主要功能和细节
兔多克隆到组蛋白H3(二甲基K79)-ChIP级 适用人群:ChIP、WB、ICC/IF、IHC-P、PepArr 反应对象:老鼠、奶牛、人类 同位素:IgG
使用重组抗体获得更好的批间重现性
充满信心的研究——每批产品的结果一致且可重复 长期和可扩展的供应–由重组技术提供动力,实现快速生产 第一次实验的成功——通过广泛验证证实了特异性 符合道德标准–生产无动物
概述
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产品名称 -
描述 兔多克隆到组蛋白H3(二甲基K79)-ChIP级 -
寄主物种 兔子 -
特异性 ab3594在单通道Western Blot中检测到17kDa频带。 Western Blot中的肽抑制尚未处理。 修饰特异性由肽阵列决定。 ab3594与组蛋白H3二甲基K79强烈结合。 在肽阵列中,ab3594还部分与单甲基K79和三甲基K79肽结合。 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠、奶牛、人类 预计用于: 猪、酿酒酵母、秀丽隐杆线虫、多种其他物种、哺乳动物、丝虫、小麦 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 ICC/IF:HeLa和HepG2细胞
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一般注意事项 了解ChIP检测试剂盒、其他ChIP抗体、协议等 ChIP分析指南 . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS 浓度<1mg/ml的该产品批次可添加BSA作为稳定剂。 如果您想了解有关特定批次配方的信息,请联系我们的科学支持团队,他们将乐于提供帮助。 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 免疫原亲和纯化 -
克隆性 多克隆 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
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ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
控制肽 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
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应用
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目标
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功能 核小体的核心成分。 核小体将DNA包裹并压缩成染色质,限制了需要DNA作为模板的细胞机制对DNA的访问。 因此,组蛋白在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥着核心作用。 DNA可及性是通过组蛋白的一系列复杂的翻译后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节的。 -
序列相似性 属于组蛋白H3家族。 -
发育阶段 在S期表达,然后随着分化过程中细胞分裂减慢,表达强烈下降。 -
翻译后 修改 乙酰化通常与基因激活有关。 赖氨酸-10(H3K9ac)上的乙酰化损害精氨酸-9(H3R8me2s)上的甲基化。 Lys-19(H3K18ac)和Lys-24(H3K24ac)上的乙酰化有利于Arg-18(H3R17me)上的甲基化。 PADI4对Arg-9(H3R8ci)和/或Arg-18(H3R17ci)的瓜氨酸化损害甲基化并抑制转录。 CARM1在Arg-18(H3R17me2a)处的不对称二甲基化与基因激活有关。 PRMT5在Arg-9(H3R8me2s)处的对称二甲基化与基因抑制有关。 PRMT6在Arg-3(H3R2me2a)处的不对称二甲基化与基因抑制有关,并且与H3 Lys-5甲基化(H3K4me2和H3K4me3)相互排斥。 H3R2me2a存在于基因的3'处,无论其转录状态如何,它在非活性启动子上富集,而在活性启动子中不存在。 Lys-5(H3K4me)、Lys-37(H3K36me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化与基因激活有关。 Lys-5(H3K4me)的甲基化促进H3和H4的后续乙酰化。 Lys-80甲基化(H3K79me)与DNA双链断裂(DSB)反应相关,是TP53BP1的特异靶点。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化与基因抑制有关。 Lys-10的甲基化(H3K9me)是HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)的特异性靶标,并阻止随后Ser-11的磷酸化(H3S10ph)和H3和H4的乙酰化。 Lys-5(H3K4me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化需要H2B在“Lys-120”的初步单泛素化。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化富集在非活性X染色体染色质中。 前期GSG2/haspin在Thr-4(H3T3ph)下磷酸化,后期去磷酸化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化对有丝分裂和减数分裂期间的染色体凝聚和细胞周期进展至关重要。 此外,RPS6KA4和RPS6KA5在Ser-11(H3S10ph)处的磷酸化在间期很重要,因为它能够在外界刺激后转录基因,如丝裂原、应激、生长因子或紫外线照射,并导致基因的激活,如c-fos和c-jun, 与基因激活相关,防止Lys-10(H3K9me)甲基化,但促进H3和H4的乙酰化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化介导HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)与异染色质的分离。 Ser-11的磷酸化(H3S10ph)也是肿瘤细胞转化的重要调节机制。 在有丝分裂期间或紫外线B照射下,MLTK亚型1、RPS6KA5或AURKB在Ser-29(H3S28ph)下磷酸化。 PRKCBB在Thr-7(H3T6ph)处的磷酸化是表观遗传转录激活的特异标记,可防止LSD1/KDM1A对Lys-5(H3K4me)的去甲基化。 在着丝粒处,DAPK3和PKN1在Thr-12(H3T11ph)从前期到后期的早期特异性磷酸化。 PKN1在Thr-12(H3T11ph)处的磷酸化是促进KDM4C/JMJD2C对Lys-10(H3K9me)去甲基化的表观遗传转录激活的特异标记。 JAK2在Tyr-42(H3Y41ph)处的磷酸化促进CBX5(HP1α)从染色质中排除。 RAG1在淋巴细胞中单泛素化,V(D)J重组需要单泛素(根据相似性)。 CUL4-DDB-RBX1复合物对紫外线照射的反应中泛素化。 这可能会削弱组蛋白和DNA之间的相互作用,并促进DNA可接近性以修复蛋白质。 -
手机定位 核心。 染色体。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 8350 人类 Entrez基因: 8351 人类 Entrez基因: 8352 人类 Entrez基因: 8353 人类 Entrez基因: 8354 人类 Entrez基因: 8355 人类 Entrez基因: 8356 人类 Entrez基因: 8357 人类
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替代名称 H3组蛋白家族成员E假基因抗体 H3组蛋白家族成员A抗体 H3/A抗体
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图像
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所有车道: 抗-Histone H3(二甲基K79)抗体-ChIP等级(ab3594),1µg/ml 车道1: 0.5µg的CTH(小牛胸腺组蛋白) 车道2: 10µg NIH 3T3核裂解物(富含Triton®声波风廓线仪) 次要 所有车道: 山羊多克隆至兔IgG-H&L-Pre-Adsorbed(HRP),稀释度为1/50000 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 1分钟 凝胶类型: 人工编码站 阻塞缓冲区: 2%英国标准协会 -
根据Abcam X-ChIP协议,从U-2 OS(人类骨肉瘤上皮细胞系)细胞制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。用25µg染色质、2µg ab3594(蓝色)和20µl蛋白A/g sepharose珠进行ChIP。 未向珠子对照组(黄色)添加抗体。 用实时PCR(Taqman方法)定量免疫沉淀DNA。 引物和探针位于转录区的第一kb。 -
H3K79me2抗体特异性验证。 商用H3K79me2一级抗体与(+)或不与(−)抗原肽(Abcam,目录号。 ab4556型 ,v/v=5:1)在室温下培养1.5小时,然后与IVF猪囊胚孵育。 使用未吸收的一抗在囊胚中观察到H3K79me2信号。 相比之下,使用预先吸收的一抗,囊胚中没有H3K79me2信号。 H3K79me2抗体用Alexa Flour 488-结合二级抗体(绿色)定位。 DNA用碘化丙啶(红色)染色。 底部面板显示H3K79me2信号(绿色)和DNA染色(红色)之间的合并图像(黄色)。 比例尺=50μm。 -
抗组蛋白H3(二甲基K79)抗体-20µg ChIP级(ab3594)+20µg HeLa细胞裂解物 次要 HRP-结合山羊抗兔IgG多克隆(1/2000稀释) 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 15千Da 暴露时间: 1分钟
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人乳腺癌FFPE切片组蛋白H3(二甲基K79)染色的IHC图像,在Bond上进行 TM(TM) 系统使用标准方案F。使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)热介导抗原检索对切片进行预处理20分钟。 然后在室温下用1µg/ml的ab3594培养切片8分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统检测。 DAB被用作发色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 -
ab3594染色HeLa细胞组蛋白H3(二甲基K79)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用ab3594以0.1µg/ml和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 488),以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 ab150120型 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
抗-Histone H3(二甲基K79)抗体-ChIP等级(ab3594),1µg/ml+小牛胸腺组蛋白制备核裂解物( ab121号 )0.5微克 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/10000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 30秒 -
在HeLa(人上皮腺癌细胞系)细胞核裂解物中使用ab3594结合组蛋白H3的ChIP分析。 细胞与甲醛交联10分钟。 将样品与一级抗体(5µg/µg染色质)在4°C下孵育12小时。 采用实时PCR检测蛋白质结合。 阳性对照:转录基因5'UTR。 阴性对照:基因间区。
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
参考文献 (221)
库拉尼H 等。 DOT1L是一种治疗三阴性乳腺癌的新型癌症干细胞靶点。 临床癌症研究 28:1948-1965 (2022). 公共医学:35135840 楚L 等。 衰老相关分泌表型的诱导是抑制PRC2治疗癌症疗效的基础。 细胞死亡病 13:155 (2022). 公共医学:35169119 Si Y公司 等。 一种识别组蛋白甲基转移酶抑制剂的新筛选策略揭示了DOT1L和CARM1之间的串扰。 RSC化学生物 3:456-467 (2022). 公共医学:35441144 林H 等。 组蛋白甲基转移酶DOT1L对生殖系干细胞的自我更新至关重要。 基因开发 36:752-763 (2022). 公共医学:35738678 森田K 等。 在常氧条件下,使用DAPT和iDOT1L进行RNA重编程,有效地重编程人类成纤维细胞。 再生热 21:389-397 (2022). 公共医学:36196449