主要功能和细节
分析类型:基于细胞 检测方法:荧光法 平台:流式细胞仪、荧光显微镜 样品类型:粘附细胞、悬浮细胞
概述
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产品名称 -
检测方法 荧光 -
样品类型 粘附细胞、悬浮细胞 -
分析类型 基于细胞 -
产品概述 EdU Assay/EdU染色增殖试剂盒(iFluor 647)ab222421提供了一种灵敏而稳健的方法,可以使用流式细胞术或荧光显微镜检测和量化活哺乳动物细胞中的细胞增殖。 iFluor 647染料(Ex/Em:649/664 nm)的光谱特性几乎与Cy5相同 ® 和其他红色荧光灯。
EdU染色方案总结(每个步骤之间清洗细胞): -向要染色的细胞中添加EdU溶液 -在最佳生长条件下培养细胞2-4小时 -加入固定液,孵育15分钟 -添加渗透缓冲液并孵育15/20min -添加反应混合物以荧光标记EdU并孵育30分钟 -流式细胞仪/荧光显微镜分析
EdU染色也可以与抗体染色或与其他荧光染料的细胞染色相结合。
该试剂盒提供了足够的试剂,可进行50次流式细胞术测试或50次显微镜测试(适用于18 x 18 mm盖玻片)或200次显微镜测试。 -
笔记 以前称为EdU增殖检测试剂盒(iFluor 647)。 测量DNA增殖最准确的方法是直接测量DNA合成。 最常见的方法是使用基于抗体的核苷类似物溴脱氧尿苷(BrdU)检测。 EdU(5-乙炔基-2'-脱氧尿苷)是一种胸腺嘧啶类似物,是BrdU的替代品,也用于比BrdU分析更简单、更快的DNA增殖分析。 注:EdU也可作为自由分子 约146186 (教育)。 在EdU染色中,样本内的细胞将EdU并入新合成的DNA中。 然后添加荧光叠氮化物,例如iFluor-488。 荧光叠氮化物足够小,可以在天然组织和DNA中自由扩散,并且在“点击”化学反应中与EdU共价交联。 与使用BrdU相比,EdU染色的主要优点是: -EdU染色不需要苛刻的DNA水解/DNA变性步骤(与BrdU分析不同,该分析用于使BrdU抗体接触DNA中的BrdU) -EdU染色比BrdU染色更快,步骤更少 Abcam没有也不打算为客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品申请REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 -
站台 流式细胞仪、荧光显微镜
属性
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储存说明 储存于-20°C。 请参阅协议。 -
组件 50次测试 10X渗透缓冲液 1 x 25毫升 叠氮iFluor 647染料(500µM) 1 x 130微升 硫酸铜(100 mM) 1 x 1毫升 二甲基亚砜(DMSO) 1 x 4.25毫升 教育部 1 x 10毫克 固定剂(40%甲醛溶液) 1 x 5毫升 抗坏血酸钠 1 x 400毫克 -
研究领域 -
关联 细胞增殖是细胞的增殖或繁殖,是细胞生长和分裂的结果,导致细胞群体的扩大。 -
替代名称 细胞毒性 单元格跟踪
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图像
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EdU-647染色(Y轴,647)与FSC的点图。 10 6 HeLa细胞与规定浓度的EdU孵育3小时。 对照细胞(下图)仅与培养基一起培养。 在Accuri C6细胞仪(BD Biosciences)上采集图像,细胞使用640 nm激光激发,数据使用FlowJo(v10)进行分析。 选通细胞百分比(EdU阳性)突出显示。 -
EdU-647染色(Y轴,647)与FSC的点图。 10 6 HeLa细胞与规定浓度的EdU孵育3小时。 此图显示的是仅用培养基培养的对照细胞。 在Accuri C6细胞仪(BD Biosciences)上采集图像,细胞使用640 nm激光激发,数据使用FlowJo(v10)进行分析。 选通细胞百分比(EdU阳性)突出显示。 -
增殖细胞的EdU染色。 HeLa细胞(4 x 10 4 用20μM EdU培养3小时。 使用TCS SP8共焦显微镜(Leica-Microsystems)分析细胞。 DNA(蓝色)染色 赫斯特33342(ab145597) 紫色细胞显示EdU/Hoechst阳性细胞。 -
增殖细胞的EdU染色。 HeLa细胞(4 x 10 4 用10μM EdU培养3小时。 使用TCS SP8共焦显微镜(Leica-Microsystems)分析细胞。 DNA(蓝色)染色 赫斯特33342(ab145597) 紫色细胞显示EdU/Hoechst阳性细胞。
协议
数据表和文件
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工具书类 (22)
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