主要功能和细节
兔多克隆到组蛋白H3(二甲基K4)-ChIP级 适用人群:ChIP、WB、PepArr、ICC/IF 反应对象:小鼠、大鼠、奶牛、人类 同位素:IgG
使用重组抗体获得更好的批间重现性
充满信心的研究——每批产品的结果一致且可重复 长期和可扩展的供应–由重组技术提供动力,实现快速生产 第一次实验的成功——通过广泛验证证实了特异性 符合道德标准–生产无动物
概述
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产品名称 -
描述 兔多克隆到组蛋白H3(二甲基K4)-ChIP级 -
寄主物种 兔子 -
特异性 从2024年1月起,该多克隆补货批次的QC测试发生了变化。 我们的Abcam产品承诺仍涵盖所有测试和预期的应用和反应性物种组合。 然而,我们不再测试所有应用程序。 有关特定批次的更多信息,请联系我们的科学支持人员,他们会很乐意提供帮助。 您可能也对我们的替代重组抗体感兴趣, 约176878 . -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 小鼠、大鼠、奶牛、人类 预计使用: 猪、酿酒酵母、四膜虫、果蝇、裂殖酵母、哺乳动物、恶性疟原虫、普通绒猴、白色念珠菌 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 (肽可用作 约7768 ) -
阳性对照 ChIP:由HeLa细胞制备的染色质。 WB:HeLa、NIH/3T3和PC12核裂解物(富含氚)。 小牛胸腺组蛋白制备核裂解物。 ICC/IF:HeLa细胞。
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一般注意事项 用于检测在Lys 4位置特异甲基化的组蛋白H3。 多佛等人(2002年)在筛选中使用了这种抗体来分离不能甲基化赖氨酸4的酵母突变体。 在免疫荧光中,该抗体检测细胞核中与浓缩染色质非共定位的病灶。 核周和核周异染色质未被该抗体染色。 了解ChIP检测试剂盒、其他ChIP抗体、协议等 ChIP分析指南 . 多年来,生命科学行业一直处于再现性危机之中。 Abcam通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系,在解决这一问题方面处于领先地位。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS 浓度<1mg/ml的该产品批次可添加BSA作为稳定剂。 如果您想了解特定批次的配方信息,请联系我们的科学支持团队,他们会很乐意提供帮助。 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 免疫原亲和力纯化 -
初级抗体注释 用于检测在Lys 4位置特异甲基化的组蛋白H3。 多佛等人(2002年)在筛选中使用了这种抗体来分离不能甲基化赖氨酸4的酵母突变体。 在免疫荧光中,该抗体检测细胞核中与浓缩染色质非共定位的病灶。 核周和核周异染色质未被该抗体染色。 -
克隆性 多克隆 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
多重免疫分析 -
重组蛋白 -
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应用
目标
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功能 核小体的核心成分。 核小体将DNA包裹并压缩成染色质,限制了需要DNA作为模板的细胞机制对DNA的访问。 因此,组蛋白在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥着核心作用。 DNA可及性是通过组蛋白的一系列复杂的翻译后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节的。 -
序列相似性 属于组蛋白H3家族。 -
发育阶段 在S期表达,然后随着分化过程中细胞分裂减慢,表达强烈下降。 -
翻译后 修改 乙酰化通常与基因激活有关。 Lys-10(H3K9ac)上的乙酰化破坏Arg-9(H3R8me2s)的甲基化。 Lys-19(H3K18ac)和Lys-24(H3K24ac)上的乙酰化有利于Arg-18(H3R17me)上的甲基化。 PADI4在Arg-9(H3R8ci)和/或Arg-18(H3R17ci)处的瓜氨酸化会损害甲基化并抑制转录。 CARM1在Arg-18(H3R17me2a)处的不对称二甲基化与基因激活有关。 PRMT5在Arg-9(H3R8me2s)处的对称二甲基化与基因抑制有关。 PRMT6在Arg-3(H3R2me2a)处的不对称二甲基化与基因抑制有关,并且与H3 Lys-5甲基化(H3K4me2和H3K4me3)相互排斥。 H3R2me2a存在于基因的3'处,无论其转录状态如何,它在非活性启动子上富集,而在活性启动子中不存在。 Lys-5(H3K4me)、Lys-37(H3K36me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化与基因激活有关。 Lys-5(H3K4me)的甲基化促进H3和H4的后续乙酰化。 Lys-80甲基化(H3K79me)与DNA双链断裂(DSB)反应相关,是TP53BP1的特异靶点。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化与基因抑制有关。 Lys-10的甲基化(H3K9me)是HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)的特异性靶标,并阻止随后Ser-11的磷酸化(H3S10ph)和H3和H4的乙酰化。 Lys-5(H3K4me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化需要H2B在“Lys-120”的初步单泛素化。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化富集在非活性X染色体染色质中。 前期GSG2/haspin在Thr-4(H3T3ph)下磷酸化,后期去磷酸化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化对有丝分裂和减数分裂期间的染色体凝聚和细胞周期进展至关重要。 此外,RPS6KA4和RPS6KA5在Ser-11(H3S10ph)处的磷酸化在间期很重要,因为它能够在外界刺激后转录基因,如丝裂原、应激、生长因子或紫外线照射,并导致基因的激活,如c-fos和c-jun, 与基因激活相关,防止Lys-10(H3K9me)甲基化,但促进H3和H4的乙酰化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化介导HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)与异染色质的分离。 Ser-11的磷酸化(H3S10ph)也是肿瘤细胞转化的重要调节机制。 在有丝分裂期间或紫外线B照射下,MLTK亚型1、RPS6KA5或AURKB在Ser-29(H3S28ph)下磷酸化。 PRKCBB在Thr-7(H3T6ph)处的磷酸化是表观遗传转录激活的特异标记,可防止LSD1/KDM1A对Lys-5(H3K4me)的去甲基化。 在着丝粒处,DAPK3和PKN1在Thr-12(H3T11ph)从前期到后期的早期特异性磷酸化。 PKN1在Thr-12(H3T11ph)处的磷酸化是促进KDM4C/JMJD2C对Lys-10(H3K9me)去甲基化的表观遗传转录激活的特异标记。 JAK2在Tyr-42(H3Y41ph)处的磷酸化促进CBX5(HP1α)从染色质中排除。 RAG1在淋巴细胞中单泛素化,V(D)J重组需要单泛素(根据相似性)。 CUL4-DDB-RBX1复合物对紫外线照射的反应中泛素化。 这可能会削弱组蛋白和DNA之间的相互作用,并促进DNA对修复蛋白质的可及性。 -
手机定位 核心。 染色体。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 8350 人类 Entrez基因: 8351 人类 Entrez基因: 8352 人类 Entrez基因: 8353 人类 Entrez基因: 8354 人类 Entrez基因: 8355 人类 Entrez基因: 8356 人类 Entrez基因: 8357 人类
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替代名称 H3组蛋白家族成员E假基因抗体 H3组蛋白家族成员A抗体 H3/A抗体
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图像
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根据Abcam X-ChIP协议从HeLa细胞制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25µg染色质、2µg ab7766(蓝色)和20µl蛋白A/g sepharose珠进行ChIP。 未向珠子对照组(黄色)添加抗体。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(Taqman方法用于活性和非活性位点,Sybr green方法用于异色位点)进行定量。 引物和探针位于转录区的第一kb。 -
在肽阵列中对所有批次的ab7766进行测试,以对抗不同组蛋白H3修饰的肽。 将每种肽的六份稀释液打印到肽阵列上,一式三份,并将结果平均后绘制到图表上。 结果显示与组蛋白H3-二甲基K4肽的强结合( 约7768 ),表明该抗体特异性识别组蛋白H3-二甲基K4修饰。 -
ab7766染色HeLa细胞组蛋白H3(二甲基K4)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用ab7766以5µg/ml和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 488),以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 ab150120型 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以假彩色红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用100%甲醇固定的电池(5分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
二甲基赖氨酸4(绿色)存在于数百个不与染色质浓缩区共定位的小核病灶中(DAPI染色,红色)。 核周和核周异染色质不会被该抗体染色。 -
抗-Histone H3(二甲基K4)抗体-ChIP级(ab7766),浓度为1µg/ml+小牛胸腺组蛋白制备核裂解物( ab121号 )0.5微克 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)预吸附( 约97080 )稀释1/5000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 14kDa。 我们不确定这些额外波段的身份。 暴露时间: 4分钟 -
用ICC/IF对人U2OS(骨肉瘤)细胞进行ab7766的1/200染色,多聚甲醛固定细胞,然后用抗体染色1h。 使用Cy2®结合的驴抗兔抗体作为次级(绿色)。 图像显示了整个细胞核的均匀染色,发现了几个斑点。 插入物仅显示tw2细胞的H3-二甲基K4。 DAPI核染色显示为蓝色。 -
所有车道: 抗-Histone H3(二甲基K4)抗体-ChIP等级(ab7766),1µg/ml 车道1: HeLa核裂解物(富含氚) 车道2: NIH 3T3核裂解物(富含氚) 3号车道: PC12核裂解物(富含氚 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊多克隆至兔IgG-H&L-Pre-Adsorbed(HRP),稀释度为1/50000 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭缓冲液:2%BSA 凝胶类型:MES 曝光时间:1分钟
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (304)
胡R 等。 LSD1的NR2E1相互作用肽抑制脑肿瘤起始细胞的增殖。 细胞Prolif 56:e13350(2023)。 公共医学:36321378 巴索姆M 等。 组蛋白H3K4甲基转移酶复合物Ash2l亚基的缺失降低启动子处的染色质可及性。 科学代表 12:21506 (2022). 公共医学:36513698 Kerschbamer E公司 等。 CHD8抑制影响组蛋白H3赖氨酸36三甲基化并改变RNA选择性剪接。 核酸研究 50:12809-12828 (2022). 公共医学:36537238 芬克洛娃 等。 双酚类作为男性特发性不孕病因的护理暴露。 前生理学 13:725442 (2022). 公共医学:35283775 Matsuo M公司 等。 HTLV-1前病毒基因组中新增强子的鉴定和表征。 国家公社 13:2405(2022)。 公共医学:35504920