抗GFAP抗体(AB7260)

兔多克隆GFAP抗体。在WB、IHC、ICC、ICC/IF中进行验证,并在小鼠、大鼠、猫、狗、人、普通狨猴中进行测试。在343个出版物中引用。在92次审查中独立审查。

简介

  • 产品名称

  • 描述

    兔GFAP多克隆
  • 寄主种

    兔子
  • 特异性

    特异性地识别哺乳动物GFAP在Western印迹和免疫细胞化学。检测一个对应于GFAP的55 kDa带和一个GFAP衍生的48 kDa带。一些客户已经成功地在斑马鱼裂解物上使用了AB7260;然而,我们有相互矛盾的数据表明,并非所有批次都适合于斑马鱼的工作。欲了解更多信息,请联系ABCAM科学支持。
  • 测试应用

    适用于:冰冻切片免疫复合物受体IHC FRFLICC/IF世界银行IHC-PIHC国际商会更多细节
  • 物种反应性

    与之反应:老鼠,猫,狗,人,普通狨猴
    预计工作:牛、猪、哺乳动物
  • 免疫原

    与人GFAP相对应的重组全长蛋白。同种型1在大肠杆菌中表达和纯化。

  • 阳性对照

    • IHC-P:FFPE鼠脑正常;FFPE大鼠脑正常。WB:大鼠和小鼠脑和脊髓裂解物。
  • 一般注释

    在某些情况下,抗体可能出现红色的颜色。这是由于少量溶血,并且不影响抗体的性能。

性能

应用

我们的保证担保覆盖使用AB7260在以下测试应用中。

应用注意事项包括推荐的起始稀释液;最佳稀释/浓度应由最终用户确定。

应用 退让 笔记
冰冻切片 1/5000。请参见ABREST。
免疫复合物受体 1/500。
IHC FRFL 使用依赖于测定的浓度。
ICC/IF 1/1000。
世界银行 1/10000。检测波段约为55,48 kDa。

这种低的48 kDa带被认为是降解产物。

IHC-P 1/1000—1/2000。用柠檬酸盐缓冲液pH 6进行热介导的抗原检索,然后用IHC染色方案开始。
IHC 1/100。
国际商会 1/5000。

目标

  • 功能

    GFAP,Ⅲ类中间丝,是一种细胞特异性标志物,在中枢神经系统发育过程中,区分星形胶质细胞与其他神经胶质细胞。
  • 组织特异性

    在缺乏纤维连接蛋白的细胞中表达。
  • 疾病参与

    GFAP中的缺陷是亚力山大病(AlxED)的一个原因[MIM:203450 ]。亚力山大病是一种罕见的中枢神经系统疾病。它是一种进行性白质脑病,其特征是星形胶质细胞中的细胞质夹杂物罗森塔尔纤维的广泛积累。最常见的形式影响婴幼儿,其特点是中央髓鞘渐进性衰竭,通常导致死亡通常在第一个十年之内。患有亚力山大病的婴儿发展为脑积水、脑积水、癫痫发作和精神运动迟缓。青少年或成人形式的患者通常经历共济失调、延髓症状和痉挛,并且进展较慢。
  • 序列相似性

    属于中间丝家族。
  • 翻译后的
    修改

    pKN1磷酸化。
  • 细胞定位

    细胞质。与中间丝相关。
  • UniProt信息
  • 数据库链接

  • 替代名称

    • WB:FB34 H11抗体
    • ALXDRD抗体
    • CB345抗体
    • EITD36982.3抗体
    • FLJ42474抗体
    • FLJ4402抗体
    • GFAP抗体
    • gfAPH-人抗体
    • GFAPL抗体
    • 胶质纤维酸性蛋白抗体
    • 中间丝蛋白抗体
    • WK:FK42C12抗体
    • X:AF50634抗体
    • ZGC:110485抗体
    查看全部

图像

  • GFAP抗体AB7260与组织清除试剂盒一起使用AB24329穿透、染色和清除小鼠大脑1毫米的冠状切片。蓝色:DAPI,Green:GFAP。

    了解更多关于组织清除试剂盒、试剂和协议旨在使较厚的组织切片更容易染色,并从每个有价值的组织切片中获得更多的数据。

    使用这种抗体与组织清除,使用组织清除试剂盒AB24329. 对于1毫米脑切片,我们建议开始稀释1:1000,并且还使用山羊抗兔IgG H&L AlEXAFRO848(AB1500稀释1∶400。

  • GFAP抗体-星形胶质细胞标记物(AB7260)在甲醛固定石蜡包埋猴脑切片中的免疫组化检测

    抗原检索步骤:热介导。缓冲液:柠檬酸PH6。通透:没有。阻断步骤:1% BSA 10 min @ 21°C,TBS/BSA/叠氮化物1/2000小时2小时,21℃孵育一次抗体。二抗:与生物素结合的抗兔IgG(1/200)。狨猴脑:星形胶质细胞清晰且强烈地标记。

    见复审

  • GFP染色在福尔马林固定,石蜡包埋的正常小鼠脑组织切片,在徕卡邦德系统上使用标准方案B进行。

    使用热介导的抗原检索,用柠檬酸钠缓冲液(pH 6,表位检索溶液1)对该段进行预处理20分钟。然后将该切片与AB7260在1/2000稀释下在室温下孵育15分钟。山羊抗兔生物素化的二级抗体用于检测原代,并使用HRP结合ABC系统进行可视化。使用DAB作为显色剂。然后切片用苏木精复染并装上DPX。

     

    对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原检索条件,一级抗体浓度和抗体孵育时间。

  • 脱髓鞘损伤后GFAP的增加与脊髓相比在脊髓中更大。

    显微照片显示GFAP或ALDH1L1在(A)胼胝体中的免疫反应性,或(B)在基线的成年小鼠背柱白质,以及在显微注射脱髓鞘剂溶血磷脂后14 d。直方图显示GFAP免疫荧光的面积百分比,GFAP/ALDH1L1+星形胶质细胞的表达,与溶血卵磷脂损伤后胼胝体14d相比,在脊髓中显著增加。

    用AB7260检测GFAP。

    (从胡恩等人的图4A和4B)

  • 2 Gy电离辐射(IR)后的细胞凋亡仅出现在含有祖细胞的2个子结构域中。

    图像显示GFAP +细胞(品红),Ki67 +细胞(红色),末端脱氧核苷酸转移酶介导的DUTP缺口末端标记(TUNEL)+细胞(绿色),DAPI染色(灰色)在4个子域。在S1E中给出单独的彩色通道。仅在背外侧和腹侧子域中观察到细胞凋亡。

    在1/500稀释液中用AB7260检测小鼠脑冷冻切片中的GFAP。

    (从巴拉佐等的图1D)

  • 免疫细胞化学/免疫荧光标记兔GFAP(红色通道)和鸡波形蛋白CPCA VIM(绿色通道)。成纤维细胞仅含有波形蛋白,因此是绿色的,而星形胶质细胞含有波形蛋白和GFAP,因此呈金黄色,或主要为GFAP,在这种情况下,它们呈红色。蓝色是细胞核DNA染色。

  • 所有车道:1/5000稀释的抗GFAP抗体(AB7260)

    第1巷:大鼠脑裂解液
    第2巷:大鼠脊髓裂解液
    第3巷:小鼠脑裂解液
    第4巷:小鼠脊髓裂解液
  • 所有车道:1/5000稀释的抗GFAP抗体(AB7260)

    车道1-3:大鼠开胸术,脊髓匀浆
    车道4-5:大鼠开胸假手术脊髓匀浆
    车道6-7:大鼠神经横断面假手术,脊髓匀浆
    车道8-9:大鼠神经横断面,脊髓匀浆

    裂解物/蛋白质,每车道30盎司。

    次要的
    所有车道:HRP结合山羊抗兔1/3000稀释液

    采用ECL技术开发。

    观察波段大小:53 kDa
    为什么实际频带大小与预测不同?


    曝光时间:1分钟

    见复审

  • AB7260用IHC-FR对1/5000只大鼠脊髓组织切片进行稀释染色。

    大鼠经皮灌注4% PFA。组织在4% PFA后固定1小时,然后用30%蔗糖固定三天。20μm切片为低温恒温器切片。将原代抗体与组织切片孵育18小时。用Alexa Furor检测结合抗体®488共轭山羊抗兔多克隆。

    见复审

  • IHC -大鼠视网膜组织标记GFAP(RED)与AB7260。样品在4°C与原代抗体(1/100)孵育18小时,以藻红蛋白结合山羊抗兔IgG单克隆抗体(1/1000)作为第二抗体。

    见复审

  • 1/5000稀释液+大鼠脑抗GFAP抗体(AB7260)
  • GFP染色在福尔马林固定,石蜡包埋的正常大鼠脑组织切片,在徕卡邦德系统上使用标准协议F进行。

    使用热介导的抗原检索,用柠檬酸钠缓冲液(pH 6,表位检索溶液1)对该段进行预处理20分钟。然后用AB7260在1/2000稀释液中孵育15分钟,在室温下用HRP共轭紧凑聚合物体系检测。使用DAB作为显色剂。然后切片用苏木精复染并装上DPX。

     

    对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原检索条件,一级抗体浓度和抗体孵育时间。

  • AB7260通过ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)在小鼠脑组织切片中染色GFAP。

    用多聚甲醛固定细胞,用0.1%吐温20在PBS中通透,25℃下用1% BSA封闭40分钟。样品在4°C孵育24小时,山羊抗兔IgG H&L(DyLoT)。®488)AB9683在稀释度为1/200的情况下用作二级抗体。

    见复审

  • AB7260通过免疫细胞化学法对1/10000小鼠大脑皮质星形胶质细胞进行稀释染色。

    在初步应用之前,用Triton/HEPES缓冲液对细胞进行渗透。将抗体与细胞孵育18小时,然后用Alexa Furor检测结合抗体。®488共轭山羊抗兔抗体。

    这张图片是由一份由Charmaine Noonan。

    见复审

  • AB7260通过IHC-P染色大鼠脑组织切片。

    在甲醛与AB7260孵育之前,用甲醛固定并用可阻断的阻断剂,在4°C稀释1/5000小时20小时,用HRP结合的小鼠多克隆(通用HRP聚合物检测)抗体作为辅助物。

    见复审

  • 用AB7260对大鼠小脑匀浆进行Western blot,稀释1∶10 000。具有明显的SDS-PAGE分子量为55 kDa的显性带对应啮齿动物GFAP。在-48 kDa的低频带是由GFAP分子衍生而来的。

  • 甲醛固定石蜡包埋的犬神经组织切片的免疫组化分析,用AB7260标记GFAP,在1/1000°C. Antigen回收液中孵育90分钟,用10mM柠檬酸盐pH6.0(热介导)。10%℃培养30分钟,C. Secondary 25为山羊抗兔多克隆德克萨斯红®共轭为1/200。

    见复审

  • AB7260通过ICC/IF染色大鼠大脑皮层前体。

    在培养基中培养14天,并涂覆在盖玻片上。预处理为酸性/乙醇固定,并在AB7260孵育前封闭。用Alexa Furor检测结合抗体®488株山羊多克隆抗体。使用DAPI可视化细胞核。

    见复审

  • AB7260免疫组化染色(石蜡包埋切片)在小鼠眼组织切片染色。

    用多聚甲醛固定组织,使用柠檬酸盐缓冲液pH 6进行热介导的抗原检索步骤。样品用0.5% Triton X-100渗透,在25℃下用5%的血清封闭20分钟,然后用一次抗体孵育,稀释1/500倍,在4℃下16小时。所用的第二抗体是山羊抗兔IgG,与Alexa Furor结合。®488的稀释度为1/5000。

    视网膜层包括神经节细胞层(GCL)、内丛状层(IPL)、内核层(INL)、外丛状层(OPL)、外核层(ONL)和感光器外节(ROS)。DAPI对细胞核进行反染。

    见复审

  • GFAP抗体AB7260与3D细胞培养清除试剂盒一起使用AB24329穿透、染色和清除3D神经元球状细胞培养物。蓝色:DAPI,Green:GFAP。

    了解更多关于3D细胞培养清除和组织清除试剂盒、试剂和协议旨在使更容易染色3D细胞培养物和厚组织切片,并获得更多的数据从每个有价值的组织切片。

    使用该抗体清除,使用我们的3D细胞培养清除试剂盒。AB24329. 我们建议开始稀释1:1000,也使用山羊抗兔IgG H&L AlEXAFRO848(AB1500稀释1∶400。

推荐信

该产品已被引用:

  • 韩语等。 两种癫痫模型的基因表达谱揭示了ECM/整合素信号通路参与Epiletogenesis。 神经科学 三百九十六:187—199(2019)。阅读更多(PubMed:30452975)
  • 扎哈达纳布H等。 利福平对脱髓鞘铜吡酮模型的行为缺陷、生化和神经病理学改变的保护作用 细胞因子 一百一十三417-426(2019)。阅读更多(PubMed:30539784)
参见本产品的所有424个出版物

客户评论与问答

-属于106评论或问答

应用
免疫组化(冰冻切片)
样品
小鼠组织切片(脑)
透化作用
是- 0.05% TrITON-X100
规格
阻塞步骤
VTEOR阻断剂为30分钟(S)·浓度的阻断剂:1%℃:23°C
固定剂
多聚甲醛

用户社区

核实客户

十二月07日提交2019

应用
蛋白质印迹法
样品
大鼠组织裂解物(全脑)
凝胶运行条件
还原Denaturing(4-12%凝胶)
装载量
20μg
规格
阻塞步骤
1小时(s)和0分钟(s)·浓度的无蛋白封闭缓冲液:1%℃:24℃

用户社区

核实客户

2019 7月18日提交

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
大鼠组织切片(脊髓)
抗原检索步骤
热传导缓冲液/酶:柠檬酸10毫米,pH6.0
透化作用
规格
脊髓
阻塞步骤
血清阻断剂为30分钟(S)·浓度:2.5%℃:25℃
固定剂
甲醛

用户社区

核实客户

提交的APR 09 2019

应用
免疫组织化学游离漂浮
样品
大鼠组织切片(成年大鼠脑干组织)
规格
成年大鼠脑干组织

用户社区

核实客户

2019 2月28日提交

应用
免疫组化法(福尔马林/PFA固定石蜡切片)
样品
大鼠组织切片(大脑皮层)
抗原检索步骤
热传导-缓冲/酶:TrIS/EDTA
透化作用
规格
大脑皮层
固定剂
甲醛

用户社区

核实客户

2018 9月20日提交

应用
免疫组织化学游离漂浮
样品
大鼠组织切片(脑)
规格

用户社区

核实客户

2018 8月30日提交

应用
蛋白质印迹法
样品
小鼠组织裂解液-全脑
凝胶运行条件
非还原非变性(天然)(10%)
装载量
30μg
治疗
250μg/kg内毒素1周
规格
阻塞步骤
牛奶为1小时(S)和0分钟(S)·浓度的封闭剂:5%℃:温度21℃

韩智慧女士

核实客户

2018 7月31日提交

应用
免疫组化(PFA灌注固定冰冻切片)
样品
大鼠组织切片(大鼠脊髓)
抗原检索步骤
透化作用
是- PBS + 0.2% Triton + 4%牛血清白蛋白
规格
大鼠脊髓
阻塞步骤
BSA作为12小时(S)和0分钟(S)·浓度的阻滞剂:4%℃:温度22℃
固定剂
多聚甲醛

Alexandre Magno博士

核实客户

2018 7月20日提交

应用
免疫组化(冰冻切片)
样品
小鼠组织切片(脑)
透化作用
规格
阻塞步骤
BSA作为2小时(S)和0分钟(S)·浓度的阻滞剂:3%℃:温度21℃
固定剂
甲醛

韩智慧女士

核实客户

2018 5月24日提交

应用
免疫组化(PFA灌注固定冰冻切片)
样品
小鼠组织切片(脑)
抗原检索步骤
透化作用
是- 0.2% Triton X
规格
阻塞步骤
血清阻断剂为1小时(s)和30分钟(s)·浓度:5%℃:RT°C
固定剂
多聚甲醛

J. Y. Seo先生

核实客户

提交的APR 09 2018

-属于106评论或问答

请注意:所有产品仅用于研究用途。不用于诊断程序
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