概述
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产品名称 -
样品类型 细胞培养上清液,细胞培养提取物,组织 -
分析类型 酶活性 -
物种反应性 与以下物质反应: 小鼠、大鼠、奶牛、人类 -
产品概述 包含48个试纸和必要的成分,用于量化人、牛、大鼠和小鼠样品中复合物I酶复合物的活性。 该套件包括足够的材料,用于生成标准曲线和评估几个未知样品。 在本试验中,抗复合物I单克隆抗体(mAbs)的特异性与特征良好的复合物I凝胶内活性试验相结合,该试验对鱼藤酮不敏感。 首先,复合物I在试纸上被免疫捕获(即以活性形式免疫沉淀)。 其次,将试纸浸入以NADH为底物、硝基四氮唑蓝(NBT)为电子受体的复合物I活性缓冲溶液中。 免疫捕获复合物I氧化NADH,产生的H+降低NBT,在量油尺上的复合物I抗体线处形成蓝紫色沉淀。 该沉淀物的信号强度对应于样品中复合物I酶活性的水平。 结合量油尺分析试剂盒测量复合物I数量( 澳大利亚银行109722 /人体样品MS131; 约109875 /MS133用于啮齿动物样品),可以确定免疫捕获复合物I的相对比活性。信号强度最好由油尺阅读器测量或可由标准成像系统分析。 -
经过测试的应用程序 -
站台 试剂
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应用
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图像
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使用ab109720测量人类成纤维细胞样品中复合物I活性的示例。 使用阳性对照样品和相关标准曲线,从1:2稀释系列中开发出油尺。 起始材料为30µg成纤维细胞蛋白提取物。 -
使用ab109720测量人类成纤维细胞样品中复合物I活性的示例。 根据标准曲线,将15µg蛋白质提取物加载到每个样品的量油尺上。 图中显示了四个开发的量油尺、一个控制样本(1)和三个未知量(2-4)。 信号强度分析和标准曲线插值显示,未知样本的复合物I活性水平在14-61%之间。 -
Abcam的酶活性测定采用了一种新的方法,即在随后的功能分析之前,首先从组织或细胞样本中免疫捕获目标酶。 试纸ELISA试剂盒通过利用成熟的侧向流概念扩展了这一概念,其中捕获抗体被条带到硝化纤维素膜上,并且毛细垫通过抗体带提取样品。 我们所有的ELISA试剂盒都使用经过高度验证的单克隆抗体和专用缓冲液,它们能够在完全完整、功能活跃的状态下捕获甚至非常大的酶复合物。 -
ab109720用于定量HCT116细胞中的复合物I活性。 按照手册中的说明使用该套件。 很快:细胞被刮去并在提取缓冲液中溶解。 通过离心去除细胞碎片,通过Bradford分析测定蛋白质浓度。 将增加的蛋白质量(如图所示)作为标准曲线应用于每个孔。 使用标准平板扫描仪代替Dipstick-reader。 由于结果带的对比度较低,图像的亮度和对比度随后进行了调整。 按照手册的建议开发45分钟。
协议
数据表和文件
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SDS下载 -
数据表下载
工具书类 (48)
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