主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 组蛋白H2A的兔单克隆[EPR22820-23]。 X-ChIP等级 适用人群:PepArr、ChIP、ICC/IF、Flow Cyt(Intra)、WB、IHC-P、IP 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 组蛋白H2A的兔单克隆[EPR22820-23]。 X-ChIP等级 -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:野生型HAP1整体、人脑、HeLa、293T和HEK-293裂解物。 IHC-P:人类乳腺癌和人类睾丸组织。 ICC/IF:HeLa细胞。 流动Cyt(内部):HeLa细胞。 IP:HeLa细胞。
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一般注意事项
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、0.05%BSA、40%甘油(甘油、甘油) -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 EPR22820-23型 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同种型对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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目标
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功能 变异组蛋白H2A取代核小体子集中的常规H2A。 核小体将DNA包裹并压缩成染色质,限制了需要DNA作为模板的细胞机制对DNA的访问。 因此,组蛋白在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥着核心作用。 DNA可及性是通过组蛋白的一系列复杂的翻译后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节的。 用于检查点介导的细胞周期进程阻滞,以应对低剂量电离辐射,以及有效修复DNA双链断裂(DSB),特别是当被C末端磷酸化修饰时。 -
序列相似性 属于组蛋白H2A家族。 -
发育阶段 在G1期和S期合成。 -
域 [ST]-Q基序构成PI3/PI4激酶家族激酶的识别序列。 -
翻译后 修改 在Ser-140上磷酸化(形成γ-H2AFX或H2AX139ph),以响应外源性基因毒性试剂和停滞的复制叉产生的DNA双链断裂(DSB),也可能发生在淋巴细胞减数分裂重组事件和免疫球蛋白类转换期间。 磷酸化可以从DSB的实际位置延伸到数千个核小体,并可能标记周围的染色质,以补充DNA损伤信号和修复所需的蛋白质。 广泛的磷酸化也可能有助于放大损伤信号或帮助修复持续性损伤。 在电离辐射下,Ser-140(H2AX139ph)的磷酸化反应由ATM和PRKDC介导,而DNA复制缺陷在激活ATR和PRKDC后诱导Ser-140磷酸化(H2AX39ph)。 DNA DSB修复需要PP2A对Ser-140进行去磷酸化。 在减数分裂过程中,作为对SPO11形成程序性DSB的ATM依赖性反应,精蛋白期间可能在联会复合体发生Ser-140磷酸化(H2AX139ph)。 随后,在ATR和BRCA1激活下游的合子烯期间,常染色体和XY二价体的非同步区域可能发生Ser-140磷酸化(H2AX139ph)。 Ser-140磷酸化(H2AX139ph)也可能需要用于非染色质的转录抑制和减数分裂性染色体失活(MSCI),从而X和Y染色体在粗线期浓缩形成异色XY-体。 在淋巴细胞中的免疫球蛋白类开关重组期间,激活诱导的胞苷脱氨酶AICDA激活后,在DNA重组位点可能发生Ser-140磷酸化(H2AX139ph)。 BAZ1B/WSTF在Tyr-143(H2AXY142ph)处的磷酸化决定了DNA修复或促凋亡因子的相对补充。 Tyr-143的磷酸化(H2AXY142ph)有利于APBB1/FE65和促凋亡因子(如MAPK8/JNK1)的募集,从而触发凋亡。 相反,EYA蛋白(EYA1、EYA2、EYA3或EYA4)对Tyr-143的去磷酸化有助于在磷酸化Ser-140(H2AX139ph)的尾部招募含MDC1的DNA修复复合物。 RING1和RNF2/RING2复合物对Lys-120(H2AXK119ub)的单泛素化为表观遗传转录抑制提供了一个特定的标记。 在DNA双链断裂(DSBs)之后,它通过E2连接酶UBE2N和E3连接酶RNF8和RNF168的泛素部分的“Lys-63”连接被泛素化,导致修复蛋白募集到DNA损伤位点。 单泛素化和电离辐射诱导的“Lys-63”连接泛素化是不同的事件。 -
手机定位 核心。 染色体。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 AW228881抗体 H2A组蛋白家族成员X抗体 H2A。 FX抗体
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图像
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所有车道: 抗-Histone H2A。 X抗体[EPR22820-23]-ChIP等级(ab229914),稀释度为1/1000 车道1: 人脑组织裂解物 车道2: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞),全细胞裂解物 3号车道: 293T(人胚胎肾上皮细胞),全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 车道1: 在1/1000稀释度下检测IP二级抗体(HRP)的VeriBlot 2-3车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )1/100000稀释(山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合) 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 16.25千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 该印迹是使用更高灵敏度的ECL底物开发的。 -
标记组蛋白H2A的4%对甲醛固定的0.1%TritonX-100透化HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞的免疫荧光分析。 X与ab229914以1/100稀释,然后是ab229914抗组蛋白H2A。 X(X) 约150077 AlexaFluor公司 ® 488羊抗兔二级抗体,稀释度为1/1000(绿色)。 共聚焦图像显示HeLa细胞系的核染色。 Ab195889抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor ® 594)用于在1/200稀释度下对微管蛋白进行复染(红色)。 核染色为DAPI(蓝色)。 仅二级抗体对照:二级抗体为 约150077 AlexaFluor公司 ® 488羊抗兔二次稀释1/1000。 -
根据Abcam X-ChIP协议*从HeLa细胞制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25微克染色质、5微克ab229914(红色)或5微克兔正常IgG进行ChIP 约172730 (灰色)和20µl蛋白A/G琼脂糖凝胶珠。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(Taqman方法用于活性和非活性位点,Sybr green方法用于异色位点)进行定量。 引物和探针位于转录区的第一kb。 * http://www.abcam.com/resources?keywords=X%20ChIP%20protocol。 -
所有批次的ab229914在肽阵列中测试501种不同的修饰和未修饰组蛋白肽; 每个肽以六种浓度打印在阵列上(每种浓度一式三份)。 圆圈区域表示抗体和肽之间的亲和力:所有含抗原肽显示为红色圆圈,所有其他肽显示为蓝色圆圈。 当抗体结合值相对于相应的肽浓度绘制时,亲和力计算为曲线下面积。 每个圆圈区域归一化为亲和力最强的肽。 可以下载完整的数据集,包括所有肽的完整列表和图中每个肽的位置信息 在这里 . -
抗-Histone H2A。 X抗体[EPR22820-23]-1/1000稀释时的ChIP等级(ab229914)+HEK-293(人类胚胎肾上皮细胞),组蛋白提取物20µg 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 16,25千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 25-kDa带,可能是泛素化H2A。 十、 观察到。 分子量与文献中描述的一致(PMID:24603765) -
所有车道: 抗-Histone H2A。 X抗体[EPR22820-23]-ChIP等级(ab229914),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: 组蛋白H2A。 X敲除HAP1全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 16千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Ab229914被证明与组蛋白H2A特异性反应。 X在野生型HAP1细胞中作为信号在组蛋白H2A中丢失。 X敲除细胞。 野生型和组蛋白H2A。 对X个敲除样品进行SDS-PAGE。 ab229914和 约181602 (兔抗GAPDH负荷对照)分别在室温下以1/1000稀释度和1/200000稀释度孵育1小时。 用山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶偶联物开发印迹( ab97051型 )二级抗体在成像前在室温下以1/100000稀释1小时。 使用ECL技术在BIO-RAD®ChemiDoc™MP仪器上开发印迹。 封闭/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST暴露时间:37秒
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
合格证书
工具书类 (13)
马赫 等。 HMGB3通过与卵巢癌中的PARP1相互作用促进PARP抑制剂耐药性。 细胞死亡病 13:263 (2022). 公共医学:35332131 焦W 等。 ZSTK474通过阻断同源重组修复使胶质母细胞瘤对替莫唑胺敏感。 生物识别识别 2022:8568528 (2022). 公共医学:35872860 风扇J 等。 溶瘤性单纯疱疹病毒和替莫唑胺在体内外协同抑制乳腺癌细胞的肿瘤发生。 Oncol Lett公司 21:99 (2021). 公共医学:33376532 吕M&刘Q JMJD2C通过激活ß-catenin触发多发性骨髓瘤细胞的生长。 及国际医学权威期刊 45:1162-1170 (2021). 公共医学:33469678 蔡T 等。 三七皂苷R1通过PHF6蛋白诱导DNA损伤,抑制宫颈癌细胞增殖。 分子医学代表 23:不适用(2021年)。 公共医学:33537816