主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 EpCAM的兔单克隆抗体[EPR20532-225] 适用于:WB、IHC-P、Flow Cyt、IP、mIHC、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔EpCAM单克隆抗体[EPR20532-225] -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 人类 -
免疫原 重组片段。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:野生型HAP1、HCT 116和HT-29细胞裂解物; 人类乳腺癌和胎儿肾裂解物。 IHC-P:人类结肠癌和甲状腺癌组织。 ICC/IF:A431、T47D、HCT 116和HT-29细胞。 流动细胞:A431和HCT 116细胞。 IP:HCT 116细胞裂解物。 mIHC:人类乳腺癌和子宫内膜组织。
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一般注意事项
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:0.05%BSA、40%甘油、PBS -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 EPR20532-225型 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
相关产品
应用程序
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目标
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功能 可能作为肠上皮细胞(IECs)和粘膜上皮内淋巴细胞(IELs)之间的物理亲同性相互作用分子,提供免疫屏障,作为抵抗粘膜感染的第一道防线。 在胚胎干细胞增殖和分化中发挥作用。 上调FABP5、MYC和细胞周期蛋白A和E的表达。 -
组织特异性 由未分化而非分化的胚胎干细胞(ESC)高选择性表达。 一旦ESC分化(蛋白质水平),水平迅速降低。 几乎在所有上皮细胞膜上表达,但在中胚层或神经细胞膜上不表达。 发现于腺癌表面。 -
参与疾病 EPCAM中的缺陷是5型腹泻(DIAR5)的原因[MIM:613217]。 这是一种婴儿顽固性腹泻,特征是绒毛萎缩和无炎症,肠上皮细胞异型增生表现为十二指肠和空肠的局灶上皮簇。 EPCAM缺陷是遗传性非息肉病8型结直肠癌(HNPCC8)的原因[MIM:613244]。 HNPCC是一种与癌症易感性显著增加相关的疾病。 其特征是家族易患早发性结直肠癌(CRC)和胃肠道、泌尿系和女性生殖道的结肠外肿瘤。 据报道,HNPCC是西方世界最常见的遗传性结直肠癌。 临床上,HNPCC通常分为两个亚组。 I型的特征是遗传性易患结直肠癌,发病年龄小,近端结肠癌。 II型的特征是某些组织(如子宫、卵巢、乳腺、胃、小肠、皮肤和喉部以及结肠)的癌症风险增加。 经典型HNPCC的诊断基于阿姆斯特丹标准:3个或更多受结直肠癌影响的亲属,其中一个是其他两个的一级亲属; 2代或2代以上受影响; 一个或多个结直肠癌在50岁之前出现; 排除遗传性息肉病综合征。 术语“疑似HNPCC”或“不完整HNPCC“可用于描述不符合或仅部分符合阿姆斯特丹标准,但强烈怀疑结肠癌遗传基础的家庭。 注=HNPCC8是由于EPCAM的3质点外显子和MSH2上游的基因间区域的杂合缺失导致的,导致表达EPCAM组织中MSH2的转录通读和表观遗传沉默。 -
序列相似性 属于EPCAM系列。 包含1个甲状腺球蛋白1型结构域。 -
翻译后 修改 与自体正常上皮相比,癌组织中高糖基化。 Asn-198的糖基化对蛋白质的稳定性至关重要。 -
手机定位 侧细胞膜。 细胞连接>紧密连接。 在侧细胞膜和紧密连接处与CLDN7共放大。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 17 1A抗体 323/A3抗体 腺癌相关抗原抗体
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图像
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人类子宫内膜的荧光多重免疫组织化学分析(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)。 图A:抗EpCAM融合染色(ab223582,品红色;Opal™690),抗NKG2A( 约260035 ,绿色; Opal™520)和抗CD31( ab182981年 ,红色; Opal™570)对人类子宫内膜的作用。 B组:NK细胞上有抗NKG2A染色。 C组:内皮细胞抗CD31染色。 D组:腺细胞抗EpCAM染色。 蛋白石聚合物HRP Ms+Rb用作二级抗体。 在三轮染色中培养切片:在1/500稀释度(1.008μg/ml)下,按照ab223582的顺序, 约260035 在1/2000稀释度(0.262μg/ml)和 ab182981年 室温下,1/4000稀释(0.137μg/ml)30分钟。 每一轮之后都有一个单独的荧光酪胺信号放大系统。 免疫染色在Leica Biosystems BOND上进行 ® 带有Opal™4色套件的RX仪器。 使用徕卡SP8共焦显微镜进行图像采集。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行20分钟的热介导抗原检索。 DAPI(蓝色)用作核反染剂。 -
人类乳腺癌组织的荧光多重免疫组织化学分析(福尔马林固定石蜡包埋切片)。 抗PD-L1融合染色( ab251611号 ; 青色; Opal™520),抗颗粒酶B( 公元219803年 ; 黄色的; Opal™540),抗-PD1( 约251613 ; 品红; Opal™570),抗pan细胞角蛋白( 约264485 ; 红色; Opal™620),反EpCAM( 约225894 ; 红色; Opal™620),抗CD8α( ab251596年 ; 绿色; Opal™650)和Anti-FOXP3( 约96048 ; 橙色; Opal™690)。 EpCAM和泛细胞角蛋白具有相同的染料和颜色。 染料是假彩色的,以便更好地对比标记。 免疫染色在徕卡生物系统BOND上进行 ® MAX仪器配备Opal™6-Plex检测试剂盒(NEL821001KT,Akoya Biosciences ® ). 切片在六轮染色中培养; 按顺序为 ab251611号 (1/750稀释), 公元219803年 (1/250稀释), 约251613 (1/750稀释), 约264485 (0.5微克/毫升), 约225894 (1/1250稀释), ab251596年 (1/1500稀释)和 约96048 (10微克/毫升); 每个都使用单独的荧光酪胺信号放大系统。 基于EDTA的抗原检索(徕卡生物系统BOND ® 表位检索溶液2,pH 9.0,20分钟)用于轮间酪胺信号放大,以去除前一轮的抗体,避免任何交叉反应。 DAPI(深蓝色)被用作核计数器染色。 使用Vectra 3成像系统(Akoya Biosciences)对单个Opal™染料进行显微镜和假染色 ® ). 此数据由ImmunoAtlas提供,可以找到 在这里 . -
所有车道: 稀释1/1000的抗EpCAM抗体[EPR20532-225](ab223582) 车道1: 野生型A-431(人表皮样癌细胞系)全细胞裂解物 车道2: EPCAM敲除物A-431(人表皮样癌细胞系)全细胞裂解物 3号车道: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 35千帕 观察到的频带大小: 40千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在40 kDa下观察到ab223582。 红色-装载控制, 约7291 (在55kDa下观察到小鼠抗α-管蛋白[DM1A]。 Western blot显示ab223582与A431野生型细胞中的EpCAM反应。 使用EpCAM敲除样品时观察到信号丢失。 对A431野生型和EpCAM敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在与ab223582和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A]在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
石蜡包埋的人甲状腺癌组织用ab223582在1/500稀释度下标记EpCAM,然后用山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)即用免疫组织化学分析。 对人甲状腺癌进行了膜染色观察(PMID:15637741)。 苏木精反染。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体为山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)即用型。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
人类乳腺癌组织的荧光多重免疫组织化学分析(福尔马林固定石蜡包埋切片)。 抗PD-L1融合染色( ab251611号 ; 青色; Opal™520),抗颗粒酶B( 公元219803年 ; 黄色的; Opal™540),抗-PD1( 约251613 ; 品红; Opal™570),抗pan细胞角蛋白( 约264485 ; 红色; Opal™620),反EpCAM( 约225894 ; 红色; Opal™620),抗CD8α( ab251596年 ; 绿色; Opal™650)和Anti-FOXP3( 约96048 ; 橙色; Opal™690)。 EpCAM和泛细胞角蛋白具有相同的染料和颜色。 染料是假彩色的,以便更好地对比标记。 在徕卡生物系统BOND上进行免疫染色 ® MAX仪器配备Opal™6-Plex检测试剂盒(NEL821001KT,Akoya Biosciences ® ). 切片在六轮染色中培养; 按顺序为 ab251611号 (1/750稀释), 公元219803年 (1/250稀释), 约251613 (1/750稀释), 约264485 (0.5微克/毫升), 约225894 (1/1250稀释), ab251596年 (1/1500稀释)和 约96048 (10微克/毫升); 每个都使用单独的荧光酪胺信号放大系统。 基于EDTA的抗原检索(徕卡生物系统BOND ® 表位检索溶液2,pH 9.0,20分钟)用于轮间酪胺信号放大,以去除前一轮的抗体,避免任何交叉反应。 DAPI(深蓝色)被用作核计数器染色。 使用Vectra 3成像系统(Akoya Biosciences)对单个Opal™染料进行显微镜和假染色 ® ). 此数据由ImmunoAtlas提供,可以找到 在这里 . -
人类乳腺癌组织的荧光多重免疫组织化学分析(福尔马林固定石蜡包埋切片)。 抗PD-L1融合染色( ab251611号 ),抗颗粒酶B( 公元219803年 ),抗-PD1( 约251613 ),抗pan细胞角蛋白( 约264485 ),反EpCAM( 约225894 ),抗CD8α( ab251596年 )和抗-FOXP3( 约96048 ). 在徕卡生物系统BOND上进行免疫染色 ® MAX仪器配备Opal™6-Plex检测试剂盒(NEL821001KT,Akoya Biosciences ® ). 切片在六轮染色中培养; 按顺序为 ab251611号 (1/750稀释), 公元219803年 (1/250稀释), 约251613 (1/750稀释), 约264485 (0.5微克/毫升), 约225894 (1/1250稀释), ab251596年 (1/1500稀释)和 约96048 (10微克/毫升); 每个都使用单独的荧光酪胺信号放大系统。 基于EDTA的抗原检索(徕卡生物系统BOND ® 表位检索溶液2,pH 9.0,20分钟)用于轮间酪胺信号放大,以去除前一轮的抗体,避免任何交叉反应。 DAPI(深蓝色)被用作核计数器染色。 使用Vectra 3成像系统(Akoya Biosciences)对单个Opal™染料进行显微镜和假染色 ® ). 此数据由ImmunoAtlas提供,可以找到 在这里 . -
所有车道: 1/5000稀释的抗EpCAM抗体[EPR20532-225](ab223582) 车道1: HCT 116(人结直肠癌细胞系)裂解物 车道2: HT-29(人大肠腺癌细胞系)裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 35千帕 观察到的频带大小: 42千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3分钟 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
流式细胞术重叠直方图显示野生型A431(绿线)和EPCAM敲除的A431细胞用ab223582(红线)染色。 细胞在含有10%正常山羊血清的1x PBS中孵育,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,随后抗体(ab223582)(1x10 6 100μl,0.2μg/ml),在4°C下保持30分钟。 二级抗体山羊抗兔IgG H&L(Alexa Fluor ® 488,预吸附)( 约150081 )于2000年1月在4°C下使用30分钟。 同型对照抗体为兔IgG(单克隆)( 约172730 )在与一级抗体相同的浓度和条件下使用(野生型A431-黑线;EPCAM敲除A431-灰线)。 未标记样本也用作对照(为了简单起见,未显示此行)。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和525/40带通滤波器采集了超过5000个事件。 -
人类乳腺癌组织的荧光多重免疫组织化学分析(福尔马林固定石蜡包埋切片)。 抗PD-L1融合染色( ab251611号 ),抗颗粒酶B( 公元219803年 ),抗-PD1( 约251613 ),抗pan细胞角蛋白( 约264485 ),抗EpCAM( 约225894 ),抗CD8α( ab251596年 )和抗-FOXP3( 约96048 ). 在徕卡生物系统BOND上进行免疫染色 ® MAX仪器配备Opal™6-Plex检测试剂盒(NEL821001KT,Akoya Biosciences ® ). 切片在六轮染色中培养; 按顺序为 ab251611号 (1/750稀释), 公元219803年 (1/250稀释), 约251613 (1/750稀释), 约264485 (0.5微克/毫升), 约225894 (1/1250稀释), ab251596年 (1/1500稀释)和 约96048 (10微克/毫升); 每个都使用单独的荧光酪胺信号放大系统。 基于EDTA的抗原检索(徕卡生物系统BOND ® 表位检索溶液2,pH 9.0,20分钟)用于轮间酪胺信号放大,以去除前一轮的抗体,避免任何交叉反应。 DAPI(深蓝色)被用作核计数器染色。 使用Vectra 3成像系统(Akoya Biosciences)对单个Opal™染料进行显微镜和假染色 ® ). 此数据由ImmunoAtlas提供,可以找到 在这里 . -
人类乳腺癌组织的荧光多重免疫组织化学分析(福尔马林固定石蜡包埋切片)。 抗PD-L1融合染色( ab251611号 ; 青色; Opal™520),抗颗粒酶B( 公元219803年 ; 黄色的; Opal™540),抗-PD1( 约251613 ; 品红; Opal™570),抗pan细胞角蛋白( 约264485 ; 红色; Opal™620),反EpCAM( 约225894 ; 红色; Opal™620),抗CD8α( ab251596年 ; 绿色; Opal™650)和Anti-FOXP3( 约96048 ; 橙色; Opal™690)。 EpCAM和泛细胞角蛋白具有相同的染料和颜色。 染料是假彩色的,以便更好地对比标记。 在徕卡生物系统BOND上进行免疫染色 ® MAX仪器配备Opal™6-Plex检测试剂盒(NEL821001KT,Akoya Biosciences ® ). 切片在六轮染色中培养; 按顺序为 ab251611号 (1/750稀释), 公元219803年 (1/250稀释), 约251613 (1/750稀释), 约264485 (0.5微克/毫升), 约225894 (1/1250稀释), ab251596年 (1/1500稀释)和 约96048 (10微克/毫升); 每个都使用单独的荧光酪胺信号放大系统。 基于EDTA的抗原检索(徕卡生物系统BOND ® 表位检索溶液2,pH 9.0,20分钟)用于轮间酪胺信号放大,以去除前一轮的抗体,避免任何交叉反应。 DAPI(深蓝色)被用作核计数器染色。 使用Vectra 3成像系统(Akoya Biosciences)对单个Opal™染料进行显微镜和假染色 ® ). 此数据由ImmunoAtlas提供,可以找到 在这里 . -
ab223582染色T47D阳性细胞(顶面)和HeLa阴性细胞(底面)的EpCAM。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用浓度为0.1μg/ml的ab223582培养细胞,并 约7291 (小鼠对α-微管蛋白的单克隆抗体),在4°C下稀释1/1000过夜,然后在室温下与山羊对兔IgG的第二抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 该抗体使用100%甲醇固定进行类似的操作。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,显示单个共焦截面。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100透性HT-29(人大肠腺癌细胞系)细胞的免疫荧光分析,在1/500稀释度下用ab223582标记EpCAM,然后用山羊抗Rabbit IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共聚焦图像显示HT-29细胞上的膜染色。 核反染为DAPI(蓝色)。 用抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor)检测管蛋白 ® 594) ( 约195889年 )(红色)稀释1/200。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体为山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )二级抗体的稀释度为1/1000。 -
石蜡包埋人结肠组织的免疫组织化学分析,用ab223582在1/500稀释度下标记EpCAM,然后用山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)即用。 在人结肠上观察到膜染色(PMID:15637741)。 苏木精反染。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体为山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)即用型。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
ab223582染色野生型A431细胞中的EpCAM(顶面板)和EpCAM-敲除A431细胞(底面板)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS吐温透化5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后用浓度为0.1μg/ml的ab223582培养细胞,并 约7291 (小鼠对α-微管蛋白的单克隆抗体),在4°C下稀释1/1000过夜,然后在室温下与山羊对兔IgG的第二抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 这种抗体的表现与100%甲醇固定相似。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,显示单个共焦截面。 -
ab223582在野生型A431细胞(上图)和EpCAM敲除A431细胞(下图)中对EpCAM进行染色。 用100%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab223582以1/5000的稀释度培养细胞 约7291 (小鼠对α-微管蛋白的单克隆抗体),在4°C下稀释1/1000过夜,然后在室温下与山羊对兔IgG的第二抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems TCS SP8)拍摄图像。 -
4%对甲酰甲醛固定、0.1%Triton X-100透性HCT 116(人结直肠癌细胞系)细胞的免疫荧光分析,在1/500稀释度下用ab223582标记EpCAM,然后用山羊抗Rabbit IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共聚焦图像显示HT-29细胞上的膜染色。 核反染为DAPI(蓝色)。 用抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor)检测管蛋白 ® 594) ( 约195889年 )(红色)稀释1/200。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体为山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )二级抗体的稀释度为1/1000。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗EpCAM抗体[EPR20532-225](ab223582) 车道1: 人面包癌裂解物 车道2: 人胎肾裂解物 每条泳道10µg的裂解物/蛋白质。 次要 车道1: IP检测试剂VeriBlot(HRP)( 阿布131366 )稀释度为1/1000 车道2: IP检测试剂VeriBlot(HRP)( 阿布131366 )稀释1/4000 预测的带宽大小: 35千帕 观察到的频带大小: 42千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3分钟 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
合格证书
工具书类 (19)
晶晶H 等。 鳖甲煎丸增强骨髓间充质干细胞对肝癌进展的改善作用。 《国家医学杂志》 76:49-58 (2022). 公共医学:34297271 歌曲G 等。 单细胞转录组分析提示肝内胆管癌有两种分子亚型。 国家公社 13:1642 (2022). 公共医学:35347134 蒋Z 等。 利用基因确定的因素将原代人类肝细胞转化为肝细胞癌。 EMBO代表 23:e54275(2022)。 公共医学:35437924 蒋S 等。 NCAPG2在肺腺癌中维持癌干并促进埃洛替尼耐药。 癌症(巴塞尔) 14:不适用(2022年)。 公共医学:36139554 Ge W公司 等。 肿瘤相关成纤维细胞的一种新的分子标记预测胰腺癌的预后和免疫治疗反应。 国际分子科学杂志 24:不适用(2022年)。 公共医学:36613599