因抑制有关。 PRMT6在Arg-3(H3R2me2a)处的不对称二甲基化与基因抑制有关,并且与H3 Lys-5甲基化(H3K4me2和H3K4me3)相互排斥。 H3R2me2a存在于基因的3'处,无论其转录状态如何,并且在非活性启动子上富集,而在活性启动子上不存在。 Lys-5(H3K4me)、Lys-37(H3K36me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化与基因激活有关。 Lys-5(H3K4me)的甲基化促进H3和H4的后续乙酰化。 Lys-80处的甲基化(H3K79me)与DNA双链断裂(DSB)反应有关,并且是TP53BP1的特异性靶标。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化与基因抑制有关。 Lys-10(H3K9me)的甲基化是HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)的一个特定靶点,可防止随后Ser-11(H3S10ph)的磷酸化以及H3和H4的乙酰化。 Lys-5(H3K4me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化需要H2B在“Lys-120”的初步单泛素化。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化富集在非活性X染色体染色质中。 前期GSG2/haspin在Thr-4(H3T3ph)下磷酸化,后期去磷酸化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化对有丝分裂和减数分裂期间的染色体凝聚和细胞周期进展至关重要。 此外,RPS6KA4和RPS6KA5在Ser-11(H3S10ph)处的磷酸化在间期很重要,因为它能够在外界刺激后转录基因,如丝裂原、应激、生长因子或紫外线照射,并导致基因的激活,如c-fos和c-jun, 与基因激活相关,防止Lys-10(H3K9me)甲基化,但促进H3和H4的乙酰化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化介导HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)与异染色质的分离。 Ser-11的磷酸化(H3S10ph)也是肿瘤细胞转化的重要调节机制。 在有丝分裂期间或紫外线B照射下,MLTK亚型1、RPS6KA5或AURKB在Ser-29(H3S28ph)下磷酸化。 PRKCBB在Thr-7(H3T6ph)处的磷酸化是表观遗传转录激活的特异标记,可防止LSD1/KDM1A对Lys-5(H3K4me)的去甲基化。 在着丝粒处,DAPK3和PKN1在Thr-12(H3T11ph)从前期到后期的早期特异性磷酸化。 PKN1在Thr-12(H3T11ph)处的磷酸化是促进KDM4C/JMJD2C对Lys-10(H3K9me)去甲基化的表观遗传转录激活的特异标记。 JAK2在Tyr-42(H3Y41ph)处的磷酸化促进CBX5(HP1α)从染色质中排除。 RAG1在淋巴细胞中单泛素化,V(D)J重组需要单泛素(根据相似性)。 CUL4-DDB-RBX1复合物对紫外线照射的反应中泛素化。 这可能会削弱组蛋白和DNA之间的相互作用,并促进DNA可接近性以修复蛋白质。 -
手机定位 核心。 染色体。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 8350 人类 Entrez基因: 8351 人类 Entrez基因: 8352 人类 Entrez基因: 8353 人类 Entrez基因: 8354 人类 Entrez基因: 8355 人类 Entrez基因: 8356 人类 Entrez基因: 8357 人类
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替代名称 H3组蛋白家族成员E假基因抗体 H3组蛋白家族成员A抗体 H3/A抗体
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图像
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该数据是使用相同的抗体克隆在仅含有PBS的不同缓冲液配方中得出的( ab238673型 ). ab238673型 HeLa细胞组蛋白H3(磷酸化S10)染色。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下将细胞培养过夜 ab238673型 在5µg/ml和 ab6046年 ,兔多克隆到β-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 ab150117号 小鼠IgG H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 488)以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 约150080 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 594),稀释度为1/1000(以伪品红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用100%甲醇固定的电池(5分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
在Leica Bond上进行的人类肾脏福尔马林固定石蜡包埋组织切片中ab14955染色组蛋白H3(磷酸S10)的IHC图像。 用柠檬酸钠缓冲液(pH 6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下用1µg/ml的ab14955培养该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 阴性对照组未使用一级抗体(如插图所示)。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
ab14955染色HeLa细胞组蛋白H3(磷酸化S10)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%PBS-Tween渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后在4°C下用1µg/ml的ab14955培养细胞过夜 ab6046年 ,兔多克隆到β-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 ab150117号 小鼠IgG H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 488)以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 约150080 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 594),稀释度为1/1000(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用100%甲醇固定的电池(5分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
所有车道: 1µg/ml时抗-Histone H3(磷酸化S10)抗体[mAbcam 14955](ab14955) 车道1: 对照HeLa组蛋白制剂 车道2: Colcemid处理的HeLa组蛋白制剂 3号车道: 含有人组蛋白H3(三甲基K9,磷酸S10)肽的对照HeLa组蛋白制剂( 约15644 )浓度为1µg/ml 车道4: 用人组蛋白H3(三甲基K9,磷酸化S10)肽经Colcemid处理的HeLa组蛋白制剂( 约15644 )浓度为1µg/ml 车道5: 对照HeLa组蛋白制剂 人类组蛋白H3(未修饰)肽( 约7228 )浓度为1µg/ml 车道6: Colcemid处理的HeLa组蛋白制剂 人类组蛋白H3(未修饰)肽( 约7228 )浓度为1µg/ml 7号车道: 用人类组蛋白H3(磷酸S10)肽控制HeLa组蛋白制备( 约11477 )浓度为1µg/ml 第8车道: 用人组蛋白H3(磷酸化S10)肽经Colcemid处理的HeLa组蛋白制剂( 约11477 )浓度为1µg/ml 9号车道: 用人类组蛋白H3(磷酸化S28)肽控制HeLa组蛋白制备( 约14793 )浓度为1µg/ml 10号车道: 用人组蛋白H3(磷酸化S28)肽经Colcemid处理的HeLa组蛋白制剂( 约14793 )浓度为1µg/ml 每车道0.5µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 1/5000稀释的兔多克隆至小鼠IgG H&L(HRP) 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
ab14955(1/1000)染色组蛋白H3(磷酸化S10)阳性的HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞群。 细胞被胰蛋白酶化、造粒并固定在冰镇乙醇中。 清除细胞碎片,并使用FL2-A/FL2-W清除结块细胞。 有关更多实验细节,请参阅abreview。 -
流式细胞仪斑点图显示HeLa细胞用ab14955染色(红线)。 细胞用100%乙醇固定。 细胞在含有10%正常山羊血清的1x PBS中孵育,以阻断抗体(ab14955)(1x 10 6 100μl,1μg/ml(1/500)),22°C,30分钟。 二级抗体山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 488,预吸附)( ab150117号 )在22°C的1/4000下使用30分钟。 DNA染色采用RNase A(250μg/ml)预培养,然后进行DAPI。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和525/40带通滤波器采集了超过5000个事件。 -
通过ELISA,ab14955检测: 单修饰的磷酸S10肽和双修饰的磷酸S10和三甲基K9肽(分别为橙色和灰色线条), 对磷酸化S28肽的检测较弱(紫色线), 未检测到S10的等效非修饰组蛋白H3肽或单一修饰的三甲基K9肽(图底部的2行)。 抗体通过ELISA识别磷酸S28(尽管磷酸S28肽在Western blotting中不会阻断抗体)。 -
所有车道: 抗-Histone H3(磷酸化S10)抗体[mAbcam 14955](ab14955),1/2000稀释 车道1: 未经处理的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞系)细胞裂解物 车道2: 用花萼蛋白A处理的HeLa细胞裂解液 3号车道: 用萼蛋白A和碱性磷酸酶处理HeLa细胞裂解液 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP山羊抗兔(H+L)1/20000稀释 预测的带宽大小: 15千Da 暴露时间: 1秒 -
所有车道: 0.5µg/ml的抗组蛋白H3(磷酸S10)抗体[mAbcam 14955](ab14955) 车道1: 对照HeLa组蛋白制备 车道2: 肝素治疗的HeLa组蛋白制剂 3号车道: 对照HeLa组蛋白制剂 人类组蛋白H3(未修饰)肽( 约7228 )浓度为1µg/ml 车道4: 用Colecemid处理的HeLa组蛋白制剂 人类组蛋白H3(未修饰)肽( 约7228 )浓度为1µg/ml 车道5: 用人类组蛋白H3(磷酸化S28)肽控制HeLa组蛋白制备( 约14793 )浓度为1µg/ml 车道6: 用人组蛋白H3(磷酸化S28)肽经鞘氨醇处理的HeLa组蛋白制剂( 约14793 )浓度为1µg/ml 7号车道: 用人类组蛋白H3(磷酸化S10)肽控制HeLa组蛋白制备( 约11477 )浓度为1µg/ml 第8车道: 用人组蛋白H3(磷酸化S10)肽经鞘氨醇处理的HeLa组蛋白制剂( 约11477 )浓度为1µg/ml 每车道5µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 兔抗鼠IgG H&L(HRP)( ab6728号 )稀释1/5000 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 20千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
所有车道: 抗-Histone H3(磷酸化S10)抗体[mAbcam 14955](ab14955),稀释度为1/1000 车道1: 野生型0-4小时龄果蝇胚胎裂解物 车道2: 0-4小时龄表达wee RNAi的果蝇胚胎裂解物 次要 所有车道: 抗鼠IgG,以1/10000稀释度进行过氧化物连接 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 暴露时间: 5秒 舞台调度: 10%英国标准协会 相对于野生型,小shRNA胚胎(泳道2)应显示出升高的磷酸化H3Ser10水平
数据表和文件
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数据表下载
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凯西文学硕士 等。 Shutdown corner是从斑马鱼单倍体突变筛选中分离出的一个大型缺失突变体。 G3(贝塞斯达) 12:不适用(2022年)。 公共医学:35079792 吴Q 等。 水平基底细胞中的YAP信号促进损伤后嗅上皮的再生。 干细胞报告 17:664-677 (2022). 公共医学:35148842 Teekakirikul P公司 等。 遗传弹性与显性致死性TPM1突变相关,导致具有高遗传力的房间隔缺损。 细胞代表医学 3:100501(2022年)。 公共医学:35243414 Nandamuri SP公司 等。 斑马鱼dzip1缺失导致眼周间质向视裂和眼缺损不适当募集。 公共科学图书馆一号 17:e0265327(2022)。 公共医学:35286359 Rekler D&Kalcheim C公司 神经嵴细胞生成和迁移的完成受视黄酸依赖性BMP信号抑制的调节。 埃利夫 11:不适用(2022年)。 公共医学:35394423