主要功能和细节
分析时间:2小时30分钟 样本类型:DNA
概述
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产品名称 DNA文库准备试剂盒(用于Illumina®) -
样品类型 DNA -
检测时间 2小时 3000万 -
产品概述 DNA文库制备试剂盒(适用于Illumina®)(ab185903)是一套完整的优化试剂,用于成功制备DNA文库。 该试剂盒适用于使用Illumina测序器为下一代测序应用程序准备DNA库,该测序器包括基因组DNA-seq、ChIP-seq、MeDIP/hMeDIP-seq、亚硫酸氢盐-seq和靶向重新测序。 该试剂盒的优化协议和组件允许快速构建非条形码(单重)和条形码(多重)DNA库,并减少偏差。 起始材料 起始材料可以包括从各种组织或细胞样本中分离的片段dsDNA、从ChIP反应中富集的dsDNA、MeDIP/hMeDIP反应或外显子捕获。 DNA应该相对不含RNA,因为大部分RNA会损害末端修复和dA拖尾,导致结扎能力降低。 DNA的输入量可以从5 ng到1µg。 为了实现最佳制备,输入量应为100 ng至200 ng。对于无扩增,需要500 ng或更多。 Illumina®是Illumina公司的注册商标。 -
笔记 DNA文库的制备是下一代测序(NGS)的关键步骤。 为了生成准确的NGS测序数据,所制备的文库DNA应具有足够的产量和高质量。 此外,随着NGS技术的不断改进,DNA文库的制备也需要进行相应的优化。 不幸的是,目前使用的大多数方法都耗时、昂贵且不方便。 一些方法通过结合末端修复和dA拖尾甚至一步结扎相对较快,但已证明在结扎步骤产生显著的G拖尾或形成凹坑,或具有较高的插入偏倚。 这些副反应最终导致制备的DNA文库效率较低且不准确。 理想的DNA文库制备方法应在速度、方便性、小样本适用性、成本效益和准确性方面取得平衡。 -
经过测试的应用程序
属性
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储存说明 请参阅协议。 -
组件 12次测试 24次测试 10X dA-尾矿缓冲器 1 x 40微升 1 x 80微升 10X末端修复缓冲器 1 x 40微升 1 x 80µl 2X HiFi PCR主混音 1 x 160微升 1 x 320微升 2X结扎缓冲液 1 x 250微升 1 x 500微升 适配器(50μM) 1 x 15微升 1 x 30微升 洗脱缓冲液 1 x 1毫升 1 x 2毫升 末端修复酶混合物 1 x 25µl 1 x 50微升 克莱诺碎片(3'-5'exo-) 1 x 15微升 1 x 30微升 MQ绑定珠 1 x 1.6毫升 1 x 3.2毫升 底漆I(10μM) 1 x 15微升 1 x 30µl 底漆U(10μM) 1 x 15微升 1 x 30微升 T4 DNA连接酶 1 x 15µl 1 x 30微升 -
研究领域
相关产品
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应用
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协议
数据表和文件
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