主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[Y329]到eIF4EBP1 适用于:WB、IHC-P、Flow Cyt(Intra)、IP、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆[Y329]到eIF4EBP1 -
寄主物种 兔子 -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HeLa、HAP1、K562和293细胞裂解物。 K-562和HEK-293全细胞裂解物。 小鼠和大鼠骨骼肌溶解。 大鼠L6全细胞裂解物。 IHC-P:人类结肠癌组织。 大鼠和小鼠脾组织。 流式细胞仪(内部):HAP1-WT、HEK-293和HT1080细胞。 IP:HEK-293全细胞裂解物。 ICC/IF:HeLa细胞。
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一般注意事项 eIF4EBP1与eIF4E的结合是可逆的,并且取决于eIF4EBP1的磷酸化状态。 非磷酸化eIF4EBP1将与eIF4E强烈结合,而磷酸化形式则不会。 Akt、TOR、MAP激酶、S6激酶和Cdc2是已知的激酶,能够通过磷酸化苏氨酸35、45、69或丝氨酸64来钝化eIF4EBP1与eIF4E的结合。 尽管如此,并不是所有的磷酸化事件都能同样阻断eIF4EBP1-eIF4E的相互作用。 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高敏感性和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
有关更多信息 请看这里 . 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉布MAb ® 专利 .
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
初级抗体注释 eIF4EBP1与eIF4E的结合是可逆的,并且取决于eIF4EBP1的磷酸化状态。 非磷酸化eIF4EBP1将与eIF4E强烈结合,而磷酸化形式则不会。 Akt、TOR、MAP激酶、S6激酶和Cdc2是已知的激酶,能够通过磷酸化苏氨酸35、45、69或丝氨酸64来钝化eIF4EBP1与eIF4E的结合。 尽管如此,并非所有的磷酸化事件都会同样阻断eIF4EBP1-eIF4E相互作用 -
克隆性 单克隆 -
克隆编号 Y329型 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
重组蛋白
应用
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目标
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功能 通过阻止eIF4E活动汇编到eIF4F复合体中来管理eIF4E活动。 通过激素、生长因子和其他通过MAP激酶和mTORC1途径发出信号的刺激物调节蛋白质翻译。 -
序列相似性 属于eIF4E结合蛋白家族。 -
翻译后 修改 丝氨酸和苏氨酸残基上的磷酸化对胰岛素、EGF和PDGF的反应。 Thr-37、Thr-46、Ser-65和Thr-70处的磷酸化由mTORC1调节。 DNA损伤后发生磷酸化,可能是ATM或ATR引起的。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 1978 人类 Entrez基因: 13685 鼠标 Entrez基因: 116636 老鼠 Omim公司: 602223 人类 瑞士保护银行: 问题13541 人类 瑞士保护银行: Q60876问题 鼠标 瑞士保护银行: Q62622问题 老鼠 尤尼金: 411641 人类
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替代名称 4E-BP1抗体 4EBP1抗体 4EBP1_HUMAN抗体
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图像
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所有车道: 抗eIF4EBP1抗体[Y329](ab32024),1/2000稀释(纯化) 车道1: HEK-293(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: K-562(人慢性粒细胞白血病淋巴细胞)全细胞裂解物 3号车道: 小鼠骨骼肌裂解物 车道4: 大鼠骨骼肌裂解物 车道5: L6(大鼠骨骼肌成肌细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗兔IgG(HRP)与人IgG在1/2000稀释度下具有最小交叉反应性 预测的带宽大小: 13千Da 观察到的频带大小: 18千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 观察到的分子量与文献(PMID:28613975、20890458和27358481)中的描述一致。 -
所有车道: 抗eIF4EBP1抗体[Y329](ab32024) 车道1: 野生型HAP1细胞裂解物 车道2: elF4EBP1敲除HAP1细胞裂解物 3号车道: HEK293细胞裂解物 车道4: K562细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 13千Da 1-4车道 :合并信号(红色和绿色)。 绿色-在20 kDa下观察到ab32024。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 在野生型Hap1细胞中,ab32024与elF4EBP1特异性反应。 对野生型和elF4EBP1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab32024和 约8245 (GADPH的负荷控制)分别稀释1/5000和1/2000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附液开发印迹( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1h。 -
HEK-293(人类胚胎肾上皮细胞)细胞的细胞内流式细胞术分析,用纯化的ab32024在1/20稀释度(10µg/mL)下标记eIF4EBP1(红色)。 细胞用4%多聚甲醛固定,用90%甲醇渗透。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488中, 约150077 )2000年1月使用二级抗体。 同位素对照-兔单克隆IgG(黑色)。 未标记对照-未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞(蓝色)。 -
大鼠脾组织切片免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,用纯化的ab32024在1/200稀释度(0.53µg/mL)下标记eIF4EBP1。 使用Bond™表位检索溶液2(pH 9.0)进行热介导抗原检索。 兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB( 约209101 )用作第二抗体。 阴性对照:PBS代替一抗。 苏木精用作副染色。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析小鼠脾组织切片,用纯化的ab32024以1/200稀释(0.53µg/mL)标记eIF4EBP1。 使用Bond™表位检索溶液2(pH 9.0)进行热介导抗原检索。 兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB( 约209101 )用作第二抗体。 阴性对照:PBS代替一抗。 苏木精用作副染色。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析在1/200稀释度(0.53µg/mL)下用纯化ab32024标记eIF4EBP1的人结肠癌组织切片。 使用Bond™表位检索溶液2(pH 9.0)进行热介导抗原检索。 兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB( 约209101 )用作第二抗体。 阴性对照:PBS代替一抗。 苏木精用作副染色。 -
所有车道: 抗eIF4EBP1抗体[Y329](ab32024),1/5000稀释 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: EIF4EBP1敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 13千Da 观察到的频带大小: 13千Da 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在13 kDa下观察到ab32024。 红色-加载控制 约8245 在37 kDa时观察到。 ab32024抗-eIF4EBP1抗体[Y329]显示与野生型HeLa细胞中的eIF4EBP特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约264784 (敲除细胞裂解物 约257146 )已使用。 对野生型和eIF4EBP1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab32024和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以5000倍和20000倍的稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
重叠直方图显示用ab32024染色的HAP1野生型(绿线)和HAP1-EIF4EBP1敲除细胞(红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清中培养细胞,以阻止非特异性蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab32024,0.1µg/ml)培养30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H&L)预吸收( 约150081 )在22°C下以1/2000稀释30分钟。 一种兔IgG同型控制抗体( 约172730 )在与第一抗体相同的浓度和条件下使用(HAP1野生型-黑线,HAP1-EIF4EBP1敲除-灰线)。 未标记样本也用作对照(为了简单起见,未显示此行)。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和530/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 该抗体也可用于用4%甲醛固定的HAP1细胞(10分钟),在相同条件下用0.1%PBS Triton X-100透化15分钟。 -
HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)的免疫细胞化学/免疫荧光分析,用纯化的ab32024以1/500稀释度(5µg/ml)标记eIF4EBP1。 用4%PFA固定细胞,并用0.1%tritonX-100渗透。 约150077 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)以1/1000稀释度作为二级抗体。 用DAPI对细胞核进行复染。 使用PBS代替初级抗体作为阴性对照。
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (35)
Zhang L和Su X 生物活性肽通过下调ALKBH5介导的EIF4EBP1和MLST8 mRNA的m6A去甲基化抑制急性髓系白血病细胞增殖。 细胞肿瘤(Dordr) 45:355-365 (2022). 工作分解结构 ; 人类 . 公共医学:35579750 陈杰 等。 mTOR抑制剂改善高血压大鼠睾酮诱导的心肌肥厚。 内分泌杂志 252:179-193(2022)。 公共医学:34874016 Akusjärvi SS公司 等。 HIV-1精英控制表型的综合蛋白转录和免疫表型特征:糖酵解和HIF信号之间的相互作用。 i科学 25:103607 (2022). 公共医学:35005552 Sawaguchi S公司 等。 低髓鞘性白细胞营养不良症8(HLD8)-POLR3B的相关突变导致少突胶质细胞形态分化缺陷,其作用被布洛芬逆转。 神经Int 14:212-244 (2022). 公共医学:35225888 吴Z 等。 能量剥夺诱导的AMPK激活通过靶向PrlR和PGC-1α抑制牛奶合成。 小区通信信号 20:25 (2022). 公共医学:35248054