主要功能和细节
兔EEA1多克隆-早期内切体标记 适用人群:ICC/IF、WB 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、狗、人类、非洲爪蟾、中国仓鼠 同位素:IgG
使用重组抗体获得更好的批间重现性
充满信心的研究——每批产品的结果一致且可重复 长期和可扩展的供应–由重组技术提供动力,实现快速生产 第一次实验的成功——通过广泛验证证实了特异性 符合道德标准–生产无动物
概述
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产品名称 -
描述 兔EEA1多克隆-早期内切体标记 -
寄主物种 兔子 -
特异性 在人类细胞系的Western blotting中检测到代表EEA1的180kDa带(对应于Mu等人的结果)。 同样检测到100kDa的波段,我们不确定这个波段的身份。 HeLa细胞中EEA1的免疫荧光染色产生与内体细胞质分布一致的点状染色模式。 从2024年1月起,该多克隆补货批次的QC测试发生了变化。 我们的Abcam产品承诺仍涵盖所有测试和预期的应用和反应物种组合。 然而,我们不再测试所有应用程序。 有关特定批次的更多信息,请联系我们的科学支持部门,他们将乐于提供帮助。 您可能也对我们的替代重组抗体感兴趣, 澳大利亚银行109110 . -
经过测试的应用程序 -
物种反应性 与以下物质反应: 小鼠、大鼠、狗、人、非洲爪蟾、中国仓鼠 预计用于: 鸡肉、仓鼠、奶牛、斑马鱼、恒河猴、海兔 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 ICC:HepG2细胞
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一般注意事项 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
属性
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表格 液体 -
储存说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储缓冲区 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS 浓度<1mg/ml的该产品批次可以添加BSA作为稳定剂。 如果您想了解有关特定批次配方的信息,请联系我们的科学支持团队,他们将乐于提供帮助。 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 免疫原亲和力纯化 -
克隆性 多克隆 -
同位素 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
目标
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功能 结合含有磷脂酰肌醇3-磷酸的磷脂囊泡并参与胞内运输。 -
序列相似性 包含1个C2H2型锌指。 包含1个FYVE型锌指。 -
域 FYVE型锌指结构域在早期内体膜中介导与磷脂酰肌醇3-磷酸的相互作用并穿透双层。 在酸性条件下,FYVE结构域插入到富含PtdIns(3)P的膜中显著增加。 -
手机定位 细胞质。 早期内体膜。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
替代名称 早期内体抗原1抗体 早期内体抗原1162kD抗体 早期内体相关蛋白抗体
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图像
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ab2900染色HepG2细胞EEA1。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%PBS Triton X-100透化5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用ab2900以5µg/ml和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 488),以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 ab150120型 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物(20µg) 车道2: EEA1敲除HAP1全细胞裂解物(20µg) 3号车道: HeLa全细胞裂解物(20µg) 车道4: NIH3T3全细胞裂解物(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在162 kDa时观察到ab2900。 红色-装载控制, 约18058 ,在130 kDa下观察到。 ab2900显示在野生型HAP1细胞中识别EEA1,因为在EEA1敲除细胞中信号在预期MW处丢失。 在野生型和敲除型细胞中观察到额外的交叉反应带。 对野生型和EEA1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab2900和 约18058 (小鼠抗Vinculin负荷控制)分别在4°C、1μg/ml和1/20000稀释度下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
所有车道: 抗-EEA1抗体-早期内体标记物(ab2900),1µg/ml 车道1: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: HEK-293(人胚胎肾上皮细胞系)全细胞裂解物 3号车道: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)全细胞裂解物 车道4: HeLa全细胞裂解物 车道5: HEK-293全细胞裂解物 车道6: NIH 3T3全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊与兔IgG H&L(HRP)的多克隆(1/50000稀释) 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 160千帕 观察到的频带大小: 180千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 100kDa。 我们不确定这些额外波段的身份。 暴露时间: 30秒 该印迹是在TA缓冲系统下使用3-8%醋酸三钠凝胶产生的。 凝胶在150V下运行60分钟,然后在30V下转移到硝化纤维膜上70分钟。 然后使用2%牛血清白蛋白(Lanes 1-3)或3%牛奶(Lanes 4-6)封闭膜一小时,然后在4°C下与ab2900孵育过夜。 使用与HRP结合的抗兔抗体检测抗体结合,并使用ECL显影液进行可视化 约133406 . Abcam建议使用牛奶作为阻塞剂。 Abcam欢迎客户反馈,欢迎对本产品和上述数据提出任何意见。 -
所有车道: 抗-EEA1抗体-早期内体标记物(ab2900),稀释度为1/1000 车道1: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)核裂解物 车道2: HeLa全细胞裂解物 3号车道: A431(人表皮样癌细胞系)全细胞裂解物 车道4: Jurkat(外周血T细胞白血病细胞系)全细胞裂解物 车道5: HEK-293(人胚胎肾上皮细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: Alexa Fluor抗兔药,稀释度为1/50000 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 160千帕 观察到的频带大小: 180千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 100千Da、41千Da和50千Da。 我们不确定这些额外波段的身份。 二级抗体的荧光检测。 -
大鼠海马神经元固定原代培养物(胚胎第18天)的共焦显微镜显示兔多克隆对EEA1(ab2900,1/200;Alexa Fluor 488 1/200;绿色)和单克隆小鼠抗β的免疫细胞化学标记。 -
ab2900用ICC/IF染色小鼠L细胞。细胞固定在甲醛中,在Triton X-100中渗透,并在37°C下与稀释为1/1000的ab2900孵育1小时。 使用Cy2®结合的山羊抗兔抗体作为次要抗体。 -
所有车道: 抗-EEA1抗体-早期内体标记物(ab2900),1/500稀释 车道1: HEK-293(人胚胎肾上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: HEK293人EEA1肽全细胞裂解液( 约14946 )1µg 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab6721号 )稀释1/5000 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 160千帕 观察到的频带大小: 180千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 泳道1-2:EEA1抗体-早期内体标记物(ab2900),1/500稀释,HEK293全细胞裂解物,20μg 车道1:同上 通道2:EEA1肽( 约14946 )1 ug时 次要 山羊多克隆至兔IgG H&L(HRP)( ab6721号 )稀释1/5000 在还原条件下进行。 预计带宽:160kD 观察到的带宽大小:180kD(为什么实际带宽大小与预测值不同?) -
所有车道: 抗-EEA1抗体-早期内体标记物(ab2900),1µg/ml 车道1: 非洲爪蟾裂解物 车道2: 小鼠3T3细胞裂解物 3号车道: 小鼠脑细胞裂解物 车道4: 小鼠肝细胞裂解物 车道5: 大鼠脑细胞裂解物 车道6: 大鼠肝细胞裂解物 7号车道: 狗裂解物 第8车道: CHO细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab6721号 )稀释1/5000 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 160千帕 观察到的频带大小: 100180千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 30秒 Western blot显示 约14944 对小鼠3T3和CHO细胞裂解物有强烈反应。 爪蟾、鼠脑、鼠肝、鼠脑和狗裂解物的交叉反应性较弱。 抗体似乎不会与大鼠肝裂解物发生交叉反应。
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (239)
米勒特五世 等人。 Rabaptin5通过FIP200和ATG16L1靶向受损的内切体和沙门氏菌液泡的自噬。 EMBO代表 23:e53429(2022)。 公共医学:34704340 Shrivastava R公司 等人。 Rabaptin5是Rab7l1介导的吞噬体成熟过程的关键调节因子。 免疫学 165:328-340 (2022). 公共医学:34888849 Barthet VJA公司 等人。 DRAM-4和DRAM-5是营养缺乏条件下自噬和细胞存活的补偿调节因子。 FEBS J公司 289:3752-3769 (2022). 公共医学:35060334 王菲 等人。 p97抑制剂UPCDC-30245阻断内溶酶体降解。 制药(巴塞尔) 15:无(2022)。 公共医学:35215314 政府V 等人。 人脑胶质瘤中的表观和内吞是不同的,取决于细胞的空间组织。 美国国家科学院程序 119:不适用(2022)。 公共医学:35217608