主要功能和细节
分析类型:基于细胞(定量) 检测方法:比色法 平台:缩微板阅读器 分析时间:3小时 样品类型:粘附细胞、悬浮细胞 灵敏度:0.01 nmol/孔
概述
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产品名称 -
检测方法 比色法 -
样品类型 粘附细胞、悬浮细胞 -
分析类型 基于细胞(定量) -
敏感 <=0.01 nmol/孔 -
检测时间 3小时 00米 -
物种反应性 与以下物质反应: 哺乳动物,其他物种 -
产品概述 葡萄糖摄取测定试剂盒(比色法)(ab136955)是一种高度敏感且易于使用的非放射性测定试剂盒,可检测各种细胞类型中低至10 pmol/孔的葡萄糖摄取。
2-脱氧葡萄糖(2-DG)因其与葡萄糖的结构相似而被用于葡萄糖摄取分析方案。 2-DG被葡萄糖转运蛋白吸收并代谢为2-DG-6-磷酸(2-DG6P)。 2-DG6P无法进一步代谢,因此在细胞内积累。 累积的2-DG6P与细胞对2-DG(或葡萄糖)的摄取成正比。 在该测定中,2-DG6P被氧化以产生NADPH,其水平可以通过酶循环扩增反应来确定。
葡萄糖摄取分析方案总结: -根据实验设置,制备具有适当葡萄糖饥饿/摄取刺激的细胞 -向细胞中添加2-DG,并在37℃下培养20分钟 -用PBS清洗细胞以去除外源性2-DG -带有提取缓冲液和重复移液的溶血细胞 -冷冻/解冻裂解物并在85ºC下加热40分钟 -在冰上冷却5分钟 -添加中和缓冲液,旋转并将上清液转移到新试管中 -向井中添加上清液和标准液 -添加反应混合物A并在37ºC下孵育1小时 -添加萃取缓冲液并加热至90ºC 40分钟 -在冰上冷却5分钟并添加中和缓冲液 -添加反应混合物B -在37ºC的动力学模式下,每2-3分钟在微孔板阅读器上进行一次分析 测试 -
笔记 该产品由Abcam公司BioVision制造,之前称为K676葡萄糖摄取比色测定试剂盒。 K676-100与ab136955的100测试尺寸相同。 查看我们的 代谢分析指南 了解代谢产物、代谢酶、线粒体功能和氧化应激的检测,以及如何使用平板阅读器检测活细胞的代谢功能。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 -
平台 缩微板阅读器
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